猪病诊断技术PPT.ppt

一、猪病综合诊断一、猪病综合诊断•（一）（一）现场快速快速诊断断•1、、临诊流行病学流行病学调查；；•2、、临诊症状症状观察；察；•3、尸体剖、尸体剖检•（二）（二）实验室室诊断断•1、病理、病理组织学学诊断；断；•2、病原（因）学、病原（因）学诊断；断；•3、血清学、血清学诊断1 1、猪病流行病学调查的步骤和内容、猪病流行病学调查的步骤和内容•（（1））调查步步骤及方式及方式•根据根据检测材料的不同，材料的不同，动物流行病学物流行病学调查分分为临诊流行病学流行病学调查、血清学流行病学、血清学流行病学调查和病和病原学流行病学原学流行病学调查现就就临诊流行病学流行病学调查的的方式、内容方式、内容进行行讨论方式多样化化,如充分利如充分利用公司用公司销售网售网络、、现代通代通讯手段或以座手段或以座谈方式方式向畜主或相关知情人向畜主或相关知情人员询问疫情，或到疫情，或到现场进行仔行仔细调研，取得第一手研，取得第一手资料，然后料，然后进行行综合合归纳、分析、分析处理，作出初步理，作出初步诊断•（（2））调查内容内容•① 疾病流行情况：疾病流行情况：最初最初发病病时间、地点，随、地点，随后蔓延的情况，目前的疫情分布。

疫区内猪后蔓延的情况，目前的疫情分布疫区内猪的的饲养数量和分布情况，养数量和分布情况，发病猪的数量、年病猪的数量、年龄、性、性别、品种，疫病、品种，疫病传播速度和持播速度和持续时间等本次发病后是否病后是否进行行过诊断，采取断，采取过哪哪些措施，效果如何防疫情况如何，接种些措施，效果如何防疫情况如何，接种过哪些疫苗，疫苗来源、免疫方法和哪些疫苗，疫苗来源、免疫方法和剂量、接量、接种次数等是否做种次数等是否做过免疫免疫监测，群体抗体水，群体抗体水平如何发病前有无病前有无饲养管理、养管理、饲料、用料、用药、、气候等气候等变化或其他化或其他应激因素存在激因素存在查明感染明感染率、率、发病率、病死率和死亡率病率、病死率和死亡率特别关注以下指标的调查特别关注以下指标的调查•感染率：感染率：受受检猪中阳性猪数猪中阳性猪数/ /受受检猪数猪数××100%100%•发病率：病率：某一段某一段时期内某一特定期内某一特定风险猪群猪群发生某病比率生某病比率调查时期常期常为一年；特定猪群一年；特定猪群可指某个地区、某个猪可指某个地区、某个猪场、某个猪群、甚至、某个猪群、甚至某个猪某个猪场内的某个日内的某个日龄段的猪等。

而段的猪等而风险猪猪群群专指未患指未患过该病因而缺乏特异抵抗力而有病因而缺乏特异抵抗力而有患患该病病风险的猪群发病率直接病率直接测定定发病病风险，是分析病因的重要依据是分析病因的重要依据•患病率：患病率：特定特定时间所所调查猪群中某病新旧病例数，猪群中某病新旧病例数，而不管而不管这些病例的些病例的发病病时间, ,反映了某病的致病力　　反映了某病的致病力　　•病死率：病死率：是指在一定的是指在一定的时间内，患某病的病猪中因内，患某病的病猪中因该病而死亡的比病而死亡的比值病死率反映了某种疾病的死亡病死率反映了某种疾病的死亡概率，表示疾病的概率，表示疾病的严重程度，也反映治重程度，也反映治疗水平多用于急性病，用于急性病，较少用于慢性病少用于慢性病 •死亡率：死亡率：是某猪群在一定是某猪群在一定时间内因某病死亡猪数与内因某病死亡猪数与该猪群同期平均数之比猪群同期平均数之比 反映猪群反映猪群总的死亡水平，的死亡水平，是衡量猪群因病死亡危是衡量猪群因病死亡危险（机会）大小的指（机会）大小的指标也反映一个地区不同反映一个地区不同时期猪群的健康状况、期猪群的健康状况、卫生保健生保健水平 •②疫情来源情况：疫情来源情况：本地本地过去曾否去曾否发生生过类似似的疫病，在何的疫病，在何时何地何地发生，流行情况如何，生，流行情况如何，是否是否经过确确诊，有无，有无历史史资料可料可查，何，何时采采取取过何种防治措施，效果如何；如本地未何种防治措施，效果如何；如本地未发生生过，附近地区曾否，附近地区曾否发生生过；；这次次发病前，病前，周周边地区有无疫情；曾否由其他地方引地区有无疫情；曾否由其他地方引进过活猪、猪活猪、猪产品或品或饲料，料，输出地有无出地有无类似的疫似的疫病存在；是否有外来人病存在；是否有外来人员进入本入本场或本地区或本地区进行参行参观、、访问或或购销等活等活动。

