黄酮类化合物鉴定ppt课件.ppt

第6章 黄酮类化合物--------黄黄黄黄酮类酮类酮类酮类的的的的鉴鉴鉴鉴定定定定鉴鉴 定定一、薄层色谱法〔一、薄层色谱法〔TLC〕〕二、二、 纸色谱法〔纸色谱法〔PC)一、一、 薄层色谱法薄层色谱法 普普通通采采用用吸吸附附薄薄层层，，吸吸附附剂剂大大多多用用硅硅胶胶和和聚聚酰胺〔〔1〕〕硅硅胶胶薄薄层层色色谱谱: 用用于于分分别别与与鉴鉴定定弱弱极极性性黄黄酮类化合物酮类化合物 分分别别苷苷元元常常用用展展开开剂剂：：甲甲苯苯-甲甲酸酸甲甲酯酯-甲甲酸；氯仿酸；氯仿-甲醇等 〔〔2〕〕聚聚酰酰胺胺薄薄层层色色谱谱：：分分别别含含游游离离酚酚羟羟基基的的黄黄酮苷与苷元酮苷与苷元 展展开开剂剂：：具具有有较较强强的的极极性性，，大大多多含含有有醇醇、、酸酸或水或水 如：乙醇－水〔如：乙醇－水〔3：：2〕，〕， 水水 －－ 乙乙 醇醇 －－ 甲甲 酸酸 －－ 乙乙 酰酰 丙丙 酮酮(5:1.5:1:0.5)聚酰胺薄层聚酰胺薄层(乙醇／水〕乙醇／水〕二、纸色谱法〔二、纸色谱法〔PC) PC适适于于分分别别各各种种天天然然黄黄酮酮类类化化合合物物及其苷类的混合物。

及其苷类的混合物黄酮苷：普通采用双向展开黄酮苷：普通采用双向展开 黄黄酮类酮类化合物的化合物的检识检识和构造和构造鉴鉴定定第一相展开采用醇性展开第一相展开采用醇性展开第一相展开采用醇性展开第一相展开采用醇性展开剂剂如如如如: BAW n-BuOH: HOAc:H2O=4:1:5: BAW n-BuOH: HOAc:H2O=4:1:5上上上上层层 TBA t-BuOH: HOAc: H2O=3:1:1 TBA t-BuOH: HOAc: H2O=3:1:1 水水水水饱饱和和和和n-BuOHn-BuOH层层析行析行析行析行为为: : RfRf值值: : 苷元苷元苷元苷元> >单单糖苷糖苷糖苷糖苷> >双糖苷双糖苷双糖苷双糖苷普通普通普通普通: :苷元在苷元在苷元在苷元在0.700.70以上，而苷那么小于以上，而苷那么小于以上，而苷那么小于以上，而苷那么小于0.70.7第二相展开采用水性展开第二相展开采用水性展开剂 如：如：2~6% HOAc水溶液水溶液 3% NaCl 水溶液水溶液 HOAc:浓HCl:H2O= 30: 3 : 10层析行析行为: 衔接糖接糖链越越长, Rf 越大越大(>0.5); 苷元苷元Rf较小，有的留在原点。

小，有的留在原点ABCDABCD苷元苷元苷元苷元苷元苷元苷元苷元纸色色谱 第第I向向 醇性展开剂醇性展开剂 第第II向向 水性展开剂水性展开剂〔〔BAW、、TBA、水饱和正丁醇〕、水饱和正丁醇〕 〔〔2~8%HAc、、3%NaCl、、1%HCl〕〕 正相色谱正相色谱 反相色谱反相色谱固定相〔水〕极性固定相〔水〕极性 > 流动相流动相 〔〔 有以为是吸附原理〕有以为是吸附原理〕Rf规律：极性小的化合物规律：极性小的化合物Rf大大 极性大的化合物极性大的化合物Rf大大 苷元苷元>单糖苷单糖苷>双糖苷双糖苷 Rf规律与左边相反规律与左边相反母核一样，二母核一样，二-OH>三三-OH>四四-OH>五五-OH黄酮黄酮 主要运用：苷元的分别鉴别主要运用：苷元的分别鉴别 黄酮苷及花样素类的分别鉴别黄酮苷及花样素类的分别鉴别双相色谱双相色谱纸层析〔析〔PC〕：采用双向〕：采用双向纸层析。

析苷元苷元:平面型分子平面型分子: 黄黄酮(醇醇)、、查耳耳酮的的Rf小小, 几乎留在几乎留在 原点不原点不动(Rf < 0.02);非平面型分子非平面型分子: 二二氢黄黄酮(醇醇)、二、二氢查耳耳酮的的Rf大大, 因因亲水性水性较强(Rf 0.10-0.30)层析析检查方法：方法：①①察看察看荧光光,用紫外光灯照射看到有色斑点，用紫外光灯照射看到有色斑点，NH3处置置 产生明生明显的色的色变②②用用2%AlCl3甲醇液甲醇液喷雾,UV灯下呈亮黄色灯下呈亮黄色荧光斑点习题有以下四种黄酮类化合物有以下四种黄酮类化合物A、、R1＝＝R2＝＝HB、、R1＝＝H, R2＝＝RhaC、、R1＝＝Glc, R2＝＝HD、、R1＝＝Glc, R2＝＝Rha比比较其酸性及极性的大小其酸性及极性的大小: 酸性酸性( )＞＞( )＞＞( )＞＞( ) 极性极性( )＞＞( )＞＞( )＞＞( )比比较这四种化合物在如下三种色四种化合物在如下三种色谱中中Rf值大小大小顺序序:(1)硅胶硅胶TLC(条件条件CHCl3—MeOH 4:1展开展开), Rf值( )＞＞( )＞＞( )＞＞( )(2)聚聚酰胺胺TLC(条件条件60%甲醇甲醇—水展开水展开), Rf值( )＞＞( )＞＞( )＞＞( )(3)纸色色谱(条件条件8%醋酸水展开醋酸水展开), Rf值( )＞＞( )＞＞( )＞＞( )。