实验六 家兔离体小肠平滑肌生理特性及药物作用的观察

1、离体小肠平滑肌生理特性及药物离体小肠平滑肌生理特性及药物 作用的观察作用的观察 遵义医学院遵义医学院 药理学教研室药理学教研室 实验目的实验目的 1学习一种离体组织器官实验方法。学习一种离体组织器官实验方法。 2观察乙酰胆碱、阿托品、去甲肾上腺素、酚妥拉明、观察乙酰胆碱、阿托品、去甲肾上腺素、酚妥拉明、 Ca2+、温度、酸碱度等对离体小肠平滑肌的作用。、温度、酸碱度等对离体小肠平滑肌的作用。 3观察并分析平滑肌活动的生理特性及理化环境改变观察并分析平滑肌活动的生理特性及理化环境改变 对它的影响。对它的影响。 兴奋性较低，收缩缓慢。兴奋性较低，收缩缓慢。 自动节律性，但频率慢且节律不稳定。自动节律性，但频率慢且节律不稳定。 紧张性。紧张性。 较大伸展性。较大伸展性。 对电刺激不敏感，但对机械牵张、温度和化学刺激对电刺激不敏感，但对机械牵张、温度和化学刺激 特别敏感。特别敏感。 1.1.消化道平滑肌的生理特性消化道平滑肌的生理特性 实验原理实验原理 Ach（）（）运动、分泌运动、分泌 2. 2. 消化道的神经支配消化道的神经支配 内在神经内在神经 （壁内神经丛）（壁内神经丛） 肌间神经丛肌

2、间神经丛 粘膜下神经丛粘膜下神经丛 消化道腺体分泌、肠内物消化道腺体分泌、肠内物 质吸收、局部血流控制质吸收、局部血流控制 控制消化道运动控制消化道运动 外来神经外来神经 NA（）（）运动、分泌运动、分泌 交感神经交感神经 副交感神经副交感神经 激动激动受体受体抑制肠道平滑肌收缩抑制肠道平滑肌收缩 激动激动M受体受体兴奋肠道平滑肌收缩兴奋肠道平滑肌收缩 实验原理实验原理 家兔家兔 体重？体重？Kg Kg 雌雌/ /雄雄 实验动物实验动物 实验材料实验材料 1. 1. 器材器材 恒温平滑肌槽、恒温平滑肌槽、BLBL- -420N420N系统、张力换能器、手术剪、眼科剪、系统、张力换能器、手术剪、眼科剪、 眼科镊、小烧杯、污物杯、平皿、丝线眼科镊、小烧杯、污物杯、平皿、丝线 2.2.试剂和药品试剂和药品 台氏液、台氏液、0.010.01去甲肾上腺素溶液、去甲肾上腺素溶液、0.010.01乙酰胆碱溶液、乙酰胆碱溶液、 0.010.01阿托品溶液、阿托品溶液、0.1%0.1%酚妥拉明溶液、酚妥拉明溶液、0.01%0.01%盐酸溶液、盐酸溶液、 1010- -3 3M M氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液

3、 实验步骤实验步骤 2）内部）内部4个小槽均个小槽均 添加添加台氏液台氏液； 1.1.准备工作准备工作 1.1.准备工作准备工作 1）外面大槽中添）外面大槽中添 加加自来水；自来水； 3）调节温度至）调节温度至 38，加热，备用。，加热，备用。 实验步骤实验步骤 2.2.标本制备标本制备 2.2.标本制备标本制备 1）取十二指肠及其邻近上）取十二指肠及其邻近上 段小肠（约段小肠（约20-30cm），温），温 热台氏液洗净肠管内容物。热台氏液洗净肠管内容物。 2）将肠段分为）将肠段分为10段（段（菱形菱形），）， 每段约每段约3-4cm，每组取一段，每组取一段 至于至于温热台氏液温热台氏液中。中。 实验步骤实验步骤 3.3.仪器的连接与设置仪器的连接与设置 3.3.仪器的连接与设置仪器的连接与设置 1）两端用细线结扎，一端系于通）两端用细线结扎，一端系于通 气管的挂钩上，另一端与张力换能气管的挂钩上，另一端与张力换能 器相连。器相连。 2）启动计算机，在“实验模块”中）启动计算机，在“实验模块”中 选择选择“消化消化”中中“消化道平滑肌生理消化道平滑肌生理 特性特性”项，调节参数，开始记