•③传播途径和方式情况：播途径和方式情况：本地各本地各类有关猪的有关猪的饲养管理制度和方法；活猪尤其是病猪流养管理制度和方法；活猪尤其是病猪流动、、收收购以及防疫以及防疫卫生情况；交通生情况；交通检疫、市疫、市场检疫疫和屠宰和屠宰检验的情况；病死猪的情况；病死猪处理睛况；有哪些理睛况；有哪些助助长疫病疫病传播蔓延的因素和控制疫病的播蔓延的因素和控制疫病的经验；；疫区的地理、地形、河流、交通、气候、植被疫区的地理、地形、河流、交通、气候、植被和野生和野生动物、物、节肢肢动物等的分布和活物等的分布和活动情况，情况，它它们与疫病的与疫病的发生及蔓延生及蔓延传播之播之间有无关系等有无关系等•④其他：其他：该地区的政治、地区的政治、经济基本情况，群基本情况，群众生众生产和生活活和生活活动的基本情况和特点，畜牧的基本情况和特点，畜牧兽医机构和工作的基本情况，当地医机构和工作的基本情况，当地领导、、兽医、医、饲养养员和群众和群众对疫情的看法如何等疫情的看法如何等2 2、临诊症状观察、临诊症状观察 就是用就是用望、望、闻、、问、切、叩、嗅、切、叩、嗅等最基等最基本的症状本的症状观察方法，通察方法，通过我我们的眼、耳、的眼、耳、手、鼻和手、鼻和脑等等发现症状，症状，经过分析，做分析，做出症状出症状诊断。

断 主要包括：主要包括：（（1）病猪登）病猪登记：：登登记畜主、地址、通畜主、地址、通讯、、猪的有关信息；猪的有关信息；（（2）全面系）全面系统检查：：外外观病症、体温病症、体温(37.5—39℃℃)、眼、眼结膜、精神、叫声、运膜、精神、叫声、运动、、呼吸、消化、泌尿等系呼吸、消化、泌尿等系统检查3 3、尸体剖检（后期专门讲解）、尸体剖检（后期专门讲解）•尸体剖尸体剖检是是诊断猪流行性疾病（断猪流行性疾病（传染病、部染病、部分非分非传染性疾病和寄生虫病）最客染性疾病和寄生虫病）最客观、最直、最直接、最接、最简便、最快速的便、最快速的临床床诊断方法•我国猪流行性疾病的致病因素非常复我国猪流行性疾病的致病因素非常复杂，多，多为混合感染、混合感染、继发感染、多因素疾病，感染、多因素疾病，单从从病原学或血清学的方法病原学或血清学的方法诊断疾病，很断疾病，很难做出做出确切确切诊断，不易分清主次病因，断，不易分清主次病因，难免出免出现主主观武断或片面武断或片面错误的的结论从尸体剖从尸体剖检入手入手结合病原学、血清学及病理合病原学、血清学及病理组织学学诊断才能断才能得出科学的得出科学的诊断断结论。

