蛇床子素注射液的制备及稳定性考察【临床医学论文】.doc

临床医学论文-蛇床子素注射液的制备及稳定性考察作者：高永荣 李占林 苏隽 张力 张丹参 【摘要】 目的：探讨蛇床子素注射液的处方及制备工艺并考察其稳定性方法：采用紫外分光光度计测定注射液的含量，用初匀速法考察制剂在室温 25℃下的贮存期和对强光的稳定性结果：蛇床子素注射液对光稳定性较差，在25℃下蛇床子素注射液贮存期为 198 年结论：本品制备方便，工艺可行，稳定性试验符合 Arrhenius 指数规律关键词】 蛇床子素；注射液；稳定性【ABSTRACT】 Objective: To study the preparation and stability of osthole injection. Methods:The UV method was used for the determination of content and prediction of expiry was studied by initial average rate methods at room temperature（25℃）.The stability under stronglight was investigated as well. Results:The stability is poor under the condition of stronglight,the expiry term predicted at 25℃ is 198 year. Conclusion:The preparation procedure of the injection is simple, convenient. The stability test was in consistent with Arrhenius exponent rule and convenient.【KEY WORDS】 Osthole; Injection; Stability蛇床子为伞形科植物蛇床 Cnidium monnieri（L.）Cuss.的干燥成熟果实。

八十年代以来，国内外研究发现蛇床子有较多药理作用蛇床子主要有效成分为数种香豆素类化合物，其中蛇床子素（化学名为 7 甲氧基 8 异戊烯基香豆素，甲氧基欧芹酚，osthole，分子式 C15H16O3；分子量 24429）含量最高，约占08%左右，约占总香豆素的 60%，蛇床子素难溶于水，临床应用主要为外用复方制剂，为扩大其临床应用范围，我们研制了蛇床子素注射液(2ml：2mg)，并对该制剂的处方、制备工艺、质量标准及稳定性进行了研究　　1 材料与方法1.1 仪器与试剂 TU1800S 紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）； sartorius BS210S 电子天平（德国），电热恒温水浴锅（北京医疗设备厂）；蛇床子素（购自南京药物研究所植化室，纯度为 99%）；所用辅料均符合药用规定1.2 方法1.21 处方 蛇床子素 1g，复合溶剂：水乙醇甘油（80∶8∶12）加至1000ml，用 10%枸橼酸调 pH 值至 35～401.22 制备工艺 取蛇床子素，用少量乙醇溶解后，加复合溶剂（少量乙醇应计算在内），搅拌均匀，定容用 10%枸橼酸调 pH 值至 35～40。

065μm微孔滤膜过滤，在 100 级洁净条件下灌装，100℃流通蒸汽灭菌 30min，即得，本品为淡黄色澄明液体1.23 含量测定1.231 测定波长的选择 精密称取蛇床子素标准品 25mg 于 25ml 容量瓶中，用无水乙醇定容，摇匀得标准溶液，精密量取 10ml 置 100ml 容量瓶中，加无水乙醇至刻度，制成 10mg・ L1 的溶液以无水乙醇为空白，于 200～400nm 波长范围内扫描，可见在 322nm 处有最大吸收，而复合溶剂在 200～500nm 之间无吸收峰，对测定无干扰因此选择 322nm 为含量测定的检测波长1.232 标准曲线制备 精密量取标准溶液 02，04，06，08，10，12ml 至100ml 量瓶中，加无水乙醇至刻度，同法操作，在 322nm 波长处测定吸收度，得到标准曲线方程：A=00629C+00077 (r=09998)，蛇床子素的浓度在 2～12mg・ L-1 范围内线性关系良好1.233 精密度试验 取 6mg・ L-1 的供试品溶液在 8h 内每隔 1h 测定 1 次，得 RSD 为 015%(n=8)　　1.234 加样回收率试验 精密量取蛇床子素标准溶液 02，06，12ml(1g・ L-1)于 100ml 量瓶中，按处方加复合溶剂和 10%枸橼酸至全量，在 322nm 处测定吸收度并代入回归方程，计算加样回收率，3 个浓度分别为10064%、9959%、10035%，相对标准偏差 RSD 分别为 047%、069%、114%(n=3)。

1.235 含量测定 精密量取样品溶液 1ml 至 100ml 量瓶中，加无水乙醇至刻度，摇匀，在 322nm 波长处测定吸收度，按回归方程，计算样品含量2 稳定性试验21 强光照射试验[1] 将本品在照度为（4000±500）Lx 条件下放置10d，观察各项指标，结果见表 1表 1 强光照射试验结果（略）22 有效期预测采用初匀速法[2] ，将已灭菌的蛇床子素注射液测定初浓度后，分成 7 组，每组 10 支，然后分别装于 7 个 100ml 容量瓶中（容量瓶中加入适量的水），分别置于 60℃，65℃，70℃、75℃，80℃，85℃，90℃恒温水浴锅中，分别加热 12，11，10，9，8，7，6h，立即取出，迅速冷却，终止分解，用水稀释，测定含量，结果见表 2蛇床子素注射液在不同温度下分解的初匀速 V0,可根据公式 V0=(C0-C)/t 求得，C0 为药物的起始浓度，C 为药物加温后测得的浓度，t 为药物加温的持续时间计算所得不同温度下的初匀速，用 lgV0 对开尔文温度的倒数（1/T）回归，得符合 Arrhenius 指数规律的直线方程，由此计算室温贮存期因为不用求 K，所以不必知道反应级数。

表 2 不同温度下蛇床子素注射液加速分解表（略）　　其直线回归方程为：lg[(C0C)/t]=144951156874058/T，相关系数|r|=09949由此方程推至室温（25℃）贮存期即计算 T=2982K、残存率为 90%时的时间 t，得 t09(25℃)=198 年3 讨论31 中药注射剂是国家严格管理、重点发展的剂型，本文初步探讨了蛇床子素注射液的制备及稳定性，按照注册管理办法规定还需制订指纹图谱检测标准及进行临床研究，所以还需深入研究32 经典恒温法预测药物贮存期需要在若干个较高温度下，测定各温度下的速度常数，方法虽然准确，但工作量大，费时间采用初匀速法预测药物稳定性，因每个加速温度只需在反应初阶段取样分析一次，较经典恒温法实验工作量及数据处理工作量均大大减少，故方法简便、快速初匀速法反应时间间隔要求尽量短，只要分析方法能明显分辨出浓度的变化，分析误差在 5%以内即可温度越高，分解反应速度越快，这个时间间隔就越小33 蛇床子素属内酯结构，易水解和氧化，在处方筛选中，使用多元羟基化合物（枸橼酸、甘露醇、山梨醇等）和蛋氨酸，并将 pH 调节至 40 左右，可阻止水解和氧化，效果比较理想。

如果 pH 值高于 50，则内酯几乎全部水解而损失34 从实验结果可见本品分解速度与温度有关另外在强光照射下，含量迅速下降，淡黄色加深，故建议本品贮存于阴凉处并且避光保存参考文献1 王璐璐,郑稳生.盐酸地尔硫卓注射液的制备及稳定性考察[J].中国医院药学杂志,2003,23(5):2722742 柏干荣,韦宏.氟哌酸滴眼液稳定性的研究[J].中国医院药学杂志,1993,13(5):196198。