紫外分光光度计使用时应注意的问题.docx

紫外分光光度计使用时应注意的问题4.2 测试准备4.2.1 打开电源开关前，检查一下样品室内除比色皿架外，不应有其它东西遗留4.2.2 打开电源开关，预热十五分钟左右4.2.3仪器自动进入初始化，约等待10分钟初始化后，显示器指示220nm，绘图仪打印出 “U V-VIS SPECTROPHOTOMETER MODEL 756MC”4.3 测试过程4.3.1先按“GoTo入”键，再输入相应波长，按“ENTER”键，波长设置完毕， 此时显示器指示所输入波长数4.3.2 先把各被测试样依次倒入比色皿中，其中一只存放参比试样试样高度一 般为比色皿高度的 2/3-3/4，然后依次（一般参比放在靠身第一只）平稳的放入 样品室内的比色架中，并随手将样品室盖上4.3.3按“ABSO/100T%”键，吸光度调零4.3.4拉动试样选择杆，依次测定各个试样，并按“START/STOP”键打印出结果4.4测试结束4.4.1 取出比色皿，擦净样品室，放入干燥剂，并关闭样品室盖 4.4.2关闭仪器电源，盖上仪器防尘罩 4.5 附注4.5.1 比色皿使用完毕，请立即用蒸馏水或有机溶液冲洗干净，并用柔软清洁的 纱布将水渍擦1、使用范围 凡具有芳香环或共轭双键结构的有机化合物，根据在特定吸收波长处所测得的吸 收度，可用于药品的鉴别、纯度检查及含量测定。

朗伯-比耳定律 A =ECL2、注意事项① 空白溶液与供试品溶液必须澄清，不得有浑浊如有浑浊，应预先过滤，并弃去初滤液② 测定时，除另有规定外，应以配制供试品溶液的同瓶溶剂为空白对照，采用1cm 的石英吸收池③ 在规定的吸收峰波长土2nm以内测试几个点的吸收度，以核对供试品的吸收峰 波长位置是否正确，除另有规定外，吸收峰波长应在该品种项下规定的波长± 2nm 以内；否则应考虑该试样的真伪、纯度以及仪器波长的准确度，并以吸收度 最大的波长作为测定波长④ 一般供试品溶液的吸收度读数，以在0.3〜0.7之间的误差较小⑤ 吸收池应选择配对，否则要引入测定误差在规定波长下两个吸收池的透光率 相差小于 0.5%的吸收池作配对，在必要的情况时，须在最终测量扣除吸收池间 的误差修正值6 若大幅度改变测试波长，需稍等片刻，等灯热平衡后，重新校正“0”和“100%” 点然后再测量高效液相色谱仪操作步骤：1） ． 过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜2） ．对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟3） ．打开 HPLC 工作站（包括计算机软件和色谱仪），连接好流动相管道，连接 检测系统4） .进入HPLC控制界面主菜单，点击manual,进入手动菜单。

5） ． 有一段时间没用，或者换了新的流动相，需要先冲洗泵和进样阀冲洗泵， 直接在泵的出水口，用针头抽取冲洗进样阀，需要在manual菜单下，先点击 purge,再点击start，冲洗时速度不要超过10 ml/min6） .调节流量，初次使用新的流动相，可以先试一下压力，流速越大，压力越大， 一般不要超过2000点击injure，选用合适的流速，点击on，走基线，观察基线 的情况7） .设计走样方法点击file，选取select users and methods，可以选取现有的各 种走样方法若需建立一个新的方法，点击new method选取需要的配件，包 括进样阀，泵，检测器等，根据需要而不同选完后，点击protocol一个完整 的走样方法需要包括：a.进样前的稳流，一般2-5分钟；b.基线归零；c.进样阀的 loading-inject转换；d.走样时间，随不同的样品而不同8） .进样和进样后操作选定走样方法，点击start进样，所有的样品均需过滤 方法走完后，点击postrun，可记录数据和做标记等全部样品走完后，再用上 面的方法走一段基线，洗掉剩余物9）． 关机时，先关计算机，再关液相色谱。