4 4、病理组织学诊断、病理组织学诊断•病理病理组织学学诊断：断：就是取病就是取病变组织，通，通过切片或涂片、切片或涂片、染色染色处理，在光学理，在光学显微微镜下下观察察细胞胞组织病病变，，对疾疾病做出病做出诊断包括细胞形胞形态学、学、组织化学方法化学方法•组织样品采集及送品采集及送检：：•（（1）一般包括肝）一般包括肝脏、、肾脏、脾、脾脏、肺、肺脏、心、心脏、淋、淋巴巴结、、脑等•（（2）采）采样部位：部位：应采集病采集病变与正常与正常组织交界交界处的的组织，以便于，以便于诊断断观察• （（3）采）采样大小：采集的大小：采集的组织样品不宜品不宜过大，一般采大，一般采集集1.5×1.5cm大小的大小的组织块，置于，置于10%福福尔马林溶液中，林溶液中，同一同一动物的物的组织应保存于一个容器中保存于一个容器中• （（4））样品的保存及运送：品的保存及运送：样品品经固定后可固定后可长期保存，期保存，送至送至实验室做病理室做病理组织学学检查5 5、病原（因）学诊断、病原（因）学诊断•对致病原因做微生物分离培养、致病原因做微生物分离培养、鉴定或利用定或利用现代分子代分子生物学方法，生物学方法，查找致病病毒、病原菌、寄生虫等，属找致病病毒、病原菌、寄生虫等，属病原学病原学诊断。

断•（（1））传统方法：方法：•①病毒：接种病毒：接种细胞分离病毒；胞分离病毒；电镜观察病毒粒子；光察病毒粒子；光镜观察包涵体或察包涵体或进行免疫行免疫组化化检测病原相关抗原；病原相关抗原；动物接种物接种试验等•②细菌：直接染色菌：直接染色观察；分离察；分离鉴定；定；动物接种物接种试验等等. •③寄生虫：直接寄生虫：直接观察或察或经处理光理光镜观察•④ 霉菌毒素：色霉菌毒素：色谱仪、紫光、紫光仪、免疫学方法等、免疫学方法等检测毒素含量毒素含量•（（2））现代分子生物学（基因代分子生物学（基因诊断）方法断）方法•基因基因诊断是采用分子生物学方法在断是采用分子生物学方法在DNA水平水平或或RNA水平水平对某一基因某一基因进行分析，从而行分析，从而对特特定的疾病定的疾病进行行诊断基因诊断可以利用特定断可以利用特定的的DNA探探针与目的基因形成分子与目的基因形成分子杂交的机理，交的机理，也可以利用已知也可以利用已知DNA序列序列设计引物引物对目的基目的基因因进行行PCR扩增，从增，从DNA水平和水平和mRNA的基因的基因转录水平上水平上检测出正在生出正在生长的病原体或潜伏的病原体或潜伏病原体，确定病原体，确定现行感染行感染还是以往感染；省却是以往感染；省却有些病原体原来需体外培养后方可有些病原体原来需体外培养后方可诊断的步断的步骤。

从而从而对传染性疾病作出染性疾病作出诊断 •感染性疾病外源性基因的感染性疾病外源性基因的检测：主要包：主要包括感染性病毒、括感染性病毒、细菌、支原体、寄生虫菌、支原体、寄生虫等在猪体内存在的生物外源性等在猪体内存在的生物外源性DNA或或RNA•这类检测一般根据已知的外源一般根据已知的外源DNA序列序列采用采用PCR或或RT-PCR的方法就可以的方法就可以进行快速、行快速、简便而准确的便而准确的诊断；因而，断；因而，传染性疾病染性疾病的基因的基因诊断断应用性极用性极强，目前已，目前已经在在临床上普遍开展床上普遍开展 •①聚合聚合酶链式反式反应（（PCR）技）技术通通过检测特定基因特定基因进而而检测病原体，病原体，PCR现已成已成为基因基因诊断的主要方法，断的主要方法，具有特异性具有特异性强、灵敏度高、操作、灵敏度高、操作简便、省便、省时等特点；而反等特点；而反转录PCR(RT-PCR)则用于用于检测RNA病原体•②分子探分子探针技技术：：DNA探探针杂交技交技术是是以已知以已知DNA片段作片段作为探探针与待与待测样品品DNA或其片段或其片段进行核酸分子行核酸分子杂交，从而确定交，从而确定两者的同源程度。

