某些因素对家兔离体肠肌运动的影响.docx

不同因素对家兔离体肠肌运动的影响【摘要】目的：观察乙酰胆碱、肾上腺素、NaOH、HCl溶液及25°C台氏液对离体家兔肠 肌运动的影响方法：应用微机生物信号采集处理系统进行数据收集，运用统计学方法 进行数据统计结果：乙酰胆碱、25C台氏液、NaOH溶液使家兔离体肠肌张力增强，肾 上腺素和 HCl 溶液则起到抑制作用结论：消化管运动受神经和激素的调节副交感神 经兴奋时，其节后纤维释放乙酰胆碱，与平滑肌膜上M受体结合，产生兴奋效应，使胃 肠运动增强；而交感神经兴奋时则产生抑制作用消化道平滑肌的活动易受温度、 PH 值及其它化学因素、药物因素的影响关键词】家兔、离体肠肌【引言】消化道平滑肌与骨骼肌、心肌一样，具有肌肉组织共有的特性，如兴奋性、传 导性和收缩性等但消化道平滑肌兴奋性较低，收缩缓慢，富有伸展性，具有紧张性、 自动节律性，对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等特点给予离体肠肌以接近于在体 情况的适宜环境，消化道平滑肌仍可保持良好的生理特性胃肠道、膀胱等平滑肌以胆 碱能神经占优势，小剂量或低浓度的乙酰胆碱（ACh）即能激动M受体，产生与兴奋胆 碱能神经节后纤维相似的作用，兴奋胃肠道平滑肌一、材料与方法1.1．实验对象：家兔 1.2．实验仪器：微机生物信号采集处理系统、张力换能器、麦氏浴槽1.3. 实验试剂：0.01%ACh溶液、0.01%肾上腺素、INNaOH溶液、1NHC1溶液、25C 台式液1.4. 实验步骤1.4.1. 实验装置准备和仪器参数设置 RM6240 系统：点击“实验”菜单中的“肠 肌记录”仪器参数：通道时间常数为直流，滤波频率10Hz，灵敏度3g，采样频率200Hz， 扫描速度 1s/div。

1.4.2•家兔离体肠肌标本制备 取家兔一只，击头致昏，立即打开腹腔，剪取10cm 左右一段空回肠，立即置入盛有氧饱和台氏液的培养皿中，剪去肠系膜，清洗肠内容物， 将肠管剪成2〜3cm的小段，两端各穿一线并打结备用注意保持肠道通畅，勿使其封 闭1.4.3. 连接实验装置：在麦氏浴槽中，加入台氏液15ml，置水浴锅中，水浴锅中 维持水温38°C±0.5°C连好加氧泵及通气玻钩并供氧，每秒钟1〜2个气泡取备好的 肠管一段，一端固定于通气钩；另一端连结张力换能器，置37C麦氏浴槽中1.5. 实验观察1.5.1. 灌流液定容待离体肠肌稳定后，记录一段正常张力曲线1.5.2. 加入0.01%ACh溶液2滴，待张力曲线稳定后用台氏液冲洗麦氏浴槽到张力 恢复用药前水平，观察并记录张力曲线1.5.3. 加入0.01%肾上腺素1 滴，待张力曲线稳定后用台氏液冲洗麦氏浴槽到张力 恢复用药前水平，观察并记录张力曲线1.5.4. 加入1N NaOH溶液1滴，待张力曲线稳定后用台氏液冲洗麦氏浴槽到张力恢 复用药前水平，观察并记录张力曲线1.5.5. 加入1N HCl溶液2滴，待张力曲线稳定后用台氏液冲洗麦氏浴槽到张力恢 复用药前水平，观察并记录张力曲线1.5.6. 换用25C台式液，待张力曲线稳定后用台氏液冲洗麦氏浴槽到张力恢复用药 前水平，观察并记录张力曲线1.5.7. 关闭通气孔，观察并记录张力曲线二、实验结果减弱，曲线出现收缩频率变慢，幅度减小，基线下移；在浴槽中加入 1 滴 NaOH 于浴槽 中，则曲线呈上升，即肠管活动增强；在浴槽中加入盐酸溶液2 滴后，离体肠管活动减 弱，曲线出现收缩幅度降低，频率变慢；用25°C台氏液后，出现收缩曲线基线下移，频 率变慢，收缩幅度变小；缺氧使曲线基线下移，频率变慢，收缩幅度变小。

