课件ThinPrep非妇科细胞学演讲系列.ppt

TitleThinPrep® 非妇科细胞学演讲系列非妇科标本制片P/N 86223-002 B 版ThinPrep® 技术的优势ThinPrep® 非妇科细胞学技术应用于非妇科标本有助于: •使细胞的保存得到优化•使标本制片标准化•简化玻片读片流程•可提供多样性检测，能够进行辅助实验材料所需材料清单•ThinPrep® 2000 处理器 •ThinPrep® 显微玻片•非妇科 过滤器（蓝色）•Multi-Mix™ 振荡仪•CytoLyt® 和 PreservCyt® 溶液 所需材料清单•50 ml 容量的离心机  •50 ml 离心管•玻片染色系统和试剂 •1 ml 塑料移液器（分级）•标准实验室固定液•盖玻片和固定装置•用于故障排除的冰乙酸、DTT 和盐水 溶液推荐使用的采集介质•CytoLyt®•Plasma-Lyte®•Polysol®•电解质平衡液不推荐使用的采集介质• Mucollexx®•乙醇•含有聚乙二醇•的液体 Saccomanno 液不推荐使用的采集介质•普通盐水普通盐水•培养介质培养介质• RPMI• PBS•含有甲含有甲醛的溶液液  • CytoLyt 溶液溶液 • PreservCyt 溶液溶液Hologic 溶液 •甲醇缓冲型保存液甲醇缓冲型保存液–溶解红细胞溶解红细胞–保护蛋白质沉淀保护蛋白质沉淀–溶解粘液溶解粘液–使普通细胞学标本的形态在室温下使普通细胞学标本的形态在室温下保存保存 8 8 天天天天  Hologic 溶液CytoLyt 溶液•用作转移介质用作转移介质 •在处理之前，可在标本制片过程在处理之前，可在标本制片过程中使用中使用Hologic 溶液CytoLyt 溶液•在使用在使用 ThinPrep 2000 处理器进行转移和制片和制片时，，甲醇缓冲型溶液用于对细胞提供支持。

提供支持•在在处理之前，必须在 PreservCyt 溶溶液中完成液中完成标本的转移和存放工作作 Hologic 溶液PreservCyt 溶液• PreservCyt 溶液不得由任何其它溶液不得由任何其它试剂所代替试剂所代替 • PreservCyt 溶液中的溶液中的细胞在 4°-37°C 的温度范的温度范围内大约可保存 3 周周 Hologic 溶液PreservCyt 溶液标本采集与制片采集细针抽吸将整个标本放入 盛有 30 ml CytoLyt 溶液的离心管中漂洗；或将其放入电解质平衡液（如 Polysol 或 Plasma-Lyte）内采集粘液标本• 直接将采集物放入 30 ml CytoLyt 溶液内•如如果刚刚完成采集，则应尽快加入 30 ml CytoLyt 溶液采集粘液标本•痰液： 将采集物直接放入 CytoLyt 溶液内•漂洗/灌洗： 采用电解质平衡液 (BES) 进行采集•刷洗： 将标本采集刷直接放入预先盛有 CytoLyt 溶液的试管内采集液体标本•在加入在加入 CytoLyt 溶液之前，通溶液之前，通过离心的方式的方式对刚采集到的标本进行浓缩– 如果不可行，则将采集到的标本直如果不可行，则将采集到的标本直接放入接放入 CytoLyt 溶液内溶液内• CytoLyt 与标本的比率最低应为与标本的比率最低应为 1:3 采集表层标本•表表层刷洗物和刮取物会被直接采集至 PreservCyt 溶液内溶液内1.离心浓缩2.滤出上清液并重制细胞团悬液3.对细胞团进行评估  4.将标本加入盛有 PreservCyt 溶液的标本瓶内  5.静置 15 分钟 6.使用“序列 2”，并在 ThinPrep 处理器上进行处理 7.固定、染色并评估制片细针抽吸1.机械振荡  2.离心浓缩3.滤出上清液并重制细胞团悬液4.对细胞团进行评估  5.将标本加入盛有 PreservCyt 溶液的标本瓶内   6.静置 15 分钟 7.使用“序列 3”，并在 ThinPrep 处理器上进行处理8.固定、染色并评估制片粘液标本1.离心浓缩2.CytoLyt 溶液漂洗   3.滤出上清液并重制细胞团悬液4.对细胞团进行评估5.将标本加入盛有 PreservCyt 溶液的标本瓶内 6.静置 15 分钟 7.使用“序列 2”，并在 ThinPrep 处理器上进行处理 8.固定、染色并评估       制片液体标本标本制片技术离心 600g x 10分钟•要将细胞物质同上清液分隔开来，应对细胞物质进行离心处理•请参阅《ThinPrep® 2000 Owners Manual》“离心转速”章节中的“非妇科”部分，并确定要取得 600g 离心力所需达到的正确转速机械振荡粘液标本•方法 A–在“自动”振荡仪上，振荡 CytoLyt® 溶液 5 分钟•方法 B–混合 CytoLyt/标本混合液几秒钟滤出上清液•本步骤的目的是要对标本进行浓缩•以一个连贯的动作将离心管翻转 180°，滤出所有的上清液，然后将离心管恢复至原来的位置振荡并重制细胞团悬液•本步骤的目的是使细胞团随机分布，并提升 CytoLyt® 溶液漂洗步骤的效果•将离心管放入振荡器内，并搅动细胞团 3 秒钟；或使用塑料移液器，前后甩动细胞团，以手动进行振荡CytoLyt 溶液漂洗•本步骤的目的是使细胞形态能够得以保存，同时溶解红细胞、溶解粘液，并减少蛋白质沉淀•向细胞团中加入 30 ml CytoLyt 溶液、离心浓缩、滤出上清液，然后进行振荡并重制细胞团悬液对细胞团进行评估•如果细胞团呈白色、淡粉色、棕如果细胞团呈白色、淡粉色、棕褐色或无色，请褐色或无色，请–将标本加入盛有将标本加入盛有 PreservCyt 溶液溶液的标本瓶中的标本瓶中对细胞团进行评估对细胞团进行评估•如果细胞团明显呈红色或棕色，如果细胞团明显呈红色或棕色，则表明有血液存在则表明有血液存在 –CytoLyt 溶液漂洗溶液漂洗1.加入加入 30ml CytoLyt 溶液溶液2.离心浓缩离心浓缩 3.滤出上清液滤出上清液4.振荡并重制细胞团悬液振荡并重制细胞团悬液对细胞团进行评估对细胞团进行评估•要检测液体的形式，可抽取少量要检测液体的形式，可抽取少量的标本至移液器内，然后重新将的标本至移液器内，然后重新将其滴入离心管中其滴入离心管中 –如果液滴呈串状或胶状，则必须对如果液滴呈串状或胶状，则必须对粘液作进一步的溶解粘液作进一步的溶解对细胞团进行评估CytoLyt 溶液漂洗溶液漂洗1.加入 30ml CytoLyt 溶液 2.机械振荡3.离心浓缩 4.滤出上清液5.振荡并重制细胞团悬液将标本加入盛有 PreservCyt 溶液的标本瓶瓶内•如果细胞团清晰可见，并且细如果细胞团清晰可见，并且细胞团容量胞团容量 < 1ml，则，则 –对细胞团进行振荡，并向新制的制的 PreservCyt 溶液溶液标本瓶中滴入两滴液体中滴入两滴液体将标本加入盛有 PreservCyt 溶液的标本瓶瓶内•如果如果细胞团容量 > 1ml，，则 –向离心管内加入向离心管内加入 1ml CytoLyt 溶液，并快速振荡，重制细胞溶液，并快速振荡，重制细胞团悬液团悬液–向新制的向新制的 PreservCyt 溶液标本溶液标本瓶中滴入一滴液体瓶中滴入一滴液体将标本加入盛有 PreservCyt 溶液的标本瓶瓶内•如果如果细胞团无色或较少，，则–将新制将新制 PreservCyt 溶液溶液标本瓶中的液体加入至离心管内，并的液体加入至离心管内，并快速振快速振荡以使溶液混合合–将所有将所有标本倒回标本瓶内瓶内故障排除故障排除粘液标本粘液标本“标本过于稀释”消息消息否否是是检查细胞量是否足够。