另外，根据重两者的同源程度另外，根据重组技技术所制造的基因芯片，即将特定序列所制造的基因芯片，即将特定序列DNA片段（基因探片段（基因探针）固定在硅片上，用于）固定在硅片上，用于基因基因测序，序，寻找病原的目的基因或找病原的目的基因或对基基因的序列因的序列进行分子水平上的分析行分子水平上的分析 病名病名样品样品口蹄疫口蹄疫 水疱皮、水疱液、食道、咽分泌物、扁桃体水疱皮、水疱液、食道、咽分泌物、扁桃体 猪瘟猪瘟 全血、骨髓、淋巴结、肾、脾全血、骨髓、淋巴结、肾、脾 伪狂犬病伪狂犬病 脑、脊髓液、扁桃体、淋巴结、流产胎儿、胎盘脑、脊髓液、扁桃体、淋巴结、流产胎儿、胎盘细小病毒病细小病毒病 流产胎儿、胎盘、鼻咽气管分泌物、气管粘膜流产胎儿、胎盘、鼻咽气管分泌物、气管粘膜 蓝耳病蓝耳病全血、肺全血、肺 猪传染性胃肠炎猪传染性胃肠炎粪便、小肠及内容物粪便、小肠及内容物 猪传染性胃肠炎猪传染性胃肠炎 粪便、小肠及内容物粪便、小肠及内容物 猪传染性胸膜肺炎猪传染性胸膜肺炎 鼻气管分泌物、肺支气管粘膜、肺、肝、脾鼻气管分泌物、肺支气管粘膜、肺、肝、脾 猪喘气病猪喘气病鼻气管分泌物、肺支气管粘膜、肺病变组织鼻气管分泌物、肺支气管粘膜、肺病变组织主要猪病病原检验取样样品参考表主要猪病病原检验取样样品参考表6.血清学诊断血清学诊断 （（1 1）凝集）凝集试验 　 凝集凝集试验的原理是：的原理是：颗粒抗原粒抗原( (红细胞、胞、细菌、病毒等菌、病毒等) )与含有相与含有相应抗体的血清混合抗体的血清混合, ,在在电解解质的参与下的参与下, , 则能能发生特异性生特异性结合，形成抗合，形成抗原抗体复合物原抗体复合物, ,这种复合物呈均匀状种复合物呈均匀状态悬浮于浮于液体中液体中, ,这时肉眼是看不肉眼是看不见的的, ,当抗原抗体复合当抗原抗体复合物在一定物在一定浓度的度的电解解质作用下作用下, ,复合物表面的复合物表面的电荷大部分被消除荷大部分被消除, ,失去了互相排斥的作用，失去了互相排斥的作用，复合物之复合物之间互相吸引，凝集成互相吸引，凝集成团, ,即出即出现肉眼肉眼可可见的凝集的凝集现象。

作用于凝集反象作用于凝集反应的抗原的抗原, ,称称为凝集原凝集原, ,与之相与之相结合的抗体合的抗体, ,称称为凝集素①全血平板凝集全血平板凝集试验: :本本试验在在实践中主要用践中主要用于于细菌性疾病的抗体菌性疾病的抗体检测和抗原和抗原( (经分离培养分离培养后后) )的的鉴定如猪丹毒抗原定如猪丹毒抗原( (丹毒杆菌的丹毒杆菌的纯培培养液养液) )测定被定被检猪血清中的抗体　　猪血清中的抗体　　 ②试管凝集管凝集试验: :试管凝集管凝集试验是一种定量法是一种定量法, ,用于用于测定被定被检血清或其他体液中有否某种抗血清或其他体液中有否某种抗体及其效价体及其效价, ,可作可作临床的床的辅助助诊断断, ,或用于流或用于流行病学行病学监测在猪场中中, ,本法常用于猪布氏杆本法常用于猪布氏杆菌病的菌病的诊断 •③间接接红细胞凝集胞凝集试验：：本法本法简称称间接血凝接血凝试验其原理是：将抗原其原理是：将抗原(或抗体或抗体)吸附在比其吸附在比其体体积大千万倍的大千万倍的红细胞表面胞表面,只需少量的抗体只需少量的抗体(或抗原或抗原)就可使就可使这种致敏的种致敏的红细胞通胞通过抗原和抗原和抗体的抗体的结合而出合而出现肉眼清晰可肉眼清晰可见的凝集的凝集现象。

