玉米浆检验操作规程.docx

玉米浆检验操作规程一、 目 的：建立玉米浆检验操作规程，使QC检验员按本方法检验二、 适用范围：适用于玉米浆的检验三、 责任者：QC检验员四、 正 文：【性状】目测法 棕褐色粘稠、无异味液体鉴别】取本品少量加盐酸，加热水解后并调至中性，加入茚三酮试液应显红色 【检查】溶解磷1原理各种含磷有机物经过酸的水解，使有机磷消化成为无机磷，无机磷在酸性条件下，与 钼酸盐(常用的有钼酸氨或钼酸钠)反应生成磷钼酸盐络合物，如：2HP0+24 (NH ) MoO+21HSO —► 2 (NH ) PO ・12MoO+21 (NH ) SO +24H O3 4 4 2 4 2 4 4 4 3 4 2 4 2然后用还原剂处理钼酸盐络合物，使络合物中钼从高价(Mo6+ )部分还原成低价(Mo4+),低 价的钼再与试剂中其他Mo2-络合成为Mo(MoO)或MoO,呈蓝黑色，称钼蓝，其颜色的深浅，4 2 3 8在一定范围内，与磷含量成正比关系，根据比尔定律，即可应用分光光度计进行磷的定量 测定2 仪器与设备2.1 分光光度计2.2离心机2.3水浴锅(恒温)题 目玉米浆检验操作规程编码：TSIII-01800页页2 7 第共2.4 刻度吸管：1ml， 2ml,5ml2.5 容量瓶：25ml,50ml,100ml,1000ml2.6高温炉3试剂及其配制3.1磷试剂I (钼酸氨溶液)3.1.1称取10 g钼酸氨溶于100ml纯化水中3.1.2量取150ml浓硫酸加到100ml水中，冷却后，将3. 1. 1与3. 1. 2两溶液合 并，混匀，装于棕色瓶中。

3.2磷试剂II（Metol溶液）3.2.1称取0.2gMetol （对一甲氨基苯酚硫酸盐），1g无水亚硫酸钠溶于少量水中（约 50ml）,假如4g焦亚硫酸钠或43.8g亚硫酸氢钠，用水稀释至200ml,过滤于棕色玻璃瓶 中3. 3三氯醋酸：10%称取三氯醋酸100g，溶于1000ml水中即得3.4硫酸溶液（0.1mol/L）：按照中国兽药典2000年版第一部附录157配制与标定标准磷基准液准确称取KHPO （A.R） 0.4394g （预先在105°C干燥至恒重），加入20ml硫酸溶液24（0.1mol/L ）用水稀释1000ml ,摇匀，即为100ug/ml的磷溶液标准磷工作液将上述标准磷基准溶液，用水稀释10倍，即为10ug/ml的磷溶液（临用前配制）4标准曲线绘制取标准磷工作溶液，分别量取使含磷量为0，10，20，30，40，和50ug，各加入6只 25ml容量瓶中，再加入磷酸试剂I，II各1ml，加水使总体积为7ml，在沸水浴上加热30 分钟，冷却，加水稀释至刻度，摇匀，以纯化水为参比（空白），用1cm比色池，在650nm 处，用分光光度计测定吸收度，以磷含量为横坐标，测得光密度值为纵坐标，绘制标准曲 线，再制成表格，即为标准曲线表。

题 目玉米浆检验操作规程编码：TSIII-01800页页3 7 第共注意：磷试剂1,11最多能储存两周，过期的须重新配制（一般贮冰箱）每配一次磷试剂需以标准磷校正一次，或每次都标定钼酸氨的浓度，控制在18N左右3）试剂瓶内涂蜡防止硅、锗等干扰4） 反应酸度控制在PH1.5—2.3之间5） 钼蓝的生成与温度，酸碱度，时间有密切关系，需严格控制5 溶解磷的测定5.1 测定步骤精密称取供试样品约3g，置于100ml容量瓶中，加水约50ml，摇匀，于沸水浴中加热 30分钟，冷却后，加纯化水至刻度，离心（或澄清）5分钟，取上清液5ml于50ml容量瓶 中，加1 0%三氯乙酸1 0m l ，于室温放置5分钟，稀释至刻度，摇匀，用滤纸过滤（或离心 5分钟），吸滤液2ml于25ml容量瓶中，加磷试剂1,11各1ml,加水使总体积为7ml，在 沸水浴上加热30分钟，取出冷却后，稀释至刻度，摇匀，在650nm处，用分光光度计测定 消光值，查表求得单位同时以纯化水做一空白5.2计算 uu/g = mX5/100X2/50XW干物质式中：u—由标准曲线表查得样品溶液含磷量（u）m一样品重量（g）5/100 X 2/50—样品溶液稀释倍数。

