Ⅸ型泽蛙Rana limnocharis透明骨骼标本制作毕业论文.doc

本科毕业论文（设计）( 2013届 ) 题 目： Ⅸ型泽蛙（Rana limnocharis）透明骨骼标本制作 学 院： 生命与环境科学学院 专 业： 生物技术 学生姓名： 学号： 20909051039 指导教师： 职称（学位）： 讲师（学士） 合作导师： 职称（学位）： 完成时间： 2013 年 5 月 25 日 成 绩： 综合成绩： 等级： 黄山学院教务处制学位论文原创性声明兹呈交的学位论文，是本人在指导老师指导下独立完成的研究成果。

本人在论文写作中参考的其他个人或集体的研究成果，均在文中以明确方式标明本人依法享有和承担由此论文而产生的权利和责任声明人（签名）：年 月 日目 录摘要……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………Ⅳ英文摘要………………………………………………………………………………………………………………………………………………………Ⅳ1引言………………………………………………………………………11.1泽蛙的基本特征…………………………………………………11.2泽蛙的生物学资料…………………………………………………21.3ZEWA文献回顾…………………………………………………………31.4本文研究意义………………………………………………………32材料和方法………………………………………………………………42.1材料…………………………………………………………………42.1.1材料的选择…………………………………………………42.1.2仪器与器材…………………………………………………42.1.3药品的配制…………………………………………………42.2方法…………………………………………………………………42.2.1制作的步骤…………………………………………………42.2.2观察与摄像…………………………………………………53结果………………………………………………………………………53.1透明骨骼标本………………………………………………………53.2透明骨骼的测量……………………………………………………84讨论………………………………………………………………………94.1实验总结……………………………………………………………94.2透明骨骼的优点……………………………………………………10参考文献…………………………………………………………………………………………………………………………………………………10致谢………………………………………………………………………………………………………………………………………………………11Ⅸ型泽蛙（Rana limnocharis）透明骨骼标本制作 摘要：脊椎动物骨骼标本在教学和科研上都有很大的直观性价值，其制作基本分可为五大步骤：动物的处死；肌肉的剔除；骨骼脱脂；骨骼的漂白；骨骼的整形与装架。

而小型脊椎动物(如蛙类和蛇类)骨骼纤细软弱，并且骨骼关节各个部位没有完全骨化，很难将它们处理制成完整的骨骼标本本文通过改进的透明骨骼染色法，解决了这些难点关键词：Ⅸ型泽蛙；透明标本；形态学；骨骼；生物学The production of transparent skeletal specimen of Ⅸ type Rana LimnocharisDao-zhong QIN（20909051039）Supervisor: Tian HUANG (Lecturer)(College of Life and Environment sciences， Huangshan University， Huangshan， 245041 China)Abstract: The vertebrate skeleton specimen has a great intuitive value in teaching and researching. The production processes of vertebrate skeleton specimen are generally divided into five steps: animal executing; muscle removing; fat degreasing; bone bleaching; bone plastic. The bones of individual small animals， such as the frogs and snakes， weak and thin， and all parts of the bone and joint are not ossified. It's hard for us to make their skeletal specimen integrity. But now， by the improved transparency bone staining， we can solve all these difficulties. Key Words: Ⅸ type Rana Limnocharis; transparent specimens; morphology; bone; biological 第 10 页 共 11 页1 引言1.1 泽蛙的基本特征据刘明玉等(2000)介绍，泽蛙(Rana limnocharis)如图1-1所示，头宽小于头长；吻端呈尖状；眼间距小于鼻间距；鼻孔位于吻眼之间而且接近吻端；眼睛大；犁骨齿的两小团呈现“V”形，舌后缺存在刻深。

