高三生物一轮复习教学案-(4).docx

高三生物“一轮”复习教学案【课 题】DNA 的粗提取与鉴定【考点要求】1. 掌握 DNA 粗提取与鉴定的原理2. 能够掌握提取 DNA 的实验操作中的主要步骤3. 熟练进行实验操作，掌握实验方法4. 根据实验目的和要求进行实验设计【基础梳理】1．提取 DNA 的方法提取生物大分子的基本思路是 对于 DNA 的粗提取而言，就是要利用 、 等在物理和化学性质方面的差异，提取 DNA，去除其他成分1） DNA 的溶解性 DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的 中溶解度不同， 利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使 充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反， 以达到分离目的①在什么浓度下，DNA 的溶解度最小？DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度是如何变化的？②如何通过控制 NaCl 溶液的浓度使 DNA 在盐溶液中溶解或析出？此外，DNA 不溶于 溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精利用这一原 理，可以将 DNA 与蛋白质进一步的分离2） DNA 对酶、高温和洗涤剂的耐受性 蛋白酶能水解 ，但是对 没有影响大多数蛋白质不能忍受 60—80oC 的高温，而 DNA 在 以上才会变性。

洗涤剂能够瓦解 ，但对 DNA 没有影响3） DNA 的鉴定 在 条件下，DNA 遇 会被染成 色， 因此二苯胺可以作为鉴定 DNA 的试剂2．实验设计1 ） 实 验 材 料 的 选 取 凡 是含 有 的 生物 材 料 都可 以 考虑 ， 但 是使 用的生物组织，成功的可能性更大在下面的生物材料中选取适合的实验材料：鱼卵、猪肝、菜花（花椰菜）、香蕉、鸡血、哺乳动物的红细胞、猕猴桃、洋葱、豌豆、 菠菜、在液体培养基的大肠杆菌思考：哺乳动物的红细胞的特点？2）破碎细胞，获取含 DNA 的滤液 动物细胞的破碎比较容易，以鸡血细胞为例，在鸡血细胞液中加入一定量的 ，同时用 搅拌，过滤后收集滤液即可如果实验材料是植物细胞，需要先用 溶解细胞膜例如，提取洋葱的 DNA 时，在切碎的洋葱中加入一定的 和 ，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液思考：14①为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂？②加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么？③如果研磨不充分，会对实验结果产生怎样的影响?④此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分？3）去除滤液中的杂质思考：为什么反复地溶解与析出 DNA，能够去除杂质？4） DNA 的析出与鉴定 将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积 、冷却的 ， 静置 ，溶液中会出现 ，这就是粗提取的 DNA。

用玻璃棒搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸取上面的水分取两支 20ml 的试管，各加入物质的量浓度为 的 NaCl 溶液 5ml，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解然后，向两支试管中各加入 4ml 的 混合均匀后，将试管置于 中加热 5min，待试管冷却后，比较两支试管溶液颜色的变化，看看溶解有 DNA 的溶液是否变 3．操作提示以血液为实验材料时，每 100ml 血液中需要加入 3g ，防止 加入洗涤剂后，动作要 、 ，否则容易产生大量的泡沫，不利于后续步骤地操作加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要 ，以免 ，导致 DNA 分子不能形成絮状沉淀二苯胺试剂要 ，否则会影响鉴定的效果典例分析】本实验中有三次过滤：⑴过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液⑵过滤含粘稠物的 0.14mol/LNaCl 溶液⑶过滤溶解有 DNA 的 2mol/LNaCl 溶液以上三次过滤分别为了获得（ ）A 含核物质的滤液、纱布上的粘稠物、含 DNA 的滤液B 含核物质的滤液、滤液中 DNA 粘稠物、含 DNA 的滤液C 含核物质的滤液、滤液中 DNA 粘稠物、纱布上的 DNAD 含较纯的 DNA 滤液、纱布上的粘稠物、含 DNA 的滤液2《DNA 粗提取和鉴定反馈练习》1.在研究 DNA 的基因样本前，采集来的血样需要蛋白水解酶处理，然后用有机溶剂除去蛋白质。