三、实验讨论3.1．实验结果图可以看出正常情况下，我们观察到离体家兔小肠平滑肌在台氏液 中可以自动地、缓慢地收缩，但其节律性很不规则故曲线走势正常小肠平滑肌自律 性产生的离子基础尚未完全清楚，目前认为，它的产生可能与细胞膜上生电性钠泵的活 动具有波动性有关，当钠泵的活动暂时受抑制时，膜便发生去极化；当钠泵活动恢复时， 膜的极化加强，膜电位便又回到原来的水平3.2. 在浴槽中加入乙酰胆碱（ACh） 2滴后，可见离体肠管活动增强，由实验结果 描记曲线出现收缩频率变快，幅度增加出现上述现象的机理，目前认为与消化道平滑 肌细胞产生动作电位的离子基础是Ca2+的内流有关乙酰胆碱可与肌膜上的M受体结 合，使得两类通道开放：一类为电位敏感性Ca2+专用通道，另一类为特异性受体活化Ca2+ 专用通道前一类通道对ACh敏感，小剂量ACh即引起开放；后一类通道对ACh相对不 敏感，只有大剂量ACh才会引起开放这两类通道开放都使得肌浆中Ca2+增高，进而激 活肌纤蛋白一肌凝蛋白一ATP系统，使平滑肌收缩，肌张力增加3.3. 在浴槽中加入肾上腺素 1 滴后，可见离体肠管活动减弱，实验结果描记曲线 出现收缩频率变慢，幅度减小以及基线下移。

出现上述现象的机理，目前认为与肠肌细 胞膜上存在a和0两中受体，a受体又分为a抑制型受体和a兴奋型受体有关肾 上腺素作用于a抑制型受体，引起肠肌膜上一种特异性受体活化，使K+外流增多，细 胞膜发生超极化，肠肌兴奋性降低，肌张力下降同时，肾上腺素还作用于P受体， ①它的激活引起肠肌细胞膜中的cAMP合成增多，cAMP激活肠肌膜及肌浆网上Ca2+泵活 动，使肌浆中Ca2+浓度降低，亦使肌张力降低；②P受体激活后还促使K+及Ca2+外流增 加，加速膜的超极化，促进了肠肌肌张力的减低3.4．在浴槽中加入 1 滴 NaOH 于浴槽中，则曲线呈上升的情况，即肠管活动增强 原因在于NaOH可以中和H+，改变了细胞外液的PH值，PH过高、过低，收缩幅度及张力 都会降低，最适PH时收缩效果最好3.5．在浴槽中加入盐酸溶液 2 滴后，离体肠管活动减弱，描记曲线出现收缩幅度 降低，频率变慢出现这一现象，目前认为其原因在于：①细胞外H+升高 时，Ca2+通道 的活性受到抑制，使得Ca2+内流减少②H+升高能干扰肌肉的代谢和肌丝滑行的生化过 程：H+能与Ca2+竞争钙调蛋白的结合位点而使肌球蛋白ATP酶活性降低（近期有理论认 为是直接抑制作用而非竞争作用）；使肌原纤维对Ca2+的敏感性和Ca2+从肌质网的释放量 减少。

本实验由于操作失误，先加了 NaOH，后加了 HCl,实验结果图可以看出，HCl很好 地抑制了胃肠道的运动3.6.浸浴小肠肠管的台氏液温度以37.5°C左右为宜，低于或高于这个温度，都会 影响结果因为肠管平滑肌对温度改变极为敏感，当温度降到25C左右时，由于代谢水 平的降低，兴奋性减弱，可出现收缩曲线基线下移，频率变慢，收缩幅度变小有时可 能会见到基线先上移后下降的现象这是因为降温本身对肠管是一种刺激，也可短暂地 加强代谢活动，所以肌张力升高当温度高于40C时，由于酶活性提高，各离子通道活 性增加，使得基线上移，收缩频率增高，幅度增加当然，如果台氏液温度过高（50C 以上），可因蛋白变性，使肠管收缩功能消失四、实验结论消化管运动受神经和激素的调节副交感神经兴奋时，其节后纤维释放乙酰胆碱， 与平滑肌膜上M受体结合，产生兴奋效应，使胃肠运动增强；而交感神经兴奋时则产生 抑制作用消化道平滑肌的活动易受温度、PH值及其它化学因素、药物因素的影响参考资料】[1] . 陆源，林国华，杨午鸣主编.技能学实验教程.科学出版社.2010.6[2] .张志雄，生理学.上海科学科技出版社.2006.8。