蛙趾前端钝尖，半蹼或者2/3蹼；胫跗关节前可达眼皮肤较为粗糙，没有背侧褶；体背有着多行长短不均匀的纵肤褶生活时背面为灰棕色、土灰色或者灰绿色，两眼间呈现“V”形斑状，四肢略有深色的横纹，腹面有浅白色或者乳黄色体长一般为40-50mm，雄蛙存在单咽下外声囊图1-1 泽蛙外形图1.2 泽蛙的生物学资料泽蛙民间俗称“梆声蛙”、“泥疙瘩”、“乌蟆”、“虾蟆仔”、“田鸡仔”等泽蛙的分类地位：动物界 Fauna 两栖纲 Amphibia脊索动物门 Chordata 脊椎动物亚门 Vertebrata 无尾目 Anura蛙科 Ranidae蛙属 Rana 泽蛙 R.limnocharis生态习性: 泽蛙的活动期根据我国不同地域而差异较大，长江流域地区一般在3-4月出蛰；广西在2月上旬左右，海南岛则终年可见其田间活动夜间活动较为频繁，白天和夜晚都可见其觅食，但觅食高潮为凌晨和黄昏时分主要通过吞食各种昆虫及其幼虫在高纬度地区，泽蛙在秋季开始冬眠，4月出蜇后开始产卵，繁殖季节延续较长，一年可多次产卵，卵一般会沉入水底其卵和蝌蚪在稻田内、静水塘或泥坑中生活，适应能力强，发育速度快，食物以浮游生物、藻类、水草及动物尸体与腐殖质为主要供给。

王晓黎等，2007）地理分布: 泽蛙广泛分布在日本与东南亚地区，如图1-2所示在国内主要分布于秦岭以南的平原和丘陵地带海拔2000多米的山区也有出没最为习见，数量颇多国内的主要分布在山东、西藏、湖南、江苏、浙江、安徽、河北、福建、江西、广西、香港、河南、湖北、陕西、广东、海南、云南、澳门、四川、贵州、台湾、甘肃王晶琳等，2006）国外的主要分布为老挝、缅甸、文莱、菲律宾、柬埔寨、孟加拉国、印尼、印度、越南、日本南部岛屿、马来半岛及群岛、尼泊尔、东南亚地区、巴基斯坦、新加坡、斯里兰卡、泰国，不丹也有存在 图1-2 泽蛙在世界的主要分布图（黑色部分为分布区）1.3 文献回顾在动物生理学方面，Ecker A， Haslam G(1889)早期就对泽蛙的相关解剖学做过深入的研究李桑等（2008）通过组织学方法研究了泽蛙原始生殖细胞(性腺分化、PCC劝的迁移、原始性腺的形成)，并探讨了泽蛙性腺分化的差异的原因在条件为不同的培育温度刘忠全（2003）研究了种群系统地理学和中国泽蛙线粒体基因组结构，从线粒体基因组结构与种群系统地理学两个方面对中国泽现存蛙进行了较为细致全面的探究陈凤英等（1994）用骨髓细胞制片法，通过比较日本、菲律宾等地区产蛙与广东、四川、安徽产的泽蛙和福建产的泽蛙的染色体组型，研究结果差异明显，得出泽蛙核型具有一定的多样性。

在泽蛙的食性方面，许红等（1994）曾初步研究并且发表过泽蛙对中华稻蝗捕食功能的反应在药理学方面，念宇等（2009）研究了3种农药对泽蛙蝌蚪的急性毒性和联合急性毒性效应在泽蛙的鸣声方面，姜仕仁等（2006）曾用计算机鸣声分析技术曾对杭州地区泽蛙的鸣声进行过细致的分析在生态环境研究方面，王晓黎（2007）对研究上海郊区分布的泽蛙的越冬生态环境得出：泽蛙的越冬现象是在自然环境下表现出的正常生理现象，温度是主要的控制因素在泽蛙的透明骨骼标本及其骨骼系统研究方面，国内也有相关的研究文献，如陈彬等（2002）介绍关于蛇类透明骨骼的制作的方法；冯萍（1995）详细描述了小型脊椎动物和晚期胚胎的透明骨骼的制作过程；吕建伟等（2001）在透明骨骼标本制作也阐述了鱼类透明骨骼标本制作的具体方法；吴慧芳等（2007）在泽蛙色骨骼系统研究的文章中，研究了国内泽蛙(Rana limnocharis)的骨骼系统，1.4 本文研究意义蛙类作为环境是否恶化的指示者，对环境污染起到的监测作用而泽蛙是蛙类中数量与分布最为广泛的一种是维持整个生态系统健康和稳定不可或缺的生态位同时泽蛙也是国家重点保护动物之一，可是随着城市化的步伐加剧，泽蛙的栖息地日益缩小，种群数量也正在急剧下降。

所以通过制作透明骨骼标本从侧面上为其保护物种的专一性和种群多样性工作提供一定的理论依据王晶琳，2006）本文采用的思路方法为：采用阿利辛蓝(Alcian Blue 8GS)和茜素红(Aliz。