象这种种试验能大大提高反能大大提高反应的敏感性的敏感性,如猪瘟如猪瘟检测.•　　 用抗体致敏用抗体致敏红细胞胞检测相相应的抗原的抗原,称称为反反向向间接血凝接血凝试验,反之反之,称称为正向正向间接血凝接血凝试验在猪病的在猪病的诊断中断中,常采用本法常采用本法对猪口蹄疫、水猪口蹄疫、水疱病、猪瘟、疱病、猪瘟、传染性胸膜肺炎等疾病抗原的染性胸膜肺炎等疾病抗原的鉴定定,或抗体的或抗体的检测　　　•④乳胶凝集乳胶凝集试验：：本法在猪病中本法在猪病中主要用于主要用于伪狂犬病和萎狂犬病和萎缩性鼻炎的性鼻炎的诊断断,是用其病毒致敏乳胶抗原来是用其病毒致敏乳胶抗原来检测被被检猪的血清、全血或乳汁中猪的血清、全血或乳汁中的抗体的抗体,具有具有简便、快速、特异、便、快速、特异、 敏感的敏感的优点 （（2）沉淀）沉淀试验 沉淀沉淀试验的原理是：利用可溶性抗原如的原理是：利用可溶性抗原如细菌菌的培养的培养滤液、病毒的可溶性抗原和血清等液、病毒的可溶性抗原和血清等,与与相相应的抗体的抗体结合合,在在电解解质存在存在时,可形成肉眼可形成肉眼可可见的白色沉淀物参加沉淀反的白色沉淀物。

参加沉淀反应的抗原的抗原,称称为沉淀原，抗体叫做沉淀素沉淀沉淀原，抗体叫做沉淀素沉淀试验的具体的具体方法有多种方法有多种,如如环状沉淀状沉淀试验、、琼脂脂扩散散试验和免疫和免疫电泳等在猪病的泳等在猪病的诊断中断中,目前最常用目前最常用的是的是琼脂脂扩散散试验本法可用已知抗原本法可用已知抗原测定未定未知抗体知抗体,反之亦然在猪病的反之亦然在猪病的实验室室诊断中，断中，常用于猪常用于猪伪狂犬病的抗体狂犬病的抗体检测,也可用此法也可用此法检查猪瘟、猪水疱病和猪痘等疾病猪瘟、猪水疱病和猪痘等疾病 （（3））酶联免疫吸附免疫吸附试验(ELISA)　　免疫免疫酶技技术是根据抗原与抗体特异性是根据抗原与抗体特异性结合合的功能的功能, ,以以酶作作标记物物, ,利用利用酶对底物具有高底物具有高效催化作用的原理而效催化作用的原理而设计的的, ,它既可用于抗原它既可用于抗原的的诊断断, ,也可也可进行血清抗体的行血清抗体的检测　本　本试验是通是通过化学方法将化学方法将酶与抗体与抗体( (或抗原或抗原) )结合起来合起来, , 标记后的抗体后的抗体( (或抗原或抗原) )仍然保持仍然保持与相与相应抗原抗原( (或抗体或抗体) )相相结合的免疫学活性。

