第4章食品中常见农药兽药残留速测技术课件.ppt

第4章 食品中常见农药、兽药残留的速测技术 主要内容主要内容一一、农药中毒事件、农药中毒事件二、农药概述二、农药概述三、农药残留快速检测三、农药残留快速检测四、四、兽药概述兽药概述五、五、兽药安全事件兽药安全事件六、兽药残留快速检测六、兽药残留快速检测农药中毒事件回顾海南“毒豇豆”事件2010年1月，海南豇豆在武汉白沙洲农副产品市场连续三次被检测出含有禁用农药水胺硫磷水胺硫磷随后在武汉、上海、郑州、合肥、杭州、广州等11个城市检测出海南豇豆农药残留超标仅武汉销毁毒豇豆3596.9公斤水胺硫磷，是一种高毒性农药，早在2002年，农业部已将它例如黑名单中，禁止在水果蔬菜、中草药植物上使用它能经由食道、皮肤和呼吸道，引起人体中毒青岛“毒韭菜”事件2010年4月，青岛一些医院陆续接到9名食用韭菜后中毒的患者，他们都是食用韭菜之后出现了头疼、恶心、腹泻等症状经医院检查属于有机磷中毒，也就是说韭菜上的残余农药严重超标导致中毒随后，检出农药残留超标韭菜1930公斤农药中毒事件回顾张裕红酒农药超标事件2012年8月7日某媒体报道：记者将三家国内葡萄酒上市公司的十款葡萄酒送国家食品质量监督检验中心检测，均检出多菌灵或甲霜灵农药残留，而张裕产品残留值超过另两家。

多菌灵为美国禁用的农药，有导致肝癌的风险张裕A股价直奔跌停，最终大跌9.83%农药中毒事件回顾大葱农药超标毒死百只羊2017年8月，山东一个专门养羊的专业户为了给羊增加营养，特地从沈阳买进很多的大葱来喂羊，可是羊吃了这些大葱之后开始发生抽搐，经兽医抢救，羊还是大批死亡后来找卫生防疫部门进行检测，在大葱里发现了甲拌磷、毒死蜱等剧毒农药农药中毒事件回顾青岛市民吃西瓜中毒事件2015年4月，山东即墨市、胶州市17位市民食用西瓜后出现呕吐头晕现象，甚至造成一名孕妇胎儿不保，引发社会关注青岛官方通报，西瓜来源系海南万宁出产的冰糖黑美人西瓜，初步判定为农药残留超标农药中毒事件回顾2001年，杭州的空心菜有机磷中毒事件2003年，南京蔬菜有机磷残留导致中毒的事件2007年，福建大田发生有机磷污染水源导致中毒事件2008年1月，日本发生饺子中毒事件，该饺子被化验出含甲胺磷残留2008年1月9日，中国决定停止甲胺磷、对硫磷等五种高毒农药的生产、流通和使用 2011年3月，河南毒韭菜事件有机磷中毒(超标农药残留主要是甲拌磷) 农药农药农药农药(pesticides)(pesticides) 是指用于预防、消灭或者控制是指用于预防、消灭或者控制危害农业、林业的病、虫、草及其他有害生物，以及有目危害农业、林业的病、虫、草及其他有害生物，以及有目的地调节植物、昆虫生长的的化学合成或者来源于生物、的地调节植物、昆虫生长的的化学合成或者来源于生物、其他天然物质的一种物质或者几种物质的混合物及其制剂。

其他天然物质的一种物质或者几种物质的混合物及其制剂 现在农药不仅应用于农业，而且也广泛应用于畜牧业、林业和公现在农药不仅应用于农业，而且也广泛应用于畜牧业、林业和公共卫生事业等方面共卫生事业等方面 二、农药概述二、农药概述 农药残留农药残留是指农药使用后残存于生物体、食品是指农药使用后残存于生物体、食品( (农副产农副产品品) )和环境中的微量农药原体、有毒代谢物、降解物和和环境中的微量农药原体、有毒代谢物、降解物和杂质的总称杂质的总称 土壤 水体 空气农药植物 动物 人农药残留几乎无处不在！农药的分类和毒性农药的分类和毒性 1.按化学成分按化学成分可分为有机氯、有机磷、氨基甲酸酯类、可分为有机氯、有机磷、氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯类及砷、汞、铜、硫磺等制剂拟除虫菊酯类及砷、汞、铜、硫磺等制剂 2.按用途按用途可分为杀虫剂、杀菌剂、除草剂、植物生长调可分为杀虫剂、杀菌剂、除草剂、植物生长调节剂和粮食熏蒸剂等节剂和粮食熏蒸剂等 3.农药除了可造成人体的农药除了可造成人体的急性中毒急性中毒外，绝大多数对人体外，绝大多数对人体产生的产生的慢性危害慢性危害，多是通过污染食品的形式造成多是通过污染食品的形式造成。