10）． 填写登记本，由负责人签字 高效液相色谱仪使用注意事项：1、泵正常工作时，在流动相和流速不变的前提下柱压应该是稳定的，当然在换 流动相时压力变化是正常的，正常情况下如果柱压升高基本上都是由色谱柱使用 时间长引起的（只有更换色谱柱），如果正常情况下压力突然降低有可能是（1） 接头处有漏液的地方，采取的方法是有滤纸检查，如有漏液的地方用扳手拧紧即 可如果没有漏液则可能是（2）白色的管子里面有气泡从而导致流动相进不到 泵里面去，采取的方法是排气泡排气时：先STOP停泵一打开排气阀一按PURGE（快冲）键一等气泡排完后先STOP停泵一拧紧排气阀，其先后步骤不要搞反了2、 泵正常工作时最高压力最好不要超过200KG，所以打开泵以后可以将泵的最 大压力调到200KG，这样如果压力超过上限则会自动报警停机，流速最好不用 超过1ML/MIN,如果使用时压力超过200KG，建议将流速调低点以降低压力（在 色谱柱正常的情况下），如果是因为色谱柱长时间使用造成压力升高则建议更换 色谱柱（因为色谱属于耗材长时间使用就需要更换，更换的主要依据色谱柱出峰 不正常或者柱压力过高）3、 泵正常工作时平均每 15 天左右向注油孔加润滑油 2~3 滴。

4、 流动相里面如果有盐或酸类，做完实验后要先用 95%二次蒸馏水与 5%甲醇 洗色谱柱40分钟左右，然后用纯甲醇洗30分钟左右才可以关机第二天如果继 续做实验流动相里面仍旧有盐或酸类，最好先用 95%二次蒸馏水与 5%甲醇过度20 分钟，再用流动相如果流动相里面只有甲醇，水，乙腈做完实验后就不 用 95%二次蒸馏水5%甲醇冲洗，可直接用纯甲醇洗30分钟即可关机 5、 C18 色谱柱的耐酸PH值范围3—8使用时不要超出6、 仪器长期不用时一定要将滤头泡在甲醇里半月开机一次，如果开机时泵抽不 上液可以打开排气阀按PURGE快冲7、 调反压器时要注意等液体流出来以后才能调一般调8—10KG，比如现在泵显 示屏显示柱压 50KG 那再增加 10KG 显示屏上显示柱压 60KG 然后拧紧锁紧螺 母8、色谱仪关机顺序：清洗液路时可以把检测器直接关机，清洗结束后先按STOP 让泵停止后在关电源不允许直接关机ZRS-8G 智能药物溶出仪使用操作规程1、 开机前准备工作：1.1 先在水槽中加入适量纯化水至水线标志1.2 插上电源插头2、 开机： 打开机座右侧的“电源开关”，开关内指示灯亮，机头前面板上的三个显示窗均 亮：转速显示“000”；温度显示实际水温值；“计时状态指示灯亮”，时间显示为 “00：00”。

2.1 按一次温控启/停键，其上方的温控状态指示灯亮，水泵启动，数秒钟后水浴 箱中的水开始循环流动（若未循环，设法排除泵内空气或其他障碍）：二分钟后 加热器启动，水温开始上升按一次温控启/停键，温控状态指示灯灭，加热器 关断，水温停止上升，二分钟后，水泵关断，水浴停止循环2.2 按一次转速显示窗下的转速启/停键，其上方的运行状态指示灯亮，转杆开始 转动，显示窗显示转速值；同时，时间显示窗中间的两个秒信号指示灯开始闪动， 时间显示开始计时再按一次温控启/停键，运行状态指示灯灭，转杆停止，转 速显示 000；秒信号指示灯停止闪动，正计时也停止2.3 关闭电源开关，所有显示窗及指示灯均无显示2.4 若以上操作及相应运行状态无误，则仪器安装合格，可以投入使用了 3、 使用方法 3.1 安装调整转杆：3.1.1 按照药典规定安装实验转杆（蓝杆、桨杆、小桨杆）注意离合器不要旋紧3.1.2取测量钩将钩的定高环（25mm或15mm直径）逐次防入各个杯内至杯 底中心3.1.3、垂直向下压转杆顶端，使网篮底部或浆叶底部接触测量钩的定高环的顶部， 顺时针旋紧离合器上部轮母，使离合器能夹住转杆然后向上提起转杆，离合器 随同转杆被提起，此时再用一只手握住离合器下部，另一只手顺时旋紧离合器上 部轮母。