合的免疫学活性例如例如, ,酶抗体与相抗体与相应抗原抗原结合后合后, ,形成形成酶标抗抗体体- -抗原复合物复合物中的抗原复合物复合物中的酶在遇到相在遇到相应的的底物底物时, ,催化底物分解、氧化而生成有色物催化底物分解、氧化而生成有色物质, ,有色有色产物的出物的出现, ,客客观地反映了地反映了酶的存在 根据有色根据有色产物的有无及其物的有无及其浓度度, ,即可即可间接推断被接推断被检抗原或抗体是否存在及抗原或抗体是否存在及其数量其数量, ,达到定性和定量的目的达到定性和定量的目的 目前目前对于猪瘟、于猪瘟、伪狂犬病、繁殖与呼狂犬病、繁殖与呼吸吸综合征、流行性腹泻、旋毛虫病、猪合征、流行性腹泻、旋毛虫病、猪气喘病等疾病气喘病等疾病, , 均采用免疫均采用免疫酶技技术进行行病原病原诊断，抗体断，抗体检测和血清学流行病学和血清学流行病学调查, ,并且已成并且已成为规模化猪模化猪场化化验室工作室工作的一的一项重要内容重要内容 二、诊断检测样品的采集、处二、诊断检测样品的采集、处理和运送理和运送 •（一）采（一）采样原原则• 1. 适适时采采样：：样品是有品是有时间要求的，要求的，应严格格按按规定定时间采采样；有；有临床症状需要作病原分床症状需要作病原分离的，离的，样品必品必须在病初的在病初的发热期或症状典型期或症状典型时采采样，病死的，病死的动物，物，应立即采立即采样。

• 2 .合理采合理采样：根据：根据诊断断检测要求，要求，须严格按格按照照规定采集各种足定采集各种足够数量的数量的样品外，不同疫品外，不同疫病的需病的需检样品各异，品各异，应按可能的疫病按可能的疫病侧重采重采样对未能确定未能确定为何种疫病的，何种疫病的，应全面采全面采样.•3. 典型采典型采样：：选取未取未经药物治物治疗、症状、症状最典型或病最典型或病变最明最明显的的样品，如有并品，如有并发症，症，还应兼兼顾采采样• 4 .无菌采无菌采样：供病原学及血清学：供病原学及血清学检验的的样品，必品，必须无菌操作采无菌操作采样，采，采样用具、用具、容器均容器均须灭菌菌处理，尸体剖理，尸体剖检需采集需采集样品的，先采品的，先采样后后检查，以免人，以免人为污染染样品• 5. 适量采适量采样：采集：采集样品的数量要品的数量要满足足诊断断检测的需要，并留有余地，以的需要，并留有余地，以备必要必要的复的复检使用• 6 6 样品品处理理: :采集的采集的样品品应一种一种样品一个品一个容器，立即密封，根据容器，立即密封，根据样品的形状及品的形状及检验要求不同，做要求不同，做暂时的冷藏、冷的冷藏、冷冻或其或其他他处理。

供病毒学理供病毒学检验的的样品，数小品，数小时内要送到内要送到实验室，可只作冷藏室，可只作冷藏处理超过数小数小时的的应冻结处理冻结方法：方法：可将可将样品放入品放入-30-30度冰箱内度冰箱内冻结，然后再，然后再装入小冰装入小冰块或干冰冷藏瓶（箱）内运送）或干冰冷藏瓶（箱）内运送）供细菌学菌学检验或血清学或血清学检验的的样品，品，冷藏送冷藏送实验室即可•装装样品的容器品的容器应贴上上标签，，标签要要防止因防止因冻结而脱落，而脱落，标签标明采集明采集时间、地点、号、地点、号码和和样品名称并附品名称并附上上发病、死亡等相关病、死亡等相关资料，尽快送料，尽快送实验室• 7 7 安全采安全采样: : 采采样过程中，需做好程中，需做好采采样人人员的安全防的安全防护，并防止病原，并防止病原污染，尤其必染，尤其必须防止外来疫病的防止外来疫病的扩散，避免事故散，避免事故发生（二）血清（二）血清• 1.采血方法及采血量：从耳静脉（或前采血方法及采血量：从耳静脉（或前腔静脉）采血腔静脉）采血5毫升，室温放置毫升，室温放置约10分分钟（以血液完全凝固（以血液完全凝固为准），再置冰箱冷准），再置冰箱冷藏（藏（4度）度）30分分钟，此，此时，能清楚看到血，能清楚看到血清与血凝清与血凝块分离，然后分离血清，保存分离，然后分离血清，保存于于1.5--2毫升塑料离心管中，冷毫升塑料离心管中，冷冻保存待保存待检。

