黄连中盐酸小檗碱的提取分离及鉴定.docx

实验七 黄连中盐酸小檗碱的提取分离及鉴定黄连为毛茛科黄连属植物黄连(coptis chinensis Eraneh)、三角 叶 黄 连 ( coptis deltoidca C ． Ycheng et Hsiao ) 或 云 连 (coptiteetoidesC.Ycheng)的干燥根茎黄连具有清热燥湿、清心除烦，泻火解毒的功效 黄连的有效成分主要是生物碱，已分离出的主要生物碱有小檗碱(berberine)、掌叶防己碱(palmatine)、黄连碱(jatrorrhizine)等 其中小檗碱含量最高，可达 10%左右，是以盐酸盐的状态存在于黄连 中小檗碱有很强的抗菌作用，已广泛地应用于临床，掌叶防己碱也 作药用，其抗菌性能和小檗碱相似［目的要求］1．学习和掌握水溶性生物碱的提取方法2．学习和掌握生物碱的柱色谱分离方法 3．学习和掌握生物碱的化学检识及薄层色谱的鉴定方法［实验原理］小檗碱为黄色针状结晶，mp为145°C，游离的小檗碱能缓缓溶于 水(1：20)及乙醇中(1：100)，易溶于热水及热醇，难溶于乙醚， 石油醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂，其盐在水中溶解度很小，尤其是 盐酸盐盐酸盐为l： 500,枸橼酸盐1： 125，酸性硫酸盐1： 100, 硫酸盐 l： 30，但在热水中都比较容易溶解。

小檗碱常以季铵碱形式存在，碱性强(pka11.53),能溶于水中， 其水溶液有三种互变形式OCH季铵式（红棕色）醛式（黄色）OCH3OCH30叫OCH3O醇式（黄色）OCH3OCH3 小檗碱（黄连素）掌叶防己碱又称巴马亭，为黄色结晶，溶于水、乙醇、几乎不溶于 三氯甲烷、乙醚等有机溶剂盐酸掌叶防已碱为黄色针状结晶，并有 强烈的黄色荧光易溶于热水或热乙醇，在冷水中的溶解度也比盐酸 小檗碱大掌叶防己碱H3COH3COOCH3OCH3本实验是利用小檗碱和掌叶防己碱的硫酸盐在水中溶解度大的性 质，用硫酸水提取出来总生物碱，再利用其盐酸盐难溶于水及盐析作 用，使生物碱盐析出，以除去水溶性杂质再利用两种生物碱极性不 同，采用柱色谱分离［实验内容］一、提取分离黄连粗粉50g加 0.3%H2S04500ml,浸渍 20 分钟煎煮30分钟，滤过药渣滤液加石灰乳调PH值至中性放置10分钟，抽滤滤液加HCl调PH2〜3加滤液体积4〜5%的NaCI,放置30分钟，抽滤沉淀 滤液(主要含小檗碱、掌叶防己碱、黄连碱等生物碱)卄 加200ml水加热至澄明趁热抽滤滤液［放置、抽滤 沉淀二、生物碱类检识1．化学检识：(1) 丙酮加成反应:取样品0.05g,溶于50ml热水中，加入10% NaOH溶液2ml，混合均匀后，于水浴中加热至50°C,加入丙酮5ml, 放置，即有柠檬黄色结晶析出。

此反应可用于原小檗碱型季铵生物碱 的鉴别2) 漂白粉显色反应：小檗碱酸性水溶液中加漂白粉(或通入氯 气)，溶液即变樱红色2．薄层色谱检识吸附剂：硅胶 G 对照品：盐酸小檗碱甲醇溶液 样品： 不同色带的甲醇溶液展开剂：CHCI3-MeOH-冰 HAc (7： 1： 2)检视：先在紫外灯光(365nm)下观察荧光，再喷改良碘化铋钾 试剂［实验说明及注意事项］1 ．以硫酸盐代替盐酸盐，可增加生物碱的浸出量2.盐析最佳用量为4〜5%［思考题］1 ．根据小檗碱的性质，除用硫酸水溶液提取外，尚可用哪些提取 方法？请设计一个提取工艺流程2．掌握根据化合物结构及色谱条件推测不同化合物的 Rf 值的方 法在本实验色谱条件下，请比较小檗碱和掌叶防己碱极性及Rf值3．查阅文献：黄连中总生物碱含量测定。