邻二氮菲分光光度法测定微量铁ppt课件.ppt

邻二氮菲分光光度法测微量铁邻二氮菲分光光度法测微量铁 一、一、实验目的目的⒈学习确定实验条件的方法，掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理；⒉掌握721型分光光度计的运用方法，并了解此仪器的主要构造⒈确定适宜的条件的缘由：    将被测物与显色剂反响，使之生成有色物质，然后测其吸光度，进而求得被测物质的含量因此，显色条件的完全程度和吸光度的丈量条件都会影响到丈量结果的准确性为了使测定有较高的灵敏度和准确性，必需选择适宜的显色反响条件和仪器丈量条件通常所研讨的显色反响条件有显色温度和时间，显色剂用量，显色液酸度，干扰物质的影响要素及消除等，但主要是丈量波长和参比溶液的选择显色剂用量和丈量波长的选择是该实验的内容二、二、实验原理原理•根据朗伯－比耳定律：A=εbc当入射光波长λ及光程b一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比只需绘出以吸光度A为纵坐标，浓度c为横坐标的规范曲线，测出试液的吸光度，就可以由规范曲线查得对应的浓度值，即工业盐酸中铁的含量 •邻二氮菲亦称邻菲咯啉〔简写phen〕，是光度法测定铁的优良试剂在pH=2～9的范围内，邻二氮菲与二价铁生成稳定的桔红色配合物〔〔Fe(phen)3〕2+〕。

 •配合物的lgK稳 = 21.3，摩尔吸光系数ε510 = 1.1×104 L·mol-1·cm-1，•而Fe3+能与邻二氮菲生成3∶1配合物，呈淡蓝色，lgK稳=14.1所以在参与显色剂之前，运用盐酸羟胺(NH2OH·HCl)将Fe3+复原为Fe2+，其反响式如下：•2 Fe3+ + 2 NH2OH·HCl → 2Fe2+ + N2 + H2O + 4H+ + 2Cl-•测定时控制溶液的酸度为pH≈5较为适宜，用邻二氮菲可测定试样中铁的总量 •金属一EDTA络合物与其它络合物一样，在溶液中存在着离解平衡，其平衡常数用稳定常数(构成常数)或不稳定常数(离解常数)来表示•于金属离子-EDTA普通构成1：1络合物，为讨论方便，略去式中的电荷，简写成：•    M＋Y↔MY•    当此反响达平衡时•K稳越大(或K不稳越小)，阐明络合物越稳定              [MY]          1    K稳=──── =───           [M][Y]      K不稳阳离子lgK稳阳离子lgK稳阳离子lgK稳Na+1.66Ce3+15.98Hg2+21.80Li+2.79Al3+16.10Cr3+23.00Ba2+7.76Co2+16.31Th4+23.20Sr2+8.63Zn2+16.50Fe3+25.10Mg2+8.69Pb2+18.04V3+25.90Ca2+10.69Y3+18.09Bi3+27.94Mn2+14.04Ni2+18.67Fe2+14.33Cu2+18.80表 1 EDTA与各种常见金属离子的络合物的稳定常数(溶液离子强度I=0.1，温度20℃)络合物稳定性主要决议于•金属离子本身的离子电荷、离子半径和电子层构造•溶液的酸度、温度和其它络合剂三、三、仪器器试剂⒈仪器：721型分光光度计；1cm吸收池；10mL 吸量管；25mL 比色管(7个)。

⒉试剂：1.0×10-3 mol·L-1 铁规范溶液；100μg·mL-1铁规范溶液；0.15%邻二氮菲水溶液；10%盐酸羟胺溶液〔新配〕；1mol·L-1乙酸钠溶液；1 mol·L-1NaOH溶液；6 mol·L-1 HCl〔工业盐酸试样〕试剂配制配制1.0×10-3 mol·L-1 铁规范溶液；100μg·mL-1铁规范溶液； 〔铁分子量55.85，硫酸亚铁152 〕0.15%邻二氮菲水溶液；10%盐酸羟胺溶液〔新配〕；1mol·L-1乙酸钠溶液；〔分子量82.03 〕四、四、实验步步骤⒈吸收曲线的绘制和丈量波长的选择〔略〕用吸量管汲取2.00 mL 1.0×10-3mol·L-1铁规范溶液，注入50mL比色管中，参与1.00mL 10%盐酸羟胺溶液，摇匀，参与2.00 mL 0.15%邻二氮菲溶液，5.0 mLNaAc溶液，以水稀释至刻度在光度计上用1 cm比色皿，采用试剂溶液为参比溶液，在440～560 nm间，每隔10 nm丈量一次吸光度〔在最大吸收波优点，每隔2nm〕，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收曲线，选择丈量的适宜波长⒉显色剂条件的选择〔显色剂用量〕•在6支比色管中，各参与2.00mL 1.0×10-3mol·L-1铁规范溶液和1.00mL 10%盐酸羟胺溶液，摇匀。

分别参与0.10，0.50，1.00，2.00 ，3.00及4.00mL 0.15%邻二氮菲溶液，5.0 mL NaAc溶液，以水稀释至刻度，摇匀•在光度计上用1cm比色皿，采用试剂溶液为参比溶液，测吸光度以邻二氮菲体积为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸光度-试剂用量曲线，从而确定最正确显色剂用量⒊工业盐酸中铁含量的测定⑴规范曲线的制造在6支50mL比色管中，分别参与0.00、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00mL 100μg/mL铁规范溶液，再参与1.00mL 10%盐酸羟胺溶液，2.00mL 0.15%邻二氮菲溶液和5.0 mL NaAc溶液，以水稀释至刻度，摇匀在512nm处，用1cm比色皿，以试剂空白为参比，测吸光度A⑵试样测定准确汲取适量工业盐酸三份，按规范曲线的操作步骤，测定其吸光度五、预备实验六、六、实验本卷本卷须知知⒈不能颠倒各种试剂的参与顺序⒉读数据时要留意A和T所对应的数据透射比与吸光度的关系为:A=log(I0/I)= log(1/T)；测定条件指：测定波长和参比溶液的选择⒊最正确波长选择好后不要再改动⒋每次测定前要留意调满刻度。