• 2 .编号要求：所有送号要求：所有送检样品品统一用阿拉一用阿拉伯数字伯数字1、、2、、3、、-------编号（养殖号（养殖场请保保存好原猪号与送存好原猪号与送检编号号对照表）•3. 样品品说明：所有送明：所有送检样品要求附品要求附带采采样场场名、免疫情况（免疫程序、免疫名、免疫情况（免疫程序、免疫疫苗种疫苗种类、生、生产厂、免疫厂、免疫剂量等）、采量等）、采样对象等象等详细说明材料• 4.运运输：每个养殖：每个养殖场的的样品必品必须单独密独密封于两封于两层自封口塑料袋中，粘自封口塑料袋中，粘贴单位名位名称称标签，外包一，外包一层脱脂棉后，脱脂棉后，连同采同采样单一并放入稍大一些的自封口塑料袋，一并放入稍大一些的自封口塑料袋，置于冰盒或装有冰袋的泡沫箱中迅速运置于冰盒或装有冰袋的泡沫箱中迅速运至至检测室如不能及室如不能及时送送检，，应将血清将血清冻存于冰箱中存于冰箱中（三）血液血液•1 病毒病毒检验样品：品：应在在动物物发病初体温升高期病初体温升高期间采集血液血液样品必品必须是脱是脱纤血或是抗凝血抗凝血或是抗凝血抗凝剂可可选肝肝素或素或EDTA，枸，枸橼酸酸钠对病毒有病毒有轻微毒性，一般不宜微毒性，一般不宜采用。

采血前，在真空采血管或其他容器内按每采用采血前，在真空采血管或其他容器内按每10ml血液加入血液加入0.1%肝素肝素 1ml或或EDTA20ml,从前腔静脉从前腔静脉真空采血或用注射器抽取，用量少真空采血或用注射器抽取，用量少时也可以从耳静也可以从耳静脉抽取采集的血液立即与抗凝脉抽取采集的血液立即与抗凝剂充分混合，防止充分混合，防止凝固；采脱凝固；采脱纤血液血液时，先在容器内加入适量小玻璃，先在容器内加入适量小玻璃珠，加入血液后，反复振珠，加入血液后，反复振荡，以便脱去血液，以便脱去血液纤维采集的血液采集的血液经密封后密封后贴上上标签，以冷藏状，以冷藏状态立即送立即送实验室必要时，可在血液中按每毫升加入青霉素，可在血液中按每毫升加入青霉素和和链霉素各霉素各500-1000IU，以抑制血源性或采血中，以抑制血源性或采血中污染的染的细菌 •2 细菌菌检验样品：采血品：采血应在在动物物发病初体温升高病初体温升高或或发病期，并未病期，并未经药物治物治疗期期间采集，血液采集，血液应脱脱纤获加肝素抗凝加肝素抗凝剂（或（或EDTA或枸或枸橼酸酸钠），但不），但不可加入抗生素血液密封后可加入抗生素血液密封后贴上上标签，冷藏尽快，冷藏尽快送送实验室，否室，否则须置于置于4度冰箱内做度冰箱内做暂时保存，但保存，但时间不宜不宜过久，以免溶血。

久，以免溶血•3 寄生虫及附寄生虫及附红细胞体病胞体病检验样品：因不同的血品：因不同的血液寄生虫在血液中出液寄生虫在血液中出现的的时机及部位各不相同，机及部位各不相同，因此，需要根据各种血液寄生虫的特点，取相因此，需要根据各种血液寄生虫的特点，取相应时机及部位的血液制成血涂片，送机及部位的血液制成血涂片，送实验室 （四）组织（四）组织•组织样品一般由扑品一般由扑杀动物或扑物或扑杀垂死的垂死的动物和病死尸体剖物和病死尸体剖检中采集，也可以从中采集，也可以从活活动物体内采集从尸体采物体内采集从尸体采样时，先剥，先剥去去动物胸腹部皮肤，以无菌器械将腹腔、物胸腹部皮肤，以无菌器械将腹腔、胸腔打开，根据胸腔打开，根据检验目的和生前疫病的目的和生前疫病的初步初步诊断，无菌采集不同的断，无菌采集不同的组织从活动物体采取物体采取组织样品，一般需使用特殊品，一般需使用特殊的器械•1 病毒病毒检验样品：做病毒品：做病毒检验的的组织，，必必须以无菌技以无菌技术采集，采集，组织应分分别放入放入无菌的容器内并立即密封，无菌的容器内并立即密封，贴上上标签，，放入冷藏容器立即送放入冷藏容器立即送实验室如果途中室。

