网织红细胞计数.ppt

六、网织红细胞计数六、网织红细胞计数八、红细胞沉降率测定八、红细胞沉降率测定n是介于晚幼红细胞和成熟是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的过渡细胞，红细胞之间的过渡细胞，其胞质中残存的嗜碱性物其胞质中残存的嗜碱性物质质(RNA)经碱性染料活体经碱性染料活体染色后，形成蓝色或紫色染色后，形成蓝色或紫色的点粒状或丝网织状物的点粒状或丝网织状物. .网织红细胞网织红细胞（（reticulocyte,Ret)ICSH分型分型（模式图）（模式图）Ⅰ丝球型丝球型Ⅱ网型网型Ⅲ破网型破网型Ⅳ点粒型点粒型对网织红细胞的描述对网织红细胞的描述 n是晚幼红细胞脱核后的未完全成熟的红细胞是晚幼红细胞脱核后的未完全成熟的红细胞n体积比成熟红细胞体积稍大体积比成熟红细胞体积稍大n胞浆内残存有胞浆内残存有正常核糖核酸正常核糖核酸(RNA)n具有合成血红蛋白的能力具有合成血红蛋白的能力n核糖核酸越多，网织红细胞越幼稚核糖核酸越多，网织红细胞越幼稚n外周血中主要是外周血中主要是ⅣⅣ型型网织红细胞网织红细胞n网织红细胞经瑞氏染色为嗜多色性红细胞网织红细胞经瑞氏染色为嗜多色性红细胞n存在于骨髓与外周血中存在于骨髓与外周血中网织红细胞计数网织红细胞计数（（Ret））o检查外周血中网织红细胞数，可以推检查外周血中网织红细胞数，可以推知骨髓产生红细胞的情况。

知骨髓产生红细胞的情况o检测原理及方法检测原理及方法n普通显微镜法（手工法）普通显微镜法（手工法）n仪器法仪器法对对Ret内内RNA染色染色 进行计数进行计数 n检测原理：活体染料的碱性着色基检测原理：活体染料的碱性着色基团（带正电）与团（带正电）与Ret核糖核酸（带负核糖核酸（带负电）结合，电）结合，RNA凝缩形成蓝色的点、凝缩形成蓝色的点、线、网状结构线、网状结构用显微镜目测计数用显微镜目测计数染色的染色的Ret占占RBC的比例　　　1.1.显微镜法显微镜法 操作操作 n标本：标本：末梢血或末梢血或EDTA抗凝静脉血抗凝静脉血n染色：染料与血标本混合染色：染料与血标本混合(1(1：：1)1)n制作薄血涂片制作薄血涂片n计数（油镜）计数（油镜）n玻片法玻片法n试管法试管法n普通计数法普通计数法n米勒窥盘法米勒窥盘法染液染液1 1滴滴 混匀混匀静置静置推片推片染液、血标染液、血标本各一滴本各一滴推片推片混匀静置混匀静置1515～～20min 20min 试管法试管法 计数计数10001000个红细胞区域内的网织红细胞数个红细胞区域内的网织红细胞数报告方式：报告方式：百分数：百分数：Ret%=‚绝对值：绝对值： Ret=RBC× Ret%普通计数法普通计数法 Miller窥盘法窥盘法 Ret%= Ret=RBC× Ret%2.2.仪器法仪器法n用用特特殊殊染染料料（（荧荧光光染染料料））使使网网织织红红细细胞胞内内的的RNARNA着着色色，，计计数数并并计计算算出出网网织织红红细胞占红细胞的百分比。

细胞占红细胞的百分比n依依据据荧荧光光强强度度将将网网织织红红细细胞胞分分成成高高荧荧光光强强度度网网织织红红细细胞胞（（HFRHFR））、、中中荧荧光光强强度度网网织织红红细细胞胞（（MFRMFR））、、低低荧荧光光强强度度网网织红细胞（织红细胞（LFRLFR）n普通显微镜法普通显微镜法简便，成本低，直接观察细胞形态简便，成本低，直接观察细胞形态‚影响因素多，重复性差影响因素多，重复性差n仪器法仪器法 精密度高，易标准化精密度高，易标准化‚有核红细胞，巨大血小板，有核红细胞，巨大血小板，H-JH-J小小体使结果假性增高体使结果假性增高方法学评价方法学评价 n染料选择（染料选择（WHO推荐使用新亚甲蓝）推荐使用新亚甲蓝）n染色技术（推荐试管法染色）染色技术（推荐试管法染色）n正确辨认网织红细胞（含正确辨认网织红细胞（含2个网织颗粒记个网织颗粒记为为Ret））n网织红细胞计数（网织红细胞计数（Miller窥盘法）窥盘法）质量保证（手工计数法）质量保证（手工计数法）n百分数百分数（（Ret%）　）　 成人和儿童：成人和儿童：0.5%～～1.5% 新生儿：新生儿：2% ～～6%n绝对数（绝对数（RetRet）） 成人：成人：(24 ～～84)×109/L参考值参考值 n评价骨髓增生能力，鉴别贫血类型评价骨髓增生能力，鉴别贫血类型临床意义临床意义 n网织红细胞增多：骨髓造血功能旺盛，网织红细胞增多：骨髓造血功能旺盛，常见于溶血性贫血或急性失血性贫血。

