《丹参酮ⅡA对CYP1A2底物茶碱在大鼠体内药动学影响的研.docx

《丹参酮IIA对CYP1A2底物茶碱在大鼠体内药动学影响的研究》可行性研究报告(1) 立项的背景和意义药物相互作用(drug-drug interaction)通常指某种药物作用时间或强度因此前或同时服用 其他药物对其体内过程方面的影响发生可以量化的改变，继而表现出该药效和/或毒性的变化随 着联合用药，尤其是化学合成药物与中药等传统药物合用的普遍增加，药物间相互作用在世界范 围内对医疗保健系统提出了挑战丹参酮IIA ( tanshinone IIA)是丹参根中的二萜醌类脂溶性有效成分，经大量药理及临床 观察研究证明，具有多种药理作用，如心血管作用、抗肿瘤、抗氧化、抗菌消炎作用等，具有良 好的新药开发前景［1］茶碱( Theophylline) 是目前常用的平喘药，临床常用于哮喘、慢性阻塞 性肺疾病的长期治疗其治疗指数窄，药动学个体差异大，容易受遗传、病理、生理、合并用药 以及环境等因素的影响⑵由于丹参酮IIA药理作用广泛，临床上两种药物合并使用的机会很多， 但是尚无有关两者的相互作用的研究报道CYP1A2占肝CYP药物代谢酶的13%,参与了多种临床药物的代谢，在对临床疾病的治疗转归 方面具有重要的药理和毒理意义［3］。

实验已证实，丹参酮IIA能显著地诱导大鼠肝微粒体CYP1A2, 提示经CYP1A2代谢的药物在临床上与丹参酮IIA合用时，可能发生药物之间的相互作用［4-肌茶 碱是CYP1A2的底物，主要经肝微粒体CYP1A2代谢而失活⑹理论上丹参酮IIA与茶碱合并使用 时，由于酶的诱导使茶碱血药浓度降低，从而影响茶碱临床疗效因此本课题意在通过动物实验， 研究丹参酮IIA对茶碱在大鼠体内的药动学参数的影响，深入了解中药有效成分对药物代谢酶的 影响规律，有助于阐明中药与化学合成药相互作用的机制，为临床合理用药提供理论依据参考文献：1. 毕惠嫦，和凡，温莹莹，等•丹参酮IIA在大鼠肝微粒体酶中的代谢动力学［J］.中草药，2007,38(6):883. 2． Taylor WJ． Simkin handbook of therapeutic monitoring［M］． USA，SIMKIN Inc，1991: 111．3. 王黎青，王勇，邓勋，等.药物代谢酶细胞色素P4501A2的研究［J］.今日药学，2010,20 (12)： 9.4. 和凡，钟国平，赵立子，等.丹参酮IIA对大鼠肝细胞色素P450酶的诱导作用［J］.中草药，2009,40(6):938.5. 潘莹，邓颖，毕惠嫦，等•隐丹参酮对大鼠肝微粒体CYP酶的影响［J］.中国新药与临床药理学，2009,20 (4):331.6. Tjia JF， Colbert J， Back DJ. Theophylline metabolism in human livermicrosomes:inhibition studies［J］. J Pharmacol Exp Ther， 1996， 276:912•(2) 国内外研究现状和发展趋势中药可能通过影响药物代谢酶的活性机制，增加或降低合用药物的疗效或毒副作用，从而影 响人体健康，导致药物相互作用的发生。

近年来，中药对药物代谢酶的影响的研究日渐加深，研 究的热点集中在两个方面:一方面研究中药对药物代谢酶的诱导或抑制作用，另一方面研究中药 与中药、中药与西药之间代谢性相互作用［1］丹参酮IIA的对药物的影响目前主要集中在代谢酶 的诱导或抑制作用［2-3］，但尚未开展与其他药物相互作用研究，因此这一方面的研究亟需进一步深 入另一方面，自从1984年国外医生报道6 名患者合并使用依诺沙星和氨茶碱出现一系列毒性反 应后，茶碱在体内与其他药物相互作用代谢的研究，一直备受人们关注目前，已知许多药物能 明显影响茶碱药代动力学，影响药物数量逐年增加［4］目前，一些常用中药与西药合用后可引发意外的不良反应，如当归、丹参、银杏与华法令合 用后有加重出血的倾向，小柴胡汤与泼尼松合用可导致后者的血药浓度降低，贯叶连翘与地高辛、 茶碱、环孢素等合用，可使这些药物生物利用度降低，人参与抗抑郁药合用甚至诱发躁狂症状等 ［5］中、西药合用后引起毒副作用的报道已引起医药界广泛重视，开展中药与化学合成药相互作 用的机理的研究也势在必行参考文献:1. 卢新建•中药对药物代谢酶的影响J］.齐鲁药事，2008,27 (6)： 361.2. 毕惠嫦，和凡，温莹莹，等.丹参酮IIA在大鼠肝微粒体酶中的代谢动力学［J］.中草药，2007,38(6):883.3. 和凡，钟国平，赵立子，等.丹参酮IIA对大鼠肝细胞色素P450酶的诱导作用［J］.中草药，2009,40(6):938.4. 唐春萍.合并用药对氨茶碱药代动力学的影响［J］.广东药学院学报，1998,14 (4)： 300.5. 杨秀芬，王乃平，曾繁典.中药有效成分对药物代谢酶的影响［J］.中国中药杂志，2002,27 (5)： 325.(3) 研究开发内容和技术关键1. 研究开发内容分三部分：第一部分：建立一种用高效液相色谱仪测定大鼠体内药物浓度的分析方法[1-3]1）标准溶液的配置：贮备液、稀释溶剂的选择等。

