磁性纳米颗粒固定化酶研究
52页1、华中科技大学 硕士学位论文 磁性纳米颗粒固定化酶研究 姓名:黄平英 申请学位级别:硕士 专业:生物化学与分子生物学 指导教师:赵元弟 2011-01-20 I 华华 中 科中 科 技技 大 学 硕 士 学 位 论大 学 硕 士 学 位 论 文文 摘 要 摘 要 酶是一类具有催化功能的生物大分子,广泛存在于自然界中。酶催化反应具有 反应条件温和(生理 pH 和温度) 、易降解、催化效率高及专一性强等特点,但游离 的酶稳定性差且不能回收利用,所以近几十年来关于各种固定化酶技术和各种载体 材料的研究应运而生。固定化酶的原理是指通过一定的方法将酶固定在一定的载体 上并使其在一定空间范围内进行催化作用。 与传统的材料相比,磁性纳米颗粒是一种新型的复合材料,具有其独特的性质, 超顺磁性及良好的生物相容性,使其在生物、医药和环保领域有着广泛的应用。用 磁性纳米颗粒为载体固定化酶,可实现在外加磁场下快捷的与产物分离,使工业化 连续化生产成为可能,且分离比较彻底,简化了后续的产物分离过程;磁性纳米颗 粒比表面积大,结合位点多,固载量大,因此磁性纳米颗粒作为载体固定化酶的研 究成为生物催化领域的热点。 本
2、文介绍了以磁性纳米颗粒为载体,采用不同的固定化方法制备固定化酶。首 先用化学共沉淀法合成水溶性的磁性 Fe3O4纳米颗粒, 以此为载体用包埋法制备磁性 海藻酸钙微球固定化脂肪酶,并考察了影响固定化酶水解活性的一系列因素;然后 尝试用不同的方法在磁性 Fe3O4纳米颗粒上修饰上氨基, 以此为载体用共价结合法制 备固定化碱性蛋白酶;最后选取一种稳定性比较好的固定化酶应用于微波中催化生 物反应。 关键词关键词:酶 固定化 磁性纳米颗粒 微波 II 华华 中 科中 科 技技 大 学 硕 士 学 位 论大 学 硕 士 学 位 论 文文 Abstract Enzyme is a kind of biological macromolecules with catalytic ability and is widely found in nature. Catalysis by enzyme has been proved to offer lots of special features, such as mild reaction conditions (biological pH and te
3、mperature), biodegradation, high catalytic efficiency and strong specificity. During the past few decades, study on the immobilization technology and enzyme carriers has attracted a lot of researchers attention, because the free enzyme is unstable and can not be reused and recycled. The principle of immobilized enzyme is to immobilize the enzyme onto a special carrier to keep it in a defined space through some processes and the enzyme can still retain the catalytic ability. Magnetic nanoparticle
4、s have been widely applied in biology, medicine and environment fields due to their unique superparamagnetism and good biocompatibility. Enzyme immobilized onto magnetic nanoparticles can be separated from the solution quickly under an external magnetic field. Another advantage of magnetic nanoparticles as enzyme carriers is their large surface area and thus can provide more binding sites for enzyme immobilization. In this paper, enzyme immobilization on magnetic nanoparticles in different metho
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