霉菌细胞培养与观察实验报告
2页霉菌细胞培养与观察一、实验目的:1. 培养霉菌;2. 观察霉菌菌丝细胞结构,细胞核,细胞器;3. 观察菌丝不同部位霉菌细胞形态。二、实验材料:1, 试剂:面包,固定液(冰乙酸,甲醇),PBS缓冲液(磷酸二氢钾,氢氧化钠, 蒸馏水,PH调至7.2磷酸盐缓冲液,健那绿)蒸馏水,50%乙醇。2, 器材:载玻片,盖玻片,镊子,培养皿,吸水纸,吸管,光学显微镜三、原理:霉菌是形成分枝菌丝的真菌的统称,不是分类学的名词,霉菌细胞具1至多个细胞核。 细胞壁分为三层:外层无定形的0葡聚糖(87nm);中层是糖蛋白,蛋白质网中间填充葡聚 糖(49nm);内层是几丁质微纤维,夹杂无定形蛋白质(20nm)。构成霉菌体的基本单位称为菌丝,呈长管状,宽度210微米,可不断自前端生长并分 枝。在固体基质上生长时,部分菌丝深入基质吸收养料,称为基质菌丝或营养菌丝;向空中 伸展的称气生菌丝,可进一步发育为繁殖菌丝,产生孢子。大量菌丝交织成绒毛状、絮状或 网状等,称为菌丝体。菌丝体常呈白色、褐色、灰色,或呈鲜艳的颜色(菌落为白色毛状的 是毛霉,绿色的为青霉,黄色的为黄曲霉),有的可产生色素使基质着色。霉菌繁殖迅速,常 造成食品、用具大量霉腐变质,但许多有益种类已被广泛应用,是人类实践活动中最早利用 和认识的一类微生物。霉菌菌丝一般为颜色鲜艳,且菌丝为单层细胞,故可直接用于观察其显色结构、细胞壁, 染色后可观察其细胞器。四、操作步骤:1. 霉菌的培养:一般的霉菌,将面包放置在30C左右,湿度在75%以上,两至三天即可产生黄曲霉菌。2, 制片观察:在载玻片上加一滴蒸馏水,用解剖针从霉菌菌落边缘处挑取少量已产孢子的霉菌菌丝, 先置于50%乙醇中浸一下以洗去脱落的孢子,再放在载玻片上的液滴中,用解剖针小心地 将菌丝分散开。(注意:挑菌和制片时要细心,尽可能保持霉菌自然生长状态;加盖玻片时 勿压入气泡,以免影响观察。)在低倍镜下找到霉菌细胞,移到视野中央,切换至高倍镜观 察。3. 观察不同部位细胞:从霉菌菌落距中心距离不同处取样,同步骤2,观察。五. 预期效果:两至三天即可产生真菌菌落。显微镜可观察到一个细胞中有23个细胞核。
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