体液常规和生化操作规程及临床意义.docx

脑脊液常规检查一、标本的采集：将脑脊液分别收集于 3 个无菌小瓶（或试管） 中，每瓶 1~2ml 即可，第一瓶做细菌学检查，第2瓶做化学或免疫学 检查，第 3 瓶做细胞计数标本采集后要立即送检、化验，一般不能超过 1 小时因为放置 时间过久，其性质可能发生改变，影响检验结果：1、细胞破坏或沉淀，与纤维蛋白凝集成块，导致细胞分布不均 而使计数不准确；2、细胞离体后迅速变形乃至渐渐消失，影响分类计数；3、葡萄迅速分解，造成含糖量降低；4、细菌溶解，影响细菌的检出二、一般性状检查：外观颜色及透明度1、血性标本的区分：离心后，上层液体为黄色，隐血试验为阳 性，多为蛛网膜下腔出血，且出血已经超过4 小时如上层 液体澄清无色，红细胞沉降于管底，多为穿刺损伤或因病变 所致的新鲜出血2、黄色：除陈旧性出血外，在脑脊髓肿瘤所致脑脊液滞留时， 也可呈黄色黄疸患者的脑脊液也可呈黄色3、米汤样：由于白（脓）细胞增多，可见于各种化脓性细菌引 起的脑膜炎4、绿色：可见于绿脓杆菌、肺炎链球菌、甲型链球菌引起的脑 膜炎5、褐色或黑色：见于侵犯脑膜的中枢神经系统黑色素瘤6、结核性脑膜炎常呈毛玻璃样微混三、潘氏球蛋白定性试验：5、原理：脑脊液中球蛋白与苯酚结合，可形成不溶性蛋白盐而 下沉，产生白色浑浊或沉淀。

6、 操作：取饱和石炭酸溶液2~3ml，置于小试验管内，用毛细 滴管滴入脑脊液1~ 2滴，衬以黑背景，立即观察结果7、 结果判断：阴性（清晰透明，不显雾状）、弱阳性（呈微白 雾状，在黑色背景下，才能看到）、阳性（灰白色云雾状或 白色浑浊）、强阳性和最强阳性（白色絮状沉淀或白色凝块）8、注意事项：（1） 红细胞过多时，须离心沉淀，吸取上清液进行试验；（2） 试验中所用试管和滴管必须十分洁净，否则容易出现假阳性 结果3） 饱和石炭酸试剂如不纯，可引起假阳性反应；室温低于 10°C,饱和石炭酸饱和度低，亦可引起假阴性结果四、 临床意义：正常多为阴性有脑组织和脑膜疾患时常呈阳性 反应，如化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、梅毒性中枢神经系统疾病、 脊髓灰质炎、流行性脑炎等等脑出血时多呈X阳性反应，如外伤性血 液混入脑脊液中，亦可阳呈性反应五、 白细胞计数：1、 对澄清脑脊液：小试管内放入冰醋酸 1~2 滴，转动试管，使 内壁沾有冰乙酸后倾去之，然后滴加混匀的脑脊液充入计数池计数2、 血性标本：将混匀的脑脊液用1%的冰醋酸溶液稀释后进行计 数3、 参考值：正常人脑脊液中无红细胞，仅有少量白细胞成人：（0~8）x106/L儿童：（0〜15）x106/L4、 临床意义：（1） 中枢神经系统病变的脑脊液，细胞数可增多，其增多的程度 及种类与病变的性质有关。

2） 中枢神经系统病毒感染、结核性或霉菌性脑膜炎时，细胞数 可中度增加，常以淋巴细胞为主3） 细菌感染时（化脓性脑膜性），细胞数显著增加，以中性粒 细胞为主4）脑寄生虫病时，可见较多的嗜酸性粒细胞5）脑室或蛛网膜下腔出血时，脑脊液内可见多数红细胞 胸腹水常规检查一、标本采集：由临床医师在无菌条件下，对各积液部位行穿 刺采集常规及细胞学检查约留取2ml,生化检验留2ml如查结核杆菌则需10ml为防止出现凝块、细胞变性、 细胞破坏自溶等，除应即时送检外，常规及细胞学检查宜 用1/60标本量的100g/LEDTANa2抗凝，并立即离心浓集 细胞，否则应在标本内加入乙醇至 10%的浓度，置冰箱保 存生化检查标本宜用肝素抗凝另外留1 管不加任何抗 凝剂用以观察有无凝固现象二、外观：1、 颜色：漏出液多为淡黄色，渗出液根据病因不同常呈现不 同的颜色，红色多见于恶性肿瘤、结核病急性期、风湿性 疾病等；化脓性细菌感染时积液多呈黄色；绿脓杆菌感染 时呈绿色；内脏损伤、恶性肿瘤、出血性疾病及穿刺损伤 时积液可呈咖啡色，丝虫病淋巴结肿瘤、淋巴结结核、慢 性肾炎肾变期、肝硬化、腹膜癌等呈乳白色，脓胸和化脓 性胸膜炎时呈乳酪色。