用蛋白水解酶处理血样的目的是（ ）A.除去血浆中的蛋白质 B.除去染色体上的蛋白质C.除去血细胞表面的蛋白质D.除去血细胞中的所有的蛋白质，使 DNA 释放，便于进一步提纯2．与析出 DNA 粘稠物有关的叙述，不正确的是（ ）A.操作时缓缓滴加蒸馏水，降低 DNA 的溶解度B.在操作 A 时，用玻璃棒轻缓搅拌，以保证 DNA 分子完整C.加蒸馏水可同时降低 DNA 和蛋白质的溶解度，两者均可析出D.当丝状粘稠物不再增加时，此时 NaCl 的浓度相当于 0.14mol/L3．洗涤剂能够瓦解（ ），但对 DNA 没有影响A.细胞壁 B.细胞膜 C.细胞核 D.细胞质4．在沸水浴的条件下，DNA 遇（ ）会被染成蓝色A.斐林试剂 B.苏丹Ⅲ染液 C.双缩脲试剂 D.二苯胺5．在 DNA 提取过程中，最好使用塑料试管和烧杯，目的是（ ）A.不易破碎 B.减少提取过程中 DNA 的损失 C.增加 DNA 的含量 D.容易洗刷6．下列操作中，对 DNA 的提取量影响最小的是（ ）A.使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，放出 DNA 等核物质B.搅拌时，要使用玻璃棒沿一个方向轻缓搅拌C.在“析出 DNA 粘稠物”时，要缓缓加蒸馏水，直至溶液中粘稠物不再增加D.在用酒精沉淀 DNA 时，要使用冷酒精，甚至再将混合液放入冰箱中冷却E 在 DNA 的溶解和再溶解时，要充分搅拌7．DNA 的粗提取中，将与滤液体积相等的、冷却的（ ），静置 2—3min，溶液中会出现白色丝状物。

A.0．9%的 NaCl B.0.14mol/L 的 NaCl 溶液C.质量分数 15%的 HCl D.体积分数为 95%的酒精溶液8.以血液为实验材料时，需要向血液中加入（ ），防止血液凝固A.醋酸钠 B.龙胆紫 C.柠檬酸钠 D.醋酸洋红9.在向溶解 DNA 的 NaCl 溶液中，不断加入蒸馏水的目的是（ ）A.加快溶解 DNA 的速度B.加快溶解杂质的速度C.减少 DNA 的溶解度，加快 DNA 析出D.减小杂质的溶解度，加快杂质的析出10.去除滤液中的杂质时，直接在滤液中加入嫩肉粉，利用嫩肉粉中的（ ）分解蛋白质A.胃蛋白酶 B.胰蛋白酶 C.木瓜蛋白酶 D.肠肽酶3二、非选择题1．提取鸡血中 DNA 时，要除去血液中的上清液，这是因为什么？2．填写本实验完成下列实验操作时所用试剂⑴提取鸡血细胞中核物质 ⑵溶解核内 DNA： ⑶析出 2mol/LNaCl 溶液中的 DNA ⑷DNA 粘稠物的再溶解 ⑸提取杂质较少的 DNA 白色乳状丝状物 ⑹DNA 的鉴定 3.关于 DNA 粗提取的实验材料的选择，也经过了多次实验效果的比较，最终选择鸡血做实验材料的原因是什么？请回答下列问题：⑴鸡血细胞中红细胞 ，家鸡属于鸟类，新陈代谢旺盛，因而血液中 细胞树木较多，可以提供丰富的 。

⑵实验前由老师制备血细胞液供同学们做实验材料，而不用鸡全血，主要原因是 ⑶生活在牧区的人们，采集牛、羊和马血比较方便，若他们按实验要求完成实验步骤后， 结果是 ，这是因为这些动物和人一样，成熟的红细胞中 ， 但若改用动物肝脏做实验材料，实验能顺利进行这是因为 ⑷若选用动物肝脏做实验材料，在提取之前，最好增加 程序，使组织细胞更易分离4、以花椰菜为实验材料进行 DNA 的粗提取实验：（1） 准备材料：将新鲜的花椰菜和体积分数为 95％的酒精溶液放入冰箱冷却 24h2） 研磨细胞，获取含 DNA 的滤液：将花椰菜中加入一定的洗涤剂和食盐，进行成分的搅拌和研磨，过滤后收集滤液1 加入洗涤剂的作用是什么？2 加入食盐的作用是什么？3 这一步是实验成功与否的关键，如果研磨不充分，会对实验结果产生怎样的影响？4 此步骤获得的滤液中可能会有哪些细胞成分？（3） 去除溶液中的杂质，也就是 DNA 的纯化1 DNA 的纯化利用了 DNA 的哪些特性？2 根据实际情况，写出你去除杂质的设计方案并写出方案依据的原理？（4） DNA 的析出与鉴定：DNA 鉴定的方法有哪些？4。