   否则，如果有细胞团可供使用的话，应使用更多的细胞团  粘液粘液标本本玻片上是否有细胞玻片上是否有细胞物质的物质的“晕轮晕轮”以以及及/或白细胞？或白细胞？否否是是稀稀释、、然后加入至盛有盛有 PreservCyt 溶溶液的液的标本瓶中 如如果新玻片上出现晕果新玻片上出现晕轮，请联系轮，请联系 Hologic 技技术服务部粘液标本粘液标本玻片中的细胞是玻片中的细胞是否稀少，以及是否稀少，以及是否含有粘液？否含有粘液？否否联系 Hologic 技术服务部是是进行离心处理，，滤出上清液并振荡液并振荡 使用使用 CytoLyt 溶液溶液进行漂洗 如果玻片中的如果玻片中的细胞最终仍很稀少，很稀少，请联系 Hologic 技术服务部血液或血液或 蛋白质标本蛋白质标本“标本过于稀释”消息消息否否是是检查细胞量是否足够  否则，如果有细胞团可供使用的话，应使用更多的细胞团 血液或血液或 蛋白质标本蛋白质标本玻片上是否有玻片上是否有细胞物物质的“晕轮”以以及及/或白或白细胞？？否否是是稀释、然后加入至盛有 PreservCyt 溶液的标本瓶中  如果新玻片上出现晕轮，请联系 Hologic 技术服务部。

血液或血液或 蛋白质标本蛋白质标本玻片中的玻片中的细胞是否稀少，以及是否含有血少，以及是否含有血液、蛋白液、蛋白质或非细胞碎片？碎片？是是进行离心处理，滤出上清液并振荡  如果玻片中的细胞最终仍很稀少，请联系 Hologic 技术服务部否否联系联系 Hologic 技术服务部技术服务部常见的干扰物质常见的干扰物质胞核细节模糊胞核细节模糊• 可能是将可能是将 PBS、盐水或、盐水或 RPMI 作为采集液作为采集液使用所致使用所致–将刚采集到的标本放入 CytoLyt® 溶液内， 或放入电解质平衡液内常见的干扰物质常见的干扰物质晕轮晕轮• 在密集的标本中，只可能将外边缘的细在密集的标本中，只可能将外边缘的细胞物质转移至玻片胞物质转移至玻片-如果玻片评估不满意， 则可参照第一张玻片，并采用相同的制片故障排除步骤来制备第二张玻片常见的干扰物质常见的干扰物质染色染色 干干扰物质• 标本中心呈现由红色至橙色的染色，并标本中心呈现由红色至橙色的染色，并且主要在细胞团内；这与干涸的物质较为且主要在细胞团内；这与干涸的物质较为相似相似–使用干净的乙醉进行漂洗，或在完成胞浆染色之后，     再次进行漂洗有关更多信息…•请参阅“ThinPrep® 2000 Operator’s Manual”有关更多信息…•请访问我们的网站  或者–产品目录–联系信息–完整的妇科及 非妇科文献资料–细胞学案例演示。