某些农药对人和动物的某些农药对人和动物的遗传和生殖遗传和生殖造成影响，产生畸造成影响，产生畸形和引形和引 起癌症等方面的毒素作用起癌症等方面的毒素作用1、有机氯农药、有机氯农药品种：品种： DDT、六六六、艾氏剂、狄氏剂等六六六、艾氏剂、狄氏剂等特点：特点：化学性质稳定，不易分解，化学性质稳定，不易分解，易溶于脂易溶于脂肪中，并在脂肪中蓄积，肪中，并在脂肪中蓄积，长期使用会严重的长期使用会严重的环境污染环境污染危害：容易积累在人体的脂肪、肝脏、肾脏危害：容易积累在人体的脂肪、肝脏、肾脏等部位，并且不容易排除体外等部位，并且不容易排除体外DDT：当人：当人体蓄积的浓度体蓄积的浓度20mg/kg时，神经系统放生障时，神经系统放生障碍，达到碍，达到500mg/Kg时，可以致死动物实验时，可以致死动物实验证实有致畸、致癌作用证实有致畸、致癌作用 目前许多国家都已禁止使用，我国已于目前许多国家都已禁止使用，我国已于1983年全部禁止生产和使用年全部禁止生产和使用早期的早期的高效高毒高效高毒品种：对硫磷（品种：对硫磷（1605）、甲拌磷（）、甲拌磷（3911）、）、内吸磷（内吸磷（1059）后期使用得较多的为后期使用得较多的为高效低毒低残留高效低毒低残留的品种，如：乐果、的品种，如：乐果、敌百虫、杀螟松、倍硫磷敌百虫、杀螟松、倍硫磷毒性极低毒性极低的马拉硫磷、双硫磷、氯硫磷、锌硫磷、碘硫磷、的马拉硫磷、双硫磷、氯硫磷、锌硫磷、碘硫磷、地亚农、灭蜈松地亚农、灭蜈松2 2、有机磷农药有机磷农药急性毒性急性毒性：有机磷农药化学性质不稳定，分解快，在作物：有机磷农药化学性质不稳定，分解快，在作物中残留时间短，中残留时间短，大多不溶于水、碱性条件下易水解而失效大多不溶于水、碱性条件下易水解而失效 。

危害：危害：有机磷类农药的中毒特征是有机磷类农药的中毒特征是抑制抑制血液和组织中血液和组织中胆碱胆碱酯酶酯酶的活性，导致的活性，导致神经系统机能失调神经系统机能失调, 从而使一些受神经从而使一些受神经系统支配的脏器系统支配的脏器, 如心脏、支气管、肠、胃等发生功能异如心脏、支气管、肠、胃等发生功能异常主要表现为主要表现为植物性食物残留植物性食物残留，尤其是含有，尤其是含有芳香物质芳香物质的植物的植物，如：水果、蔬菜，特别是叶菜类如小白菜、大白菜、鸡毛如：水果、蔬菜，特别是叶菜类如小白菜、大白菜、鸡毛菜、甘蓝、芹菜、韭菜、芥菜、花菜、绿花菜、茼蒿、枸菜、甘蓝、芹菜、韭菜、芥菜、花菜、绿花菜、茼蒿、枸杞菜和黄瓜等杞菜和黄瓜等 有机磷农药危害有机磷农药危害 3、氨基甲酸酯类农药、氨基甲酸酯类农药是目前使用量较大的杀虫剂是是目前使用量较大的杀虫剂是农药急性中毒农药急性中毒的主要原的主要原因，也是时下蔬菜中农药残留的重点检测品种因，也是时下蔬菜中农药残留的重点检测品种品种：品种：西维因、杀灭威、速灭威、叶蝉散等西维因、杀灭威、速灭威、叶蝉散等在作物上的在作物上的残留残留时间为时间为4d，在动物的肌肉和脂肪中的明，在动物的肌肉和脂肪中的明显蓄积时间约为显蓄积时间约为7d特点：特点：分解快、残留期短、低毒、高效、选择性强分解快、残留期短、低毒、高效、选择性强危害：危害：与有机磷农药相同，抑制人体内胆碱酯酶，从而与有机磷农药相同，抑制人体内胆碱酯酶，从而影响人体内神经冲动的传递。