4、录项，调节参数，开始记录。 实验步骤实验步骤 4.4.观察项目观察项目 4.4.观察项目观察项目 1）自动节律收缩）自动节律收缩 1）自动节律收缩）自动节律收缩 2）观察胆碱能受体激动剂及其阻断剂对肠段收缩的影响）观察胆碱能受体激动剂及其阻断剂对肠段收缩的影响 乙酰胆碱乙酰胆碱；阿托品后乙酰胆碱阿托品后乙酰胆碱 2）观察胆碱能受体激动剂及其阻断剂对肠段收缩的影响）观察胆碱能受体激动剂及其阻断剂对肠段收缩的影响 乙酰胆碱乙酰胆碱；阿托品后乙酰胆碱阿托品后乙酰胆碱 3）观察肾上腺素能受体激动剂及其阻断剂对肠段收缩的影响）观察肾上腺素能受体激动剂及其阻断剂对肠段收缩的影响 去甲肾上腺素去甲肾上腺素；酚妥拉明后去甲肾上腺素酚妥拉明后去甲肾上腺素 3）观察肾上腺素能受体激动剂及其阻断剂对肠段收缩的影响）观察肾上腺素能受体激动剂及其阻断剂对肠段收缩的影响 去甲肾上腺素去甲肾上腺素；酚妥拉明后去甲肾上腺素酚妥拉明后去甲肾上腺素 4）观察氯化钙对肠段收缩的影响）观察氯化钙对肠段收缩的影响 无钙台氏液无钙台氏液 4）观察氯化钙对肠段收缩的影响）观察氯化钙对肠段收缩的影响 无钙台氏液无钙台氏液 5）观察温

5、度对肠段收缩的影响）观察温度对肠段收缩的影响 室温台式液室温台式液 5）观察温度对肠段收缩的影响）观察温度对肠段收缩的影响 室温台式液室温台式液 6）观察酸碱度对肠段收缩的影响）观察酸碱度对肠段收缩的影响 盐酸后氢氧化钠盐酸后氢氧化钠 6）观察酸碱度对肠段收缩的影响）观察酸碱度对肠段收缩的影响 盐酸后氢氧化钠盐酸后氢氧化钠 截图截图 并清并清 洗洗3 遍遍 实验步骤实验步骤 4.4.观察项目观察项目 4.4.观察项目观察项目 1）自动节律收缩）自动节律收缩（第第1张图张图） 1）自动节律收缩）自动节律收缩（第第1张图张图） 2）观察胆碱能受体激动剂及其阻断剂对肠段收缩的影响）观察胆碱能受体激动剂及其阻断剂对肠段收缩的影响 乙酰胆碱乙酰胆碱（第第2张张图图） ；阿托品后乙酰胆碱阿托品后乙酰胆碱（第第3张张图图） 2）观察胆碱能受体激动剂及其阻断剂对肠段收缩的影响）观察胆碱能受体激动剂及其阻断剂对肠段收缩的影响 乙酰胆碱乙酰胆碱（第第2张张图图） ；阿托品后乙酰胆碱阿托品后乙酰胆碱（第第3张张图图） +乙酰胆碱乙酰胆碱 截图并截图并 清洗清洗3遍遍 +阿托品阿托品 不洗不洗 +乙酰胆碱乙酰

6、胆碱 截图截图 并清并清 洗洗3 遍遍 实验步骤实验步骤 4.4.观察项目观察项目 4.4.观察项目观察项目 +去甲肾上腺素去甲肾上腺素 截图并截图并 清洗清洗3遍遍 +酚妥拉明酚妥拉明 不洗不洗 +去甲肾上腺素去甲肾上腺素 3）观察肾上腺素能受体激动剂及其阻断剂对肠段收缩的影响）观察肾上腺素能受体激动剂及其阻断剂对肠段收缩的影响 去甲肾上腺素去甲肾上腺素（第第4张张图图）； 酚酚妥拉明后去甲肾上腺素妥拉明后去甲肾上腺素（第第5张张图图） 3）观察肾上腺素能受体激动剂及其阻断剂对肠段收缩的影响）观察肾上腺素能受体激动剂及其阻断剂对肠段收缩的影响 去甲肾上腺素去甲肾上腺素（第第4张张图图）； 酚酚妥拉明后去甲肾上腺素妥拉明后去甲肾上腺素（第第5张张图图） 截图截图 并清并清 洗洗3 遍遍 实验步骤实验步骤 4.4.观察项目观察项目 4.4.观察项目观察项目 4）观察氯化钙对肠段收缩的影响）观察氯化钙对肠段收缩的影响 无钙台氏无钙台氏液液 （第第6张图张图） 4）观察氯化钙对肠段收缩的影响）观察氯化钙对肠段收缩的影响 无钙台氏无钙台氏液液 （第第6张图张图） 台氏液台氏液 先恢复相对正常的

