血栓与止血疾病检验技术
51页1、,血栓与止血疾病 检验技术,出血时间测定和血小板计数,血管性血友病因子,血小板膜糖蛋白测定 血小板活化分析 血小板自身抗体 血小板生存时间 血小板第3因子有效性测定,初期止血检查,初期止血的筛查试验:,血浆内皮素-1 血浆血栓调节蛋白 血浆6-酮-前列环素,血小板黏附检验 血小板聚集试验,(一)凝血酶原时间(PT) (二)活化部分凝血活酶时间(APTT) (三)凝血酶时间(TT) (四)血浆纤维蛋白原(FIB),二、二期止血的筛查试验,凝血四项,(一)凝血酶原时间(Prothrombin time,PT),钙 组织因子 脂质,含钙组织凝血活酶,(一)凝血酶原时间(Prothrombin time,PT) 原理:,F,a,F(凝血酶原),a(凝血酶),纤维蛋白原,纤维蛋白,a、PF3、Ca2+,F,a,TF,TF,Ca2+,外源凝血系统,PT试剂(组织因子、Ca2+、脂质),PT,手工法 仪器法检测的原理 光学法 电流法 粘度法,检测方法,手工法,凝固法 (磁珠法),光学法 (透射比浊法),光学法 (散射比浊法),光学法(散射比浊法),光学法(透射比浊法),凝固法(磁珠法),( 0.85
2、 1.15),(0.81.5),11 13s(3s以上为异常),( 70% 130%),组织凝血活酶,牛脑组织、兔脑组织等的抽提物 纯化的重组组织因子加磷脂 对因子、的检测灵敏度不同 试剂的活性影响PT检测的准确性 为增加PT检测结果可比性,要求PT试剂要注明国际敏感指数。,International sensitivity index(ISI) 标准品组织凝血活酶与待测组织凝血活酶PT校正曲线的斜率,标准品PT对数值,待校正PT对数值,斜率(ISI),国际敏感指数,ISI愈接近1.0 试剂愈灵敏 INR误差愈小,ISI=1.0试剂 ISI=2.0试剂 PT正常平均 12 sec 12 sec PT病人sec 24 sec 16.9 sec PT病人INR (24/12) =2.0 (16.9/12) =2.0 当系统误差是 (23/12) = 1.92 (15.9/12) =1.76 1秒时的INR (25/12) = 2.08 (17.9/12) =2.22 INR误差范围 1.92 2.08 1.76 2.22 一般选用ISI接近1的试剂,不仅可以提高PT的灵敏度,而且INR系统
3、误差也小。,比较同一口服抗凝剂病人的血浆用两种试剂测定,ISI对INR系统误差的影响,不同ISI三种报告方式的差异,为了避免结果的不可比性,所以选用INR作为口服抗凝剂监测的首选指标。,缩短 先天性FV增多 血栓前状态及血栓性疾病 DIC早期(高凝状态),临床意义:,延长 先天/获得性因子,X,V,II和Fg或无Fg(异常Fg)血症 原发/继发性纤溶亢进,抗凝物质增加,口服抗凝剂监测,口服抗凝剂,国内主要以维生素K拮抗剂(华法林),优点:在INR最佳时有效、口服、无肝素诱导血小板减少症的风险,缺点:起效缓慢、药代学不明确、与食物和药物相互作用多、需要进行凝血功能监测,口服抗凝剂监测 PT维持在正常对照值的1.52倍 PTR为1.52倍 INR为1.5 2.5,PT,方法评价: 外源凝血系统最常用的筛检试验 口服抗凝剂常用的监测指标 手工法重复性差、耗时,但操作简便,常作为参考方法与校正仪器 仪器法干扰少,标准化,快速、简便,PT,白陶土或鞣酸 脑磷脂,(二)活化部分凝血活酶时间 Activated partial thromboplastin time, APTT,钙离子,原 理,AP
4、TT,F,a,F,a,F,a,F,a,F(凝血酶原),a(凝血酶),纤维蛋白原,纤维蛋白,a、PF3、Ca2+,a、PF3、Ca2+,内源性凝血系统,白陶土或鞣酸,APTT试剂(含白陶土、硅土或鞣酸及脑磷脂),APTT,参考值 2535秒(10秒以上有意义) 临床应用 延长 除外、因子缺乏 继发性或原发性纤溶活性增强 循环抗凝物的存在 缩短 、因子活性增高 血栓前状态和血栓性疾病、DIC早期 监测肝素抗凝治疗首选指标,维持正常对照1.5 2.5倍,肝素抗凝剂,抗凝原理:与抗凝血酶结合使其结构改变,从而使抗凝血酶灭活凝血因子( a、a、a、a、a、a )的速度明显增加 起效快,注射或输注,使用普通肝素出血发生率为7%10%,血小板减少发生率为0% 5%,需要进行血小板监测,方法评价: 敏感的内源凝血系统的筛检试验,灵敏度CT 检测除、以外其他凝血因子的缺陷 特别是、的缺陷 可检出低于正常水平25%的轻型血友病 单一因子活性增高掩盖其他凝血因子缺乏 手工法重复性差、费时,但操作简便,作为参考方法并校正仪器 仪器法准确度和灵敏度较高,快速、简便、易于标准化,APTT,APTT纠正试验,凝血时
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