常见于溶血性贫血或急性失血性贫血n网织红细胞减少：骨髓增生低下，常见网织红细胞减少：骨髓增生低下，常见于再障n评价治疗疗效评价治疗疗效临床意义临床意义 n贫血治疗：缺铁贫或巨幼贫治疗贫血治疗：缺铁贫或巨幼贫治疗有效有效RetRet出现一个先升后降的峰出现一个先升后降的峰n骨髓移植后监测骨髓造血恢复骨髓移植后监测骨髓造血恢复n放疗和化疗的监测放疗和化疗的监测网织红细胞的动态观察可指导临床网织红细胞的动态观察可指导临床适时调整治疗方案，避免造成严重适时调整治疗方案，避免造成严重的骨髓抑制的骨髓抑制临床意义临床意义 红细胞沉降红细胞沉降率率（Erythrocyte sedimentation rate，ESR） n规定条件下，离体规定条件下，离体抗凝全血静置后红抗凝全血静置后红细胞自然下沉的速细胞自然下沉的速率，以单位时间红率，以单位时间红细胞下沉后血浆段细胞下沉后血浆段的距离表示的距离表示mmn血沉过程一般分为血沉过程一般分为3 3期期 红细胞缗钱样聚集期，约红细胞缗钱样聚集期，约10min10min 红细胞快速沉降期，约红细胞快速沉降期，约40min40min 红细胞堆积期，约红细胞堆积期，约10min10minnESR对于对于监测疾病的动态过程监测疾病的动态过程是是一项可靠的指标。

一项可靠的指标血沉血沉3期中，期中，红细胞沉降的红细胞沉降的速率不同速率不同手工法手工法 n魏氏法、温氏法、魏氏法、温氏法、ζ血沉率及潘氏法血沉率及潘氏法, , 检测原理相似检测原理相似n差别在于差别在于抗凝剂、用血量、血沉管规抗凝剂、用血量、血沉管规格、观察时间的不同，故各种方法的参格、观察时间的不同，故各种方法的参考值不同考值不同nICSH推荐魏氏法为血沉测定参考方法推荐魏氏法为血沉测定参考方法魏氏法魏氏法 n将将枸橼酸钠枸橼酸钠抗凝血吸入抗凝血吸入特制血沉管内，特制血沉管内，垂直立垂直立于室温中，于室温中，1h1h末末读取红读取红细胞层下沉的距离，用细胞层下沉的距离，用毫米（毫米（mmmm）数值报告数值报告10mmESR：：10mm/h 魏氏魏氏血沉测定血沉测定 n抗凝血液静置后，红细胞下降，红细胞抗凝血液静置后，红细胞下降，红细胞与血浆分离，其界面随时间而下移血与血浆分离，其界面随时间而下移血沉仪用沉仪用光电比浊法、红外线扫描法或摄光电比浊法、红外线扫描法或摄影法影法定时扫描红细胞与血浆界面位置，定时扫描红细胞与血浆界面位置，得到血沉值并显示红细胞沉降高度得到血沉值并显示红细胞沉降高度H与与对应时间对应时间t相关的相关的H-t曲线。

曲线自动血沉仪法自动血沉仪法 方法学评价方法学评价 方法方法优点优点缺点缺点魏氏法魏氏法国内规范方法，国内规范方法，简单实用简单实用测定血沉某时刻最测定血沉某时刻最终结果，特异性差终结果，特异性差自动血自动血沉仪沉仪自动化，快速化自动化，快速化，可动态检测血，可动态检测血沉全过程沉全过程结果应与参考方法结果应与参考方法比较比较n血浆因素血浆因素 n红细胞因素红细胞因素n其他因素其他因素ESR影响因素影响因素 球蛋白球蛋白 纤维蛋白原纤维蛋白原胆固醇胆固醇增多增多加速红细胞叠连加速红细胞叠连血沉血沉增多增多白蛋白白蛋白卵磷脂卵磷脂糖蛋白糖蛋白减慢红细胞叠连减慢红细胞叠连血沉血沉血浆成分的改变血浆成分的改变 RBCRBC叠连叠连球球蛋蛋白白n贫血贫血→RBC总面积减少，总面积减少，ESR↑nRBC增多，增多，ESR ↓nRBC直径愈大，直径愈大，ESR ↑n球形球形RBC增多，增多，ESR↓红细胞数量和形状红细胞数量和形状 n血沉管位置血沉管位置其他因素其他因素 n血沉管倾斜，血沉增快血沉管倾斜，血沉增快n温度温度n温度＞温度＞25℃，血沉增快，结，血沉增快，结果应校正果应校正n抗凝剂用量准确：枸橼酸钠抗凝剂用量准确：枸橼酸钠（（109mmol/L））与血液之比与血液之比（（1：：4））。