W—干物质粗蛋白1简述1.1本法适用于含氮有机物的含氮量测定1.2原理：本法系将供试品在硫酸及催化剂作用下，经强热分解使有机氮转化为硫酸题 目玉米浆检验操作规程编码：TSIII-01800页页4 7 第共氨，再经强碱碱化使氨馏出并吸收于硼酸液，最后用盐酸滴定液滴定，求出氮含量反应式：RCHNH COOH+2H SO 2CO +2S0 +2H O+NH +RH2 2 4 2 2 2 32NH+HS0 （NH ） SO3 2 4 4 2 440%氢氧化钠的作用：（NH ） SO +2NaOH ——► 2NH OH+Na SO4 2 4 4 2 4加热NH OH NH『+HO4 3 22NH+4HBO=(NH)BO+5HO3 3 3 4 2 4 7 2(NH ) B O +2HCl+5H O=2NH Cl+4H BO4 2 4 7 2 4 3 31.3氮测定分第一法与第二法应按中国兽药典该品种项下的规定选用2 仪器与试药2.1仪器2.1.1常用定氮仪由500ml凯氏烧瓶、氮气球和冷凝管组成2.1.2半微量定氮仪由1000ml圆底烧瓶，连有氮气球的蒸馏器和直形冷凝管等组成2.1.3天平：万分之一天平。

适用于精密称取0.1g以上者；十万分之一天平，适用于 精密称取0.1g以下者2.1.4消化和蒸馏可用电炉或煤气加热 2.1.5蒸馏连接用的乳胶管或橡胶管，应用氢氧化钠试液煮沸20分钟，洗去碱液后用 水煮沸，洗净，晾干2.2试药2 . 2 . 1试剂均为化学纯 2.2.2滴定液的配制与标定应符合中国兽药典2000年第一部附录157规定 2.2.3试液，指示剂的配制应符合中国兽药典2000年第一部附录144、155规定2.2.4 硫酸铜用作消化催化剂；硫酸钾用以提高硫酸的沸点，也可以将硫酸钾与硫酸 铜按10： 1比例混合研匀使用3 操作方法题 目玉米浆检验操作规程编码：TSIII-01800页页5 7 第共本操作法采用《中国兽药典》2000年版第一部附录44页，半微量法(第二法)3.1称样：取供试品1g (约相当于含氮量1.0〜2.0mg)精密称定，置干燥的30〜50ml 凯氏烧瓶中3.2消化：在烧瓶中加硫酸钾3g与硫酸铜0.5g，再沿瓶壁用吸管加硫酸15ml ,并加 玻璃珠1—2粒，在凯氏烧瓶口放一小漏斗，并使烧瓶成45°斜置，用小火缓缓加热使消 化液保持在沸点下，并使小火保持在液面下，等爆沸停止，溶液由黑色变为棕黄色，强热 至沸，待溶液成澄明绿色后，除另有规定外，继续加热，总消化时间2.5小时。

