生物实验室常用试剂的配制
16页1、生物实验室常用试剂的配制 一、检验酸碱性的试剂 1.酚酞试液 取0.1酚酞,溶解在100mL6090%的乙醇溶液里,装在试剂瓶内密闭保存。酚酞试液在碱性溶液中呈红色。 2.麝香草酚酞(百里酚酞)试液 把0.1g白色的麝香草酚酞溶解在100mL90%乙醇里制得。当pH值由9.410.6时,颜色为无色至蓝色。 3.溴甲酚紫指示剂 将0.1g溴甲酚溶于9.25mL的0.02mol/L氢氧化钠溶液中,加蒸馏水稀释至250mL制得。当pH值由6.26.8时,颜色由淡黄色变为淡紫色,变色点在pH6.7。 二、定性鉴定某些物质的试剂 1.鉴定葡萄糖的试剂 (1)班氏(Benedict)试剂 a.在600mL蒸馏水中溶解173g柠檬酸钠和100g无水碳酸钠,冷却后稀释到850mL。,b.在100mL热蒸馏水中溶解17.4g无水硫酸铜。冷却后稀释到150mL。把硫酸铜溶液缓缓倒入柠檬酸钠碳酸钠溶液中,边加边搅拌,如产生沉淀。要过滤,班氏试剂配制后能长期使用。如存放较久而产生沉淀时,可取上层清液使用,不必重配。 (2)裴林氏(Fehlings Solution)试剂 a.取35g硫酸铜溶解在400mL蒸馏
2、水里,加蒸馏水到500mL。 b.取85g氢氧化钾 (或70g氢氧化钠)和175g酒石酸钾钠,溶解在400mL蒸馏水里,加水馏水到500mL。 上述两种溶液耍分别保存,使用时再等量地混和并搅拌。如溶液里有葡萄糖,加等量裴林试剂,煮沸,会产生红色的氧化亚铜沉淀。 2.鉴定淀粉用的碘液 取2g碘化钾,溶解在10mL蒸馏水中,再加1g碘,待溶解后用蒸馏水稀释到300mL。即成碘液。溶液在光亮处容易变成氢碘酸,须保存在棕色玻瓶里。因为I2,不易溶于水,当加入KI后可大大增加I2的溶解度。,3.鉴定蛋白质用的双缩脲试剂 分别配制10%氢氧化钠溶液和1%硫酸铜溶液,待用。在3毫升待测液中加入1mL10%氢氧化钠溶液和1滴1%硫酸铜溶液。如果有蛋白质,会出现紫色反应。 4.鉴定脂肪的试剂 苏丹IV溶液的配制:取0.2g苏丹IV,放入无水乙醇中,加热,使它充分溶解,成为饱和乙醇溶液。过滤后倒迸试剂瓶内密闭保存备用。苏丹溶液的配制:0.1g苏丹粉末加入95%乙醇100mL待全部溶解后便可使用。 5.鉴定DNA的二苯胺试剂 A液:1.5g二苯胺溶于1OOmL冰醋酸中,再加1.5mL浓硫酸用棕色瓶保存 B液
3、:体积分数为0.2%的乙醛溶液。 实验前,将0.1mL的B液加入到10mL的A液中,现配现用。 6.鉴定二氧化碳的试剂 (1)石灰水 取饱和石灰水澄清液,密闭瓶内备用。 (2)氢氧化钡 (Ba(OH)2) 在蒸馏水中加氧化钡。氢氧化钡遇到二氧化碳,也会生成碳酸钡白色沉淀,使溶液浑浊。,(3)溴代麝香草酚蓝溶液 取0.1溴代麝香草酚蓝,溶解在100mL蒸馏水里,滴入少量0.1%氢氧化钾溶液,使它成为碱性溶液而呈蓝色。本溶液pH值变化范围是6.0(黄)至7.6(蓝)。待测物中如有二氧化碳,会形成碳酸而使溶液变成黄色。 三、分离液 1.用于分离肌纤维的试剂 (1)马克凯郎(MaecalIum)氏液 也叫硝酸甘油溶液,取1份浓硝酸、2份甘油、2份水混合制得。适于分离横纹肌和心肌组织。 (2)30%氢氧化钾溶液或30%氢氧化钠溶液 肌肉小块浸泡时间0.5一1小时。 2.用于分离神经细胞的试剂 (1)甲醛生理盐水溶液 称取58.44g氯化钠,用蒸馏水溶解,再稀释到1000mL加入2g40%甲醛溶液,可得甲醛生理盐水溶液。这种溶液也是很好的上皮细胞分离液,既分离迅速,又能保护纤细的上皮细胞纤毛。在上
4、述溶液里,分离小肠和气管上皮组织需2小时,口腔和皮肤上皮组织需3天。,(2)硼酸生理盐水溶液 在0.75%生埋盐水中加入硼酸,使成为饱和溶液。可用来分离脊髓灰质或脑灰质部位的神经组织。 3.用于分离神经纤维的试剂 硝酸银溶液:取0.5G硝酸银,溶解在100mL水中即成。 4.用于分离植物根尖细胞的试剂 (1)盐酸乙醇溶液 在1份95%乙醇中徐徐加入1份浓盐酸,即成盐酸乙醇溶液。密闭保存。 (2)4%盐酸溶液。 5.用于细胞质壁分离的试剂 (1)30%蔗糖液;(2)5%氯化钠溶液;(3)5%硝酸钾溶液;(4)24%尿素溶液;(5)1mol/L氯化钙溶液。 四、染色剂 有些动植物组织和大多数细胞及细胞器是无色透明的,必须经染色剂染色,才能在显微镜下观察清楚,常用染色剂的制法和适用范围见122表。,五、干燥剂 干燥剂对游离水往往具有化学结合的作用,物理吸附作用或两种作用兼有。选用干燥剂应注意其本身和被干燥的物质有无化学作用,以免引起被干燥物质的破坏或吸收。常用干燥有: 1、氧化钙 (cao) 白色固体,碱性氧化物,可干燥氧、氨、氨、胺等气体,不可用来干燥酸性气体,如二氧化碳、氯化氢、硫化氢。
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