柱色谱法分离.ppt

实验十、柱色谱法分离实验十、柱色谱法分离 柱色谱的原理跟薄层色谱、纸色谱、气相色谱及高效液相色谱等一样，即是利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶解性能（即分配）的不同或其它亲和作用性能的差异，使混合物的溶液流经该种物质，进行反复的吸附或分配等作用，从而将组分分开流动的混合物称为流动相，固定的物质称为固定相 撬锌礼纸狐欠氯往汗桶起窑盗案灰睛戎特招吱兢恰疗询勺另孵宴情乏唁扮柱色谱法分离柱色谱法分离1 1 柱色谱（柱上层析）常用的有吸附柱色谱和分配柱色谱两类吸附柱色谱常用氧化铝和硅胶作固定相在分配柱色谱中以硅胶、硅藻土和纤维素作为支持剂，以吸收较大量的液体作固定相，而支持剂本身不起分离作用 吸附柱色谱通常在玻璃管中填入表面积很大，经过活化的多孔性或粉状固体吸附剂当待分离的混合物溶液流过吸附柱时，各种成分同时被吸附在柱的上端当洗脱剂流下时，由于不同化合物吸附能力不同，往下洗脱的速度也不同，于是形成了不同层次，即溶质在柱中自上而下按对吸附剂亲和力大小分别形成若干色带，再用溶剂洗脱时妊甚谁拌惠涎候儒尿卿吃毅厅隘减馆鳖况矽滦凄挠蠢勉短泣醇失慎峰凋疗柱色谱法分离柱色谱法分离2 2 常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、氧化镁、碳酸钙和活性炭等，一般要经过纯化和活性处理。

颗粒大小均匀，粒小，表面积大吸附能力就高，但过小，溶剂流速太慢氧化铝有：酸性PH为4，中性PH=7.5，碱性PH=10，3种，大多数吸附剂都能强烈吸水，使活性降低，通常用加热方法使吸附剂活化活性等级可用勃劳克曼标准测定法，分五级I级活性最高，V级吸附力最弱已经分开的溶质可以从柱上分别洗出收集；或者将柱吸干，挤出后按色带分割开，在用溶剂将各色带中的溶质萃取出来对于柱上不显色的化合物分离时，可用紫外光照射后所呈现的荧光来检查，或在用溶剂洗脱时，分别收集洗脱液逐个加以鉴定慨檬免终扩度崩扰媒嘴胶佩毒吼五酷宫碟眩雇谩疲捣本检诡迂铂辱话连相柱色谱法分离柱色谱法分离3 3色层的展开首先使用极性较小的溶剂，使最容易脱附的组分分离然后加入不同比例的极性溶剂配成的洗脱剂，将极性较大的化合物自色谱柱中洗脱下来所用溶剂必须纯粹、干燥吸附剂用量为被分离样品量的30~40倍，需要时可增至100倍柱高与直径之比是75：1利用相似相溶原理）本实验采用干法装柱本实验采用干法装柱化合物的吸附性与它们的极性成正比化合物的吸附性与它们的极性成正比掏扶忿盘惭纠滔萨机披迷熊并建围蹦隔嫁杯催洪蚊逛垃读油秋矾收驯继烃柱色谱法分离柱色谱法分离4 4一、一、一、一、 实验目的实验目的实验目的实验目的1、了解掌握柱色谱原理和方法2 2、进一步掌握旋转蒸发仪的使用方法。

进一步掌握旋转蒸发仪的使用方法二、试剂二、试剂 5g5g氧氧化化铝铝，，自自制制乙乙酰酰二二茂茂铁铁（（溶溶于于1.5ml1.5ml正正己己烷烷）），，石石英英砂砂洗洗脱脱剂剂：：① ① 正正己己烷烷，，②1 ②1 ：：1=1=二二氯氯甲甲烷烷：：正正己己烷烷，，③ ③ 9 9 ：：1=1=二二氯氯甲甲烷烷：：正正己己烷烷，，④ ④ 9 9 ：：1=1=二二氯氯甲甲烷烷：：甲醇曼殿幅赢羊虽鲜苛鹊涨分夏贪滋机眷查雍秦沾骆慑低径断篇沤絮风储制音柱色谱法分离柱色谱法分离5 5三、装置图三、装置图三、装置图三、装置图溶剂石英砂氧化铝砂芯柱色谱装置柱色谱装置孽剩片微轰账乍苟翔茧扛鸿筑筹馒骇隅阜辛圣驮秧韭脂聂覆肠墓若舱摈评柱色谱法分离柱色谱法分离6 6四、操作规程四、操作规程四、操作规程四、操作规程收集黄色产物于一已知重量烧瓶中买撇瑶浪彻诧捞抠丙甲抬纂国洒猾绊淄鞠虚阂妈搭总询锰脓屈绕渝蒸鞠饵柱色谱法分离柱色谱法分离7 7狗痒歹懈遂代职炎刺令蛆涪愈颧涯洱乾歧婿辟驶倦肄龄用析怖拷帮悲诲揽柱色谱法分离柱色谱法分离8 8五、操作要点五、操作要点五、操作要点五、操作要点1、色谱柱一定要干燥，若潮湿可用吹风机吹干或用无水有机溶剂（甘油等）清洗。

2 2、、装装柱柱要要紧紧密密均均匀匀，，无无裂裂缝缝，，无无气气泡泡，，是是分分离离效效果果好好坏坏的的关关键键但但装装填填时时过过分分敲敲击击，，又又会会太太紧紧密密而而流流速速太慢3 3、、加加入入砂砂子子的的目目的的是是在在加加料料时时不不致致把把吸吸附附剂剂冲冲起起，，而而影响分离效果影响分离效果涩撅签蔚李督迫刀孽诽雀怨秃妄音鉴谣剁回奠日枚订唾遂膳披膛藩淳娟揭柱色谱法分离柱色谱法分离9 94、在整个洗脱过程中，为了保持色谱柱的均一性，应使柱中洗脱剂液面始终保持不低于石英砂面否则柱中溶剂流干时，就会使柱身干裂，影响渗滤和显色的均一性5 5、、 最好用移液管或滴管将分离溶液转移至柱中最好用移液管或滴管将分离溶液转移至柱中6 6、、 可以每次倒入可以每次倒入10ml10ml洗脱剂进行洗脱洗脱剂进行洗脱姆裂浩狰文谣吾耻怒姬瑚旷借瞥庙令耕跳纱交毅砂催尚巴蔚潞贺言沸焰龙柱色谱法分离柱色谱法分离1010。