3.1.4、垂直向下压转杆顶端，转杆连同离合器一同下移，直至离合器下部压住 同齿轮为止此时，网篮底面或浆叶底部距溶出杯底为药典规定高度（25+2mm, 小杯法为 15+1mm）3.2注入溶剂：仰起机头，向溶出杯内注入所需溶剂，盖好保温盖水浴箱内循 环水液面高度应略高于溶出杯内溶剂的液面） 3.3 水浴恒温控制： 接通电源，打开仪器电源开关片刻后，温度显示窗即显示出水浴的实测温度值3.3.1按一次△或▽键，温度显示窗将显示4秒钟的上次预置温度值，而后重显 实测水温值3.3.2、使用△或▽键可设定恒温水浴的预置温度：按一次△或▽键，是显示出 上次的预置温度，接着每按一次△键将增加0.1°C, —直按住该键可快速增加； 同样，用▽键可使预置温度减少设定完毕4秒钟后，显示窗又重显当前的实际 水温3.3.3 每次设定的预置温度将自动存储与机内，以后开机仍然有效 3.4、启动/ 停止恒温控制3.4.1、 按一次启/停键，“温控状态指示灯”亮，水浴开始循环；二分钟后，水温 开始上升，直至达到预置温度，并保持恒定3.4.2、 再按一次启/停键，“温控状态指示灯”灭，随即停止加热；二分钟后，水 浴停止循环。

3.4.3、 在温控状态，也可随时检查或重新设定预置温度 3.5 、转杆转速控制3.5.1、 按键用法及显示窗、状态指示灯的显示方式与3.3“水浴恒温控制”相同， 区别只是针对转速控制而言3.5.2、 另需注意：启/停键同时也控制时间控制部分计时状态/周期状态的启/停； 而在定时状态，转杆运行状态启/停是判断定时关机/定时开机的依据3.6、 时间控制 时间状态定义及转换：本仪器的计时器可分别工作在三种独立的工作状态3.6.1、计时状态：实验运行时间累计，正计时显示方式方便操作者观察实验进 度计时状态操作起始状态：时间窗显示“00： 00”运行：当转杆启动运行，“秒信号指示灯”开始闪亮，时间显示从零开始正计时； 当转杆停止运行，“秒信号指示灯”恒亮不闪，计时停止；当转杆再运行时，计 时显示继续累加最长计时时间为 99小时 59 分钟复位：同时按下△和〈确认〉键，可使计时显示返回起始状态（00： 00）无论 转杆是否运行，皆可进行复位操作3.6.2、 周期状态：可预置最多九个不同取样周期时间，实验过程中依次提“供取 样提示信号”，倒计时显示方式3.6.3、 定时状态：可定时自动开机预热水浴并达到恒温，也可定时自动关机终止 实验，以节省等待时间，倒计时显示方式。

3.6.4、 时间状态转换：按住选择键，时间状态按“计时-定时-周期-计时„„”顺序 循环转换，在对应某指示灯亮起时，释放该键，即选中某时间状态4、溶出试验4.1 当溶出杯内溶剂温度稳定于规定值时，方可开始溶出试验 4.2 选择计时状 或周期状态或按复位键使之回复起始状态4.3 将供试品投入溶剂中，盖好杯盖对于蓝法，须仰起机头，将供试品放入网 蓝并安装好，再放下机头，盖好杯盖4.4 立即按转速启/停键，启动转杆运行5、 取样 取样时间到，用注射哭配相应的弯针头、针垫，从杯盖上取样孔插入杯 内抽取样品弯针头、针垫的设计使得针头端部处于药典规定的取样点位置 图所示为桨法配套的针头、针垫用法：（ 1）为 900ml 用薄垫短弯针头；（ 2）为 1000ml 用厚垫短弯针头；（ 3）为 500ml 用薄垫长弯针头；（ 4）为 600ml 用厚垫 长弯针头对于蓝法，用法基本相同，只须在针垫上再垫加一个“蓝法取样柱”，如图所示6、 结束试验6.1 关停转杆和温控状态，并关断整机电源开关6.2 拧松离合哭，仰起机头，取下转杆，清洗、干燥，放入附件。