玉米副产物中玉米赤霉烯酮的ELISA测定_图文.doc

堂丕盐董;墨鲞型壁塑主至鲞壹墨堕塑丝垦坠!兰垒型查1.3.4测定过程试剂盒平衡至室温用一抗稀释液1.5ml将一抗浓缩液配制成工作溶液:用酶标二抗稀释液5.O m1将酶标二抗浓缩液配制成工作溶液配制好洗涤液插入一定数量的酶标板于反应支架上标记标准品孔和样品孔,标准品孔中加入50斗1ZEN的系列标准溶液,样品孔中加入50¨1的样品待测液,再在每孔中加入一抗工作溶液50¨l,充分混匀,37cc恒温箱中孵育60min将微孔中反应液倒掉,拍干洗涤液洗涤3次(2mi“次,拍干各孔中加入100“1的酶标二抗工作液,充分混匀,37℃恒温箱中孵育30min将微孔中反应液倒掉,拍干洗涤液重复洗涤5次(2min/次,拍干各孔中分别加入50斗l的基质液和50¨l的显色剂,37cc显色15min最后各孔中加入50仙l终止液,并在酶标仪450nm波长处测定各孔吸光度值1.3.5标准曲线的绘制以1.3.3配制成的标准系列溶液浓度的对数值为横坐标,吸光度A/A比值为纵坐标,A为吸光度值,A0为0斗g/1浓度的吸光度值,绘制标准曲线(见图1lgC图1ZEN标准曲线2测定结果与讨论2.1线性范围及灵敏度由图1标准曲线可以看出,ZEN标准品在0~20.0斗妒时有良好的线性关系,r=一0.99l8线性回归方程y=一O.3682x+0.7276(见表1。

当抑制率(1一A/Ao>O.20时的最低浓度即为灵敏度由表1可以看出1.0¨g/l 为灵敏度表l各标准浓度测得的吸光度值及比值鎏壁曼!些鲤2堕堂壁堡咝堂壁些笪型鱼l丝2 O1.6421000.51.45288.431.01.22074.302.50.95558.165.O O.73744.8810.O O.54833.372.2玉米及其副产物经不同样品处理后测定结果随机取五类玉米副产物各1例.按12样品处理方法分别测定ZEN,另取玉米1份同样进行测定,结果见表2其中玉米、玉米麸和玉米胚芽粕的测定中,两种方法结果差异不大,其相对标准差为3.7%、11.2%和1.7%:其它副产物的测定结果差异较大相对标准差分别为34.4%、39.2%和60.9%2.3回收率试验(见表3选玉米酒精糟、玉米蛋白粉及玉米蛋白饲料样品各1例,10.O g中分别加入0.5×103、1.O×103和2.5×103 ng的ZEN标准品按1.3.2样品处理方法b测定,每份做2个平行,同时测定样品空白,并计算回收率表2玉米及其副产物经不同样品处理后,ZEN测定结果(斗∥kg试样名称样品处理a样品处理b测定结果平均值测定结果平均值玉米酒精糟550.15￣486.24519.25220.03~198.35206.39玉米蛋白粉812.62—753.65784.16413.59卅68.97443.86玉米蛋白饲料767.21—814.42791.70502134—456.24481.70玉米胚芽粕638.66~725.13683.15643.43~689.71666.8l 玉米麸112.54—127.55120.0495.40~109.64102.28玉米6.89￣7,387.176.54~7.026.79表3回收率试验结果 玉米副产物中玉米赤霉烯酮的ELISA测定作者:张东升, 王虎, 蔡建荣, 蔡正森作者单位:张东升,蔡建荣,蔡正森(江苏省微生物研究所,214063,江苏省无锡市, 王虎(新希望集团中心化验室刊名: 饲料工业英文刊名:FEED INDUSTRY年,卷(期:2008,29(1被引用次数:0次参考文献(17条1.李季伦玉米赤霉烯酮的研究 1980(012.孟繁静玉米赤霉烯酮的研究(续 1981(023.刘建中猪玉米赤霉烯酮中毒的研究进展 1999(014.单妹玉米赤霉烯酮对家畜繁殖性能和人体健康的影响[期刊论文]-中国畜牧兽医 2006(015.耿春银玉米副产物的饲用价值[期刊论文]-吉林畜牧兽医 2005(106.Shotwell O L De termination of zearalenone in co rn:Co llaborative Study 1976(037.罗雪云小麦、小麦制品及玉米中玉米赤霉烯酮的薄层色谱测定 19938.Mirocha C J Detection and quantitation of zearalenone in Maize and Barley 1974(059.隋凯免疫亲和柱-高效液相色谱法检测中的玉米赤霉烯酮[期刊论文]-中国卫生检验杂志 2006(0610.田苗单克隆免疫亲和柱-高效液相色谱法测定玉米中的玉米赤霉烯酮[期刊论文]-冷饮与速冻食品工业2003(0211.陈新建玉米赤霉烯酮的直接酶联免疫分析 1989(0512.王景琳竞争间接ELISA检测谷物饲料中的玉米赤霉烯酮[期刊论文]-中国兽医学报 1994(0213.GB 13078.2-2006.饲料卫生标准饲料中赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮的允许量14.GB/T 19540-2004.饲料中玉米赤霉烯酮的测定15.王海修玉米及玉米加工品中的真菌毒素[期刊论文]-吉林粮食高等专科学校学报 2005(0116.王景琳玉米赤霉烯酮单克隆抗体和免疫酶技术研究 1994(0417.角田广.辰也高司.上野芳夫.孟昭赫.孙玉书禾谷镰刀菌、真菌毒素图解 1983本文链接:。