如果途中时间较长，可作，可作冻结状状态运送，也可以运送，也可以将将组织块浸泡在浸泡在pH7.4左右的乳左右的乳汉液或磷液或磷酸酸缓冲肉冲肉汤保保护液内，并按每毫升保液内，并按每毫升保护液加入青霉素、液加入青霉素、链霉素霉素1000IU，然后放，然后放入冷藏瓶内送入冷藏瓶内送实验室•2 细菌菌检验样品：供作品：供作细菌菌检验的的样品，品，应新新鲜并以无菌技并以无菌技术采集，如采集，如遇尸体已遇尸体已经腐腐败，某些疫病的致病，某些疫病的致病菌仍可采集与菌仍可采集与长骨或肋骨，从骨髓骨或肋骨，从骨髓中分离中分离细菌采集的所有菌采集的所有组织应分分别放入放入灭菌的容器内或菌的容器内或灭菌的塑料菌的塑料袋内，袋内，贴上上标签，立即冷藏送，立即冷藏送实验室必要时也可以做也可以做暂时冻结送送实验室，但室，但冻结时间不宜不宜过长（五）分泌液和渗出液分泌液和渗出液• 1 分泌液和渗出液包括眼分泌液、鼻腔分泌液和渗出液包括眼分泌液、鼻腔分泌液、口腔分泌液、咽食道分泌液、分泌液、口腔分泌液、咽食道分泌液、乳汁、尿液、乳汁、尿液、脓汁、阴道（包括子汁、阴道（包括子宫和和宫颈）渗出液、皮下水）渗出液、皮下水肿渗出液、胸腔渗出液、胸腔渗出液、腹腔渗出液、关渗出液、腹腔渗出液、关节囊（腔）渗囊（腔）渗出液等。

采集出液等采集这些分泌液或渗出液些分泌液或渗出液时，，必必须无菌操作无菌操作•2 眼、口腔、鼻腔、阴道的分泌液或渗眼、口腔、鼻腔、阴道的分泌液或渗出液，以出液，以灭菌的拭子蘸取；菌的拭子蘸取；脓汁的采集，汁的采集，做病原菌做病原菌检验的的应在在药物治物治疗前采取，前采取，采集已破口的采集已破口的脓灶灶脓汁，宜用棉拭子蘸汁，宜用棉拭子蘸取；未破口的取；未破口的脓灶灶脓汁，用注射器抽取；汁，用注射器抽取；咽食道分泌物，可用食道探子从已咽食道分泌物，可用食道探子从已扩张的口腔伸入咽、食道的口腔伸入咽、食道处反复刮取；尿液反复刮取；尿液样品可在品可在动物排尿物排尿时收集，也可以用收集，也可以用导管管导尿或膀胱穿刺采集；皮下水尿或膀胱穿刺采集；皮下水肿液和液和关关节囊（腔）渗出液，用注射器从囊（腔）渗出液，用注射器从积液液处抽取抽取;•胸腔渗出液的采集，用注射器从肋胸腔渗出液的采集，用注射器从肋间刺入抽取；乳汁的采集，先将乳刺入抽取；乳汁的采集，先将乳房、乳房、乳头作清洗消毒后，用手作清洗消毒后，用手挤取取乳汁，除乳汁，除挤出的乳汁弃去，收集后出的乳汁弃去，收集后挤的乳汁• 3 所采集的各种分泌物或渗出物，所采集的各种分泌物或渗出物，立即分立即分别加入已加入已灭菌的玻璃瓶内密菌的玻璃瓶内密封，封，贴上上标签，冷藏，迅速送，冷藏，迅速送实验室。