7、波形，在将先恢复相对正常的波形，在将 其中的其中的台氏液台氏液换成换成无钙台氏液无钙台氏液 无钙台无钙台氏液氏液 截截图图 保存保存 实验步骤实验步骤 4.4.观察项目观察项目 4.4.观察项目观察项目 台氏液台氏液 先恢复相对正常的波形，在将先恢复相对正常的波形，在将 其中的其中的台氏液台氏液换成换成室温台氏液室温台氏液 室温台室温台氏液氏液 5）观察温度对肠段收缩的影响）观察温度对肠段收缩的影响 室温台式室温台式液液 （第第7张图张图） 5）观察温度对肠段收缩的影响）观察温度对肠段收缩的影响 室温台式室温台式液液 （第第7张图张图） 截图截图并并 并存并存 实验步骤实验步骤 4.4.观察项目观察项目 4.4.观察项目观察项目 +HCl 不洗不洗 +NaOH 6）观察酸碱度对肠段收缩的影响）观察酸碱度对肠段收缩的影响 盐酸后氢盐酸后氢氧化钠氧化钠 （第第8张图张图） 6）观察酸碱度对肠段收缩的影响）观察酸碱度对肠段收缩的影响 盐酸后氢盐酸后氢氧化钠氧化钠 （第第8张图张图） 实验实验结束结束 后将恒温后将恒温 平滑肌槽平滑肌槽 内的液体内的液体 倒掉并倒掉并清清 洗实验槽洗实验槽 三

8、次三次以上以上 要求：共截图要求：共截图8张，有图序和图题。张，有图序和图题。 举例：举例： 1.一个处理因素的，如右图一个处理因素的，如右图 2.两个处理因素的，如下图两个处理因素的，如下图 图1.乙酰胆碱对家兔离体小肠平滑肌收缩 曲线的影响 图2.阿托品后乙酰胆碱对家兔离体小肠平滑肌收缩曲线的影响 即要有即要有 正常正常+处理因素处理因素 两部分组成两部分组成 实验结果实验结果 注意事项注意事项 1. 穿线系肠管时，速度要快，结扎牢固，应在穿线系肠管时，速度要快，结扎牢固，应在温热台氏液温热台氏液中进中进 行。行。 2. 肠管肠管勿牵拉过紧或过松勿牵拉过紧或过松，与张力换能器的连线必须垂直与张力换能器的连线必须垂直，不，不 得与浴槽管壁、通气塑料管接触，以免磨擦。得与浴槽管壁、通气塑料管接触，以免磨擦。 3. 浴槽中液体的量浴槽中液体的量以高过肠段以高过肠段为准，并为准，并保持液面高度恒定保持液面高度恒定。 4. 药物应滴在药物应滴在肠管附近肠管附近，各药用量系参考剂量，若效果不明显，各药用量系参考剂量，若效果不明显， 可以增补加药，但不可一次过多，以免引起不可逆反应。可以增补加药，但不可一次过多，以免引起不可逆反应。 5. 每次加药出现反应后，必须每次加药出现反应后，必须立即立即放掉含药液的台氏液放掉含药液的台氏液，并冲，并冲 洗洗至少三次至少三次，以免引起不可逆反应。，以免引起不可逆反应。待肠管恢复稳定活动后待肠管恢复稳定活动后， 再观察下一项目。再观察下一项目。 思考题思考题 1.哺乳动物离体器官或组织在灌流液中保持良好状态需具备哪些基哺乳动物离体器官或组织在灌流液中保持良好状态需具备哪些基 本灌流条件？本灌流条件？ 2.取肠时为什么采用击昏家兔而不在麻醉下进行？取肠时为什么采用击昏家兔而不在麻醉下进行？ 3.为什么加入各种药物会引起离体肠段活动的变化？其机理是什么？为什么加入各种药物会引起离体肠段活动的变化？其机理是什么？ 下次课内容：下次课内容：氨在肝性脑病发病中的作用氨在肝性脑病发病中的作用（第一实验室）（第一实验室） 下次课内容：下次课内容：氨在肝性脑病发病中的作用氨在肝性脑病发病中的作用（第一实验室）（第一实验室）

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