n血沉装置：血沉管干燥、洁净、直立；血血沉装置：血沉管干燥、洁净、直立；血沉架，放置平稳，不振动沉架，放置平稳，不振动n血液标本：无凝、溶血，采集血液标本：无凝、溶血，采集4h4h内检测n测定环境：温度测定环境：温度18-25度，避免阳光直射度，避免阳光直射质量保证（魏氏法）质量保证（魏氏法） 参考值（魏氏法）参考值（魏氏法） n 成年男性成年男性 0～～15mm/h 成年女性成年女性 0～～20mm/hn生理性增快生理性增快临床意义临床意义 n女性高于男性（纤维蛋白原高）女性高于男性（纤维蛋白原高）n老年人（纤维蛋白原增高）老年人（纤维蛋白原增高）n妇女月经期或妊娠妇女月经期或妊娠3 3个月以上个月以上n病理性增快病理性增快临床意义临床意义 n炎症性疾病炎症性疾病n组织损伤及坏死组织损伤及坏死n恶性肿瘤恶性肿瘤n血浆球蛋白增高的疾病血浆球蛋白增高的疾病n自身免疫病自身免疫病n高胆固醇血症高胆固醇血症n血沉减慢血沉减慢（（意义较小）意义较小）临床意义临床意义 n见于红细胞数量明显增多及纤见于红细胞数量明显增多及纤维蛋白原含量严重减低时维蛋白原含量严重减低时魏氏魏氏血沉测定血沉测定 n用于观察疾病的动态变化、区别功能性用于观察疾病的动态变化、区别功能性与器质性病变、鉴别良性与恶性肿瘤与器质性病变、鉴别良性与恶性肿瘤n观察结核病和风湿热的病情变化和疗效。

观察结核病和风湿热的病情变化和疗效血沉加速，表示病情复发和活跃；当病血沉加速，表示病情复发和活跃；当病情好转或静止时，血沉逐渐恢复情好转或静止时，血沉逐渐恢复n某些疾病的鉴别诊断，如某些疾病的鉴别诊断，如心肌梗死心肌梗死和心和心绞痛，绞痛，胃癌胃癌和胃溃疡的鉴别和胃溃疡的鉴别血沉的临床应用血沉的临床应用 n反反映映所所测测标标本本中中红红细细胞胞体体积积大大小小的的异异质质程度，常用变异系数（程度，常用变异系数（CVCV）表示n由由血血液液分分析析仪仪根根据据红红细细胞胞体体积积的的直直方方图图导导出出比比血血涂涂片片上上红红细细胞胞形形态态大大小小不不均均的观察更为客观和准确的观察更为客观和准确n参考值参考值 成人：成人：11.5%11.5%～～14.5%14.5%红细胞体积分布宽度红细胞体积分布宽度(RDW) 按按RDW和和MCV的贫血分类法的贫血分类法红细胞形态红细胞形态 RDW和和MCV 疾疾 病病正细胞均一性正细胞均一性RDW正常正常 MCV正正常常 急性失血性贫血急性失血性贫血大细胞均一性大细胞均一性RDW正常正常 MCV↑↑骨髓增生异常综合症骨髓增生异常综合症小细胞均一性小细胞均一性RDW正常正常 MCV↓↓轻形地中海性贫血轻形地中海性贫血正细胞不均一性正细胞不均一性 RDW↑↑ MCV正常正常 铁粒幼细胞性贫血铁粒幼细胞性贫血小细胞不均一性小细胞不均一性 RDW↑↑ MCV ↓↓ 缺铁性贫血缺铁性贫血大细胞不均一性大细胞不均一性RDW↑↑ MCV ↑↑巨幼细胞性贫血巨幼细胞性贫血红细胞各参数临床应用红细胞各参数临床应用贫血诊断贫血诊断贫血形态学分类依据贫血形态学分类依据骨髓造血功能评价骨髓造血功能评价动态观察疾病变化动态观察疾病变化小结小结网织红细胞定义、显微网织红细胞定义、显微镜计数原理？镜计数原理？„血沉测定的临床意义？血沉测定的临床意义？‚网织红细胞计数的临床网织红细胞计数的临床意义？意义？ƒ血沉测定的影响因素？血沉测定的影响因素？。