2、 透明度：漏出液多为透明或微浊；渗出液因含较多细胞、 细菌等成分而呈现不同程度的混浊3、 比重：漏出液比重多低于 1.018；渗出液因含有多量蛋白 质及细胞故比重一般高于漏出液，常大于1.0184、 凝固性：漏出液含纤维蛋白原甚微，一般不凝固；渗出液 因含有较多纤维蛋白原等凝血物质易于凝固，但当渗出液 中含有大量纤维蛋白溶解酶时，也可发生凝固二、浆膜粘蛋白定性试验：1、原理：渗出液中可含多量浆膜粘蛋白，在酸性条件下可产生 白色雾状沉淀2、 操作：取100mI量筒，加蒸馏水100ml，滴入冰醋酸0.1ml , 充分混匀，静止10分钟，将穿刺液靠近量筒液面逐滴轻轻 滴下，在黑色背景下，观察白色雾状沉淀的发生及其下降速 度等3、 结果判定：阴性（清晰不显雾状）；±（渐呈白雾状）；+ （呈白雾状）；2+（白薄云状）；3+（白浓云状）三、细胞计数：同脑脊液四、临床意义：1、渗出液中含较多浆膜粘蛋白，故呈阳性，而漏出液为阴性， 但如漏出液经长期吸收蛋白浓缩后，也可呈阳性2、 炎症性疾患（化脓性、结核性）蛋白含量多为40克/升以上； 恶性肿瘤为20~40克/升；肝静脉血栓形成综合征为40~60 克/升；淤血性心功能不全、肾病变患者的胸腹水中蛋白浓度 最低，为1~10克/升；肝硬变的腹水多为5~20克/升。

3、 穿刺液中以多形核白细胞为主，提示化脓性炎症或早期结核 性积液在结核性渗出液的吸收期可见嗜酸性粒细胞增多4、以淋巴细胞增多为主，提示慢性炎症可见于结核性渗出液、 病毒感染、系统性红斑狼疮的多发性浆膜炎等5、以间皮细胞及组织细胞增多为主，提示浆膜上皮脱落旺盛， 可见于淤血、恶性肿瘤五、胸腹水蛋白定量试验：加试剂1000微升，样品量加26微升 后，水浴10分钟，上机测定，结果除以2后为标本结果 脑脊液蛋白定性测定操作步骤潘氏球蛋白定性试验：1、原理：脑脊液中球蛋白与苯酚结合，可形成不溶性蛋白盐而 下沉，产生白色浑浊或沉淀2、 操作：取饱和石炭酸溶液2~3ml，置于小试验管内，用毛细 滴管滴入脑脊液1~2滴，衬以黑背景，立即观察结果3、 结果判断：阴性（清晰透明，不显雾状）、弱阳性（呈微白雾状，在黑色背景下，才能看到）、阳性（灰白色云雾状或 白色浑浊）、强阳性和最强阳性（白色絮状沉淀或白色凝块）4、注意事项：（1）红细胞过多时，须离心沉淀，吸取上清液进行 试验；（2）试验中所用试管和滴管必须十分洁净，否则容易出 现假阳性结果3）饱和石炭酸试剂如不纯，可引起假阳性反 应；室温低于1O°C,饱和石炭酸饱和度低，亦可引起假阴性 结果。

浆膜粘（胸腹水）蛋白定性试验：1、 操作规程：取100ml量筒，加蒸馏水100ml，滴入冰醋酸0.1ml，充分混匀，静止10分钟，将穿刺液靠近量筒液面逐滴轻轻 滴下，在黑色背景下，观察白色雾状沉淀的发生及其下降速 度等2、 结果判定：阴性（清晰不显雾状）；±（渐呈白雾状）；+ （呈白雾状）；2+（白薄云状）；3+（白浓云状） 脑脊液蛋白定量及葡萄糖定量操作规程 脑脊液蛋白定量试验1 ：脑脊液标准工作液10u l 600u l10u l 600u l水浴10分钟，上机测定C二样品吸光度/标准吸光度x1000g/L脑脊液蛋白定量试验2 ：磺基水杨酸—硫酸钠比浊法 脑脊液标准磺基水杨酸-硫酸钠试500u l 4ml500u l 4ml混匀后放置10分钟， 530nm ，下比色读取吸光度值进行计算C二样品管吸光度/标准管吸光度X标准管浓度 脑脊液葡萄糖测定：样品工作液20u l 1500u l 水浴10分钟上机测定，结果除以2为样品最后的结果浆膜腔（胸腹水）积液蛋白定量试验：胸腹水工作液26u l 1000u l 水浴10分钟后，上机测定，结果除以2为样本最后的结果胸腹 水葡萄糖定量测定：胸腹水工作液10u l 1500u l水浴10分钟后上机测定。