消化完毕， 放冷，移至100ml容量瓶中，加水至刻度3.3蒸馏：按药典附图连接蒸馏装置，A瓶中加水适量与甲基红指示剂数滴，加稀硫酸 使成酸性，加玻璃珠和沸石数粒将连有氮气球的蒸馏器和直形冷凝管用水加热蒸汽淋洗； 并使水自冷凝管尖端反冲洗2〜3次，从加样口淋洗一次，洗涤液排出蒸馏管吸2%硼酸 溶液10ml置100ml锥形瓶中，加甲基红一溴甲酚绿混合指示液5滴，将冷凝管尖端浸入液 面下，吸取容量瓶中的稀释液5ml，经漏斗移入连有氮气球的蒸馏器中，用少量的水淋洗 凯氏烧瓶及漏斗2—3次，每次约3—5ml，再加入40%氢氧化钠溶液10ml用少量水洗涤 漏斗一次，关闭漏斗（加少量水封闭出口）进行蒸馏（蒸馏时不宜泡沸过高，以免溅至氮 气球）至硼酸液由酒红色变为兰绿色起，继续蒸馏约10分钟，将100ml锥形瓶下移至冷 凝管尖端提出液面，使整齐继续冲洗约1分钟，用水淋洗尖端后停止蒸馏3.4滴定：馏出液用盐酸液（0.01mol/L）滴定至溶液由兰绿色变为灰紫色，并将滴定 的结果用空白实验（空白馏出液的容积应与供试品馏出液的容积基本相等）校正每 1ml 的盐酸液（0.01mol/L）相当于0.1401mg的N。

4 注意事项4.1蒸馏装置连接后应严密4.2 消化时若发现瓶壁上有黑点，可适当转动烧瓶，使硫酸回流时将黑点冲下，以保 证消化完全4.3消化液应放冷后，再沿瓶壁缓缓加水，防止供试液局部过热爆沸冲出瓶外4.4蒸馏过程中若无黑点CuO析出，说明加入碱量不足，应补充碱量或重新实验题 目玉米浆检验操作规程编码：TSIII-01800页页6 7 第共4.5配制40%氢氧化钠溶液时，宜边加边振荡，避免未溶解部分沉积于容器底部而难于 溶解4.6约80%以上的氨在最初1—2分钟内蒸出，初蒸速度不宜太快，以免氨蒸出后未能 及时被吸收而逸失4.7 锥形瓶中加入硼酸和指示剂后应显酒红色，如显绿色，说明锥形瓶有碱性物质污染蒸馏出的氨接收液应尽快滴定，以免放置时间过长，影响测定结果5 记录与计算5.1记录供试品与试液的名称，规格及用量，滴定液的名称，F值及消耗量（ml）5.2 计算 （V—V ）XCX0.014O蛋白质含量％ = X100%X6.25mX5%XW干物质式中C—盐酸的浓度（mol/L）V—供试品滴定时盐酸滴定液消耗体积（ml）V—空白实验滴定时盐酸滴定液消耗体积（ml） Om 一为供试品的重量（g）W—所测玉米浆的干物质（％）供试品测定两份，相对偏差不得过0. 5%；空白2份，极差不得大于0. 05ml 。

6 附注6. 1酰胺碱性水解法不属于本测定范围6.2空白值常为0.02—0.3ml,空白值为0ml亦属正常6.3操作环境应避免氨的干扰6.4一般供试品称样量规定为：玉米淀粉为0.3克，酵母粉、豆饼粉、花生饼粉，黄豆粉均为0.3克，蛋白胨为0.15克，玉米浆为1.0克干物质1取已充分搅匀的样品1—2g，置于已恒重的称量瓶中，精密称定重量，在水浴上蒸干后，于105°C干燥箱中干燥至恒重取出放入干燥器中，与室温平衡后，称其重量题 目玉米浆检验操作规程编码：TSIII-01800页页7 7 第共2计算：干固体重m干物质= X 100%样品重M酸度 1 仪器250 ml容量瓶25 ml移液管150 ml三角瓶25 ml碱式滴定管2试剂1%酚酞指示剂O.lmol/L氢氧化钠滴定液3操作步骤精确称取2g玉米浆样品于50ml小烧杯中然后无损地倒入250mL容量瓶中，再加纯化 水至刻度，摇匀，静止后备用从上面的溶液中用移液管吸取25mL液体于150mL三角瓶中，加3滴酚酞指示剂，用0.1 mol/LNaOH滴定液滴定至液体呈浅粉色即为终点6.4计算VXCX0.0365酸度％ = X100%mX25/250XW干物质式中：m—所称样品的重量V—消耗NaOH的体积数C—NaOH滴定液的摩尔浓度W—干物质。