总结 马铃薯核转化方法
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马铃薯核转化体系材料准备: 2% MS 中（22，16h光照、8h黑暗）生长3-4 周的组培盒中的无菌苗。每个载体大约需要100个叶片。培养基配方：YEB：5g/l Beef-Extract 牛肉提取物1g/l Yeast- Extract酵母提取物5g/l Peptone蛋白胨5g/l sucrose蔗糖0.49g/l MgSO4 7H2OMG：4.31g/l MS-salt+ 16g/l glucose葡萄糖+5ml/l Vitamin mix (烟草有机）维生素混合物P1：MG+5mg/l NAA+0.1mg/l 6-BA+100mg/l Ticarcillin替卡西林+100mg/l Sulbactam sodium （舒巴坦钠）+50mg/l kana卡纳P2：MG+1.4mg/l ZR+20ug/l GA3+20ug/l NAA+100mg/l Ticarcillin+100mg/l Sulbactam sodium（舒巴坦钠） +50mg/l kanaP3：MG+Ticarcillin（替卡西林）+100mg/l Sulbactam sodium（舒巴坦钠） +50mg/l kana实验步骤：1、 在加有相应抗生素的YEB培养基上划线，28 培养两天。2、 挑取单菌落，加入到5ml 含相应抗生素的YEB 培养基中，28 200rpm 培养过夜。3、 6500rpm 离心3min，弃上清，用30ml YEB 重悬；4、 在每个培养皿中加入10ml 2% 的液体MS，取下的顶端无菌健康的叶片放入培养皿中，在叶背面穿过中央叶脉划1-2小刀。5、 再在每个平皿中加入50ul 重悬的农杆菌，轻轻摇3-5min，室温黑暗培养2-3d。6、 转入愈伤诱导培养基P1（背面朝上）上，22，光照60E左右，培养1 周之后转入选择培养基P2上。7、 与上步同一条件下培养大约1 月后开始长芽，将芽转入生根培养基P3中进行生根。
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