2）确定色谱条件：考察系统适应性，符合药典要求3）血清样本的处理：血量、提取溶剂、内标等4）方法学的确证：确定线性范围，最低检测限，准确度、精密度及稳定性，均须符合药代动 力学研究要求第二部分：进行动物实验[3-4]1） 实验动物：大鼠24只，雄性，体重300g左右，实验前禁食Id2） 动物分组：空白组、丹参酮IIA用药组（低剂量组和高剂量组）3） 给药：大鼠分3组，每组8只空白组：注射等量的生理盐水丹参酮IIA用药组：低剂 量组，7mg/ （kg • d），ig；高剂量组：20mg/ （kg • d），ig，连续7d第7d给药后每组均 灌胃给予氨茶碱（20.8mg/kg）,分别于给药前和给药后的0.17 h、0.33 h、0.5 h、1.0 h、 1.5 h、2.0 h、4.0 h、6.0 h、8.0 h、10.0 h、12.0 h 尾静脉采血 0.5ml,肝素抗凝，3000r/min 离心10min，分离血浆，于-20°C保存待测第三部分： 用 DAS 软件统计分析，不同组大鼠体内茶碱药动学参数的差异1） 根据测定的血药浓度用DAS药动学软件统计参数2） 统计分析参数差异2. 关键技术：1） ：样本处理方法的优化，满足检测的需求。

2） ：技术关键是：给药剂量和采血时间的确定3） ：动力学模型的合理选用4） 预期目标（主要技术经济指标、知识产权申请情况、应用前景）1. 本课题研究对可进一步了解中药有效成分对药物代谢酶的影响规律，有助于阐明中药与化学合成药相互作用的机制，具有重要的理论意义2. 本课题可进一步提示影响茶碱体内代谢的影响因素，指导临床有效安全利用茶碱，具有重要 的实践意义3. 预计在核心期刊发表文章1-2篇5) 研究方案、技术路线、组织方式与课题分解研究方案：1. 分步实施：参考文献先建立大鼠体内茶碱血药浓度测定方法，然后通过预实验，确定动物实 验方法，再进行动物实验，最后进行药动学参数统计学处理2. 计划实施：按计划进度实施课题，具体任务责任到人，定期分析总结技术路线：(6) 计划进度安排1. 2012年 03月至2012年12 月2. 2013年 01月至2013年05 月3. 2013年 06月至2013年07 月4. 2013年 08月至2013年12 月5. 2014年 01月至2014年12 月申报课题、购买试剂建立血药浓度分析方法预实验，确定实验方案 完成动物实验，监测血药浓度 发表文章，准备结题(7) 现有工作基础和条件1. 技术方面：1)体内药物分析技术成熟；2)2009 年开展过药物代谢动力学实验和时辰药动学 研究2. 人员及实验条件：1)有专门的药物代谢动学研究人员；2)实验场所有临床药学实验室和温 州医学院药理学实验室3. 设备与动物：现有岛津液相一台。

动物从从温州医学院动物房购买本课题参与者中3 位均 有动物实验合格证书(温州医学院动物实验培训基地)(8) 经费预算1. 设备购置费0.7 万元，检测仪器配件等；2. 能源材料费0.5 万元，如一次性无菌用品、药品原材料、对照品和化学试剂等；3. 设计试验费0.1 万元；4. 验收费 0.2 元，课题验收等；5. 人员费 0.3 元，如动物实验；6. 其他费用 0.2 元，如购买打印复印资料、版面费等。