乳腺癌患者淋巴细胞功能相关抗原表达水平的临床研究【临床医学参考论文开题报告】.doc

临床医学论文•乳腺癌患者淋巴细胞功能相关抗原表达水平的临床硏究内容提要 目的：探讨乳腺癌患者血、癌组织、引流淋巴结中淋巴细胞功能相关 抗原cdlla、cdl8、cd54蛋白表达水平及化疗和中药益气养血冲剂对其表达水平 的影响方法：免疫组化法和流式细胞术检测乳腺癌患者血、癌组织、引流淋巴 结中cdlla、cdl8、cd54蛋白表达水平在化疗前、后和化疗加服益气养血冲剂后 的改变结果：乳腺癌患者血中cd54水平与良性对照组比较明显增高，癌组织 淋巴细胞cdlla、cdl8、cd54水平明显增高，乳腺癌细胞cd54表达阳性率100%， 阴性淋巴结cdlla、cdl8、cd54表达水平明显高于阳性淋巴结结论：乳腺癌患 者粘附分子水平明显异常，免疫粘附功能障碍，化疗在杀伤癌细胞的同时，对机 体免疫功能产生不良影响，益气养血冲剂能够改善化疗后乳腺癌患者淋巴细胞粘 附功能等细胞免疫功能淋巴细胞功能相关抗原(1 ymphocytcfunct ionassociatcdant igen-1, lfa-1) 是一种膜蛋白分子，是由a (cdlla，180kd)和0(cdl8，95kd)两条多肽链组成的 异二聚体(1)。

cd54亦称细胞间粘附分子(intercellularadhesionmolecule-1 , icam-1)为单链糖蛋白，是的配基它们共同构成整合蛋白的重要组成部 分，与肿瘤免疫密切相关，但其在乳腺癌发生、发展中发挥了怎样的作用，药物 治疗对其有何影响，目前尙不清楚，本硏究就这些问题进行了初步探讨资料和方法1临床资料本硏究选择天津医科大学附属肿瘤医院乳腺科收治的72例 乳腺疾病患者，皆为女性，均经切除及病理检查证实在全部病例中有乳腺癌 64例，年龄36〜68岁，中位年龄47岁；病理类型均为浸润性非特殊型癌，且 伴腋淋巴结转移，其中单纯手术组18例，年龄38〜68岁，中位年龄49岁；术 前无化疗和中药治疗；化疗组16例，年龄38〜65岁，中位年龄45岁；先cmf 方案化疗4周后再手术；化疗加服中药组30例，年龄36〜68岁，中位年龄46 岁；先化疗同时服中约4周后再手术；良性对照组8例，年龄37〜58岁，中位 年龄44岁；单纯行乳腺局部切除术2治疗方法 化疗治疗方案：采用cmf方案，环磷酰胺(ctx)600mg，氟腺 W(5-fu)500mg，氨甲碟n^(mtx)20mg，3药联合，每周］次，加在5%葡萄糖注 射液中静脉滴注，共4周。

中药治疗方案：益气养血方剂组成：黄罠30g党参 20g当归20g女贞子20g丹参20g山茱萸15g仙灵脾15g，制成颗粒冲 剂，每日3次，每次1袋，每袋鬼，连续服药4周3测定项目和检测方法3.1标本采集 手术当日清晨采集患者全血5泊，分离淋巴细胞，置4%甲 醛中备用；同时术中取患者癌组织和引流淋巴结，癌组织立即置液氮中备用；引 流淋巴结立即分离淋巴细胞，置4%甲醛中备用在对各组引流淋巴结的检测硏 究吋，根据病理腋淋巴结转移与否，将单纯手术组的同一患者引流淋巴结分为有 转移淋巴结(阳性)和无转移淋巴结(阴性)两组分别进行硏究，以便对比而对于 化疗组和化疗加中药组则只选择有转移淋巴结进行硏究3.2血和引流淋巴结淋巴细胞cdlla、cdl8、cd54流式细胞术(fem)检测 抗体购自法国国际免疫试剂公司(immimotech)首先分离血、引流淋巴结淋巴细 胞，然后采用免疫荧光直接标记法制备抗原fem检测方法：使用美国bd公司 生产的facs420型流式细胞仪，测量数据输入hp-300consort30计算机，并用免 疫系统软件程序进行资料处理，检测速度为每秒钟1000个细胞，以鸡红细胞作 为标准样品，调整仪器cv値为5.0%以内。

3.3癌组织淋巴细胞cdl la、cdl8、cd54免疫组化检测 冰冻标本切4“m 厚片，abc法染色，cdl la、cd54单抗购自zymed公司，cd 18单抗购自军事医学 科学院，ii抗和abc复合物购自vector公司观察方法：(1)在装有目镜网格测 微尺(80x80s)的400倍视野卜-计数每例切片淋巴细胞的阳性细胞密度(细胞数 /0.05mm2)⑵在装有目镜网格测微尺(冋上)的400倍视野下随机计数8个网格 内的阳性细胞和阴性细胞数 胺阳性细胞数/总细胞数X100%计算出每例切片中阳 性细胞百分比，并将其分为4个等级：—：无阳性细胞；+ :阳性细胞<30% ； + + :阳性细胞30%〜60% ； + + + ：阳性细胞>60%4统计学处理 应用sas统计软件进行无2检验、t检验、方差分析和直线 相关分析结果1各组患者血中cdlla vdl8 B54检测结果见表1孕L腺癌患者血中cdlla、 cdl8水平与良性对照组比较无显著性差异(p〉0.05)；乳腺癌患者血中cd54水 平明显高于良性对照组(p<0.05):化疗后患者血中cdlla、cdl8、cd54水平与 单纯手术组比较均明显降低'化疗加中药治疗组患者血中cdlla、cdl8、cd54 水平均明显高于化疗组(p<0.05)。