另外，氨基甲酸酯类杀虫影响人体内神经冲动的传递另外，氨基甲酸酯类杀虫剂进入人体内，在胃中酸性条件下可与食物中的亚硝酸剂进入人体内，在胃中酸性条件下可与食物中的亚硝酸盐和硝酸盐反应生成盐和硝酸盐反应生成亚硝基化合物亚硝基化合物，具有，具有致癌性致癌性我国农药在农产品的用量居高不下 导致农产品中的农药残留超标食品安全、影响消费者健康、影响农产品的贸易加强农残检测不合理使用不合理使用传统农残分析技术传统农残分析技术 分析步骤分析步骤 所需设备所需设备1.采集样品采集样品2.称取样品称取样品分析天平分析天平3.捣碎样品捣碎样品高速组织捣碎机高速组织捣碎机4.样品的提取样品的提取分离漏斗等分离漏斗等5.样品的净化样品的净化SPE、SPME等等6.样品的浓缩样品的浓缩氮吹仪、旋转蒸发仪等氮吹仪、旋转蒸发仪等7.样品的定性、定量测定样品的定性、定量测定GC、HPLC、GC-MS等等传统农残分析技术一般过程：传统农残分析技术一般过程： 优点优点 缺点缺点 能够对每能够对每一种农药进行一种农药进行准确的定性和准确的定性和定量定量检验分析周长长检验分析周长长检验费用高检验费用高需要消耗大量的有机溶剂、容易造成环境污染需要消耗大量的有机溶剂、容易造成环境污染需要使用需要使用GC、HPLC等昂贵的大型仪器设备等昂贵的大型仪器设备对检验分析人员的化学分析水平有较高要求对检验分析人员的化学分析水平有较高要求检验分析过程繁琐、影响因子复杂、不易掌控检验分析过程繁琐、影响因子复杂、不易掌控传统农残分析技术的优缺点：传统农残分析技术的优缺点：生化检测生化检测生物检测生物检测化学比色法化学比色法 酶抑制法酶抑制法免疫分析法免疫分析法发光菌检测法发光菌检测法敏感家蝇检测法敏感家蝇检测法速测盒速测盒速测仪及速测卡速测仪及速测卡主要为酶免疫法主要为酶免疫法三、农药残留快速检测三、农药残留快速检测1、酶抑制法、酶抑制法 酶抑制技术酶抑制技术是研究比较成熟、应用最广泛快速的农是研究比较成熟、应用最广泛快速的农药残留检测技术，是根据药残留检测技术，是根据有机磷有机磷和和氨基甲酸酯类氨基甲酸酯类农药对农药对乙酰胆碱酯酶乙酰胆碱酯酶（AChE)的特异性生化反应建立起来的农的特异性生化反应建立起来的农药残留的微量和痕量快速检测技术。

药残留的微量和痕量快速检测技术原理：原理：（1）速测盒法）速测盒法（2）速测仪）速测仪1、便携式：、便携式：原理与速测盒法相同，采用卡片显色进行直观判定2、分光光度式：、分光光度式：原理是在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关酶催化乙酰胆碱水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物质用分光光度计在412nm处测定吸光度随时间的变化，计算出抑制率，通过抑制率可以判断出样品中是否含有有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在3、手持式：、手持式：原理与分光光度式相同，测定吸光度免疫分析技术免疫分析技术是将免疫反应与现代测试手段相结合而建是将免疫反应与现代测试手段相结合而建立的超微量分析技术，是基于立的超微量分析技术，是基于抗原抗体特异性结合和反抗原抗体特异性结合和反应应为基础的分析方法为基础的分析方法目前应用于农残检测的是目前应用于农残检测的是酶免疫分析酶免疫分析(EIA)和和放射性免放射性免疫分析疫分析(RIA)其中酶联免疫分析酶联免疫分析技术应用最为普遍技术应用最为普遍2、免疫分析技术、免疫分析技术 目前应用最广泛的免疫分析方法之一，目前应用最广泛的免疫分析方法之一，它将酶标记在抗体或抗原分子上形成它将酶标记在抗体或抗原分子上形成酶标抗酶标抗体或抗原体或抗原，酶作用于能呈现出颜色的底物后，酶作用于能呈现出颜色的底物后，通过仪器或肉眼进行辨别。

通过仪器或肉眼进行辨别 基本原理基本原理是预先结合在固相载体上的抗体是预先结合在固相载体上的抗体或抗原分子与样品中的抗原或抗体分子在一定或抗原分子与样品中的抗原或抗体分子在一定条件下进行免疫学反应条件下进行免疫学反应 该法因不需昂贵仪器设备，该法因不需昂贵仪器设备，对人体无害对人体无害等等优点而被广泛采用，具有灵敏、特异、快速、优点而被广泛采用，具有灵敏、特异、快速、稳定以及易于自动化操作等特点稳定以及易于自动化操作等特点 常用的常用的固相载体固相载体是是96孔聚苯乙烯酶标板，孔聚苯乙烯酶标板，常用的常用的酶酶是辣根过氧化物酶，常用的是辣根过氧化物酶，常用的底物底物是邻是邻苯二胺和四甲基联。