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临床标本收集及保存.docx

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  • 卖家[上传人]:ni****g
  • 文档编号:493006322
  • 上传时间:2023-01-21
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    • 临床样本的收集与保存样本 类型米集方法处理方法保存方法血样液本•• •• •根据研究需要采集治 疗前,治疗中及治疗 后的空腹外周静脉 血采集时尽量选择与其 他常规检验同时进行 分别采集抗凝血(依 据研究目的选择抗凝 剂)和非抗凝(干燥 或促凝)血液样本 肿瘤?血液样本采集 英确保放/化疗前有 进行血浆样本分离应进行 两次离心•••• •依据科研需求确定样 本份数分离提取血浆、血清、 白细胞层、血凝块进 行分装,每例样本不 少于3份血清/血浆:分装3管, 0.5ml/管血凝块:分装2管, 1cmA3/ 管EDTA抗凝:用于DNA 提取、淋巴母细胞系 建立和蛋白组学研 究分装3管、0.5ml/ 管• ••血清:室温血凝后W 30min内进行分离、 分装;4C,24h内进 行分离、分装血浆:4C,24h内进 行分离、分装全血/血清/血浆/血 凝块W -80 C长期保 存外 血周单•血液样本用EDTA抗 凝米集•依据科研需求确定样 本份数•单个核细胞:4C,24h 内进行分离、分装个细 样核 胞 本• ••全血样本米集后应尽 快用淋巴细胞分离液 分离单个核细胞 分离后的单个核细胞 应加入细胞冻存液, 并利用程序降温仪或 程序降温盒进行梯度 降温。

      冻存液配置为90%FC S+10%DMSO• •水平室温离心分离 PBMC,4°C低温洗涤 分离后单个核细胞加 入细胞冻存液,混匀 后进行分装,每管 0.5ml•分装后W -150 C液氮 中保存组样织本• ••样本米集严禁影响临 床病理诊断肿瘤直 径W1cm^3不建议采 集或在病理医生指导 下采集,采集部位应 与用于石蜡切片相一 致样本采集应在离体后 30min内完成采集, 米集时应避免坏死区 及纤维化区,肿瘤细 胞应>50%样本采集时应在洁净 环境中操作,保存••••••依据科研需求确定样 本份数肿瘤、瘤旁及非瘤(正 常)组织各2-3份石蜡/OCT样本1份或 5张组织切片,用于形 态学对照需留取质控样本() 留取份数依据科研目 的而定)每份样本应巳0.5cmA3 或 300mg 或 1*10A7 细胞石蜡样本不小于• ••• •样本置于液氮内转 运石蜡样本置于中性福 尔马林中常温转运, 尽快制成蜡块RNA later样本常温转 运(W24h),W-20C 保存OCT样本W -20 C保 存新鲜组织样本置于液 氮中保存RNA时应尽量在无菌 环境下进行;采集不 同样本时应更换采集 器材、防止交叉污染。

      • 4.采集顺序:标明“远 癌-近癌-癌灶”顺序, 正常组织(距癌灶边 缘>3cm或最远端)一 癌旁组织(距离癌灶 边缘<3cm)一癌组织• 采集后样本置于液态 液氮中应使用内旋式 冻存管,置于气相液 氮或-80 °C冰箱中可 使用外旋式冻存管• 每份肿瘤样本应有配 对的血液样本0.5*0.5*0.2cm• 样本/福尔马林液比例应 N1/5培养细胞样本• 米集容器应无菌、干 燥、洁净、具有防漏 瓶盖• 吸出培养皿培养液, 用PBS冲洗2次,加 入胰蛋白酶37C消化 1min• 除去胰蛋白酶,加入 5ml培养液混匀后取 出细胞液进行离心• 除去上清液后加入细 胞保护剂0.5ml,胎牛 血清0.5ml及DMSO 0.1-0.2ml混匀放入内 旋式冻存管内,进行 程序降温• 干细胞保存加入特定 细胞培养液及高浓度 胎牛血清• 依据科研需求确定样 本份数• 每皿细胞对应1个冻 存管保存• 传代细胞建议取处于 指数生长期、较大瓶 皿培养的80%-90%汇 合单层细胞• 收集培养液时, 1000g/min 离 心 5-10min• 加入胰蛋白酶后需放 入恒温箱37 C恒温 1min• 样本置于液氮内转 运。

      • W-150C长期保存尿液 样本• 米集容器应无菌、干 燥、洁净、具有防漏 瓶盖• 进行毒理分析时应使 用高密度聚丙烯类容 器• 检测特殊分析物时应 在分管前加入EDTA 或焦亚硫酸钠等防腐 剂• 避免经血、白带、精• 依据科研需求确定样 本份数• 尿液样本W100ml• 分装5管,1ml/管• 尿液样本可处理为: 全尿• 常温保存:W4h• 0-4CW24h• 全尿W -80 C长期保 存.• 细胞W -150 C长期保 存液、前列腺液、粪便 污染• 特殊样本应避光保存• 建议米集首次晨尿• 尿液样本含有细胞碎 片等杂质,应进行离 心• 尿液内细胞采集/分 离方法同血液样本• 不同时段尿样研究方 向:首次晨尿:白细 胞、红细胞和激素浓 度较高;随机尿样: 适合常规筛查和细胞 学检测;分级尿样: 适用于分析物浓度; 定时尿样:可用于比 较生物分子排泄模 式粪便样本• 粪便应取新鲜标本, 盛器应洁净,不得混 有尿液,不可有消毒 剂及污水• 采集标本时应用干净 的竹签选取含有粘 液、脓血等病变成分 的粪便;外观无异常 的粪便需从表面、深 处及粪端多处取材, 其量至少指头大小• 冷冻采集后的样本• 依据科研需求确定样 本份数。

      • 采集量N30g• 分装3管,10g/管• 冷冻干燥保存• 2W-80°C长期保存.胆汁样本• 米集容器应无菌、干 燥、洁净、具有防漏 瓶盖• 米集清晨胆汁、米集 时尽量选择与其他常 规检验同时进行• 胆汁保存应加入细胞 培养液(RPMI1640)• 胆汁内细胞采集分离 方法同血液样本• 依据科研需求确定样 本份数• 采集量N10ml胆汁/RPMI1640比例为:1/25• 分装5管,2ml/管• 采集后4C保存,时 间W 12h内进行分 装• W-150C长期保存脑脊 液• 样本米集后应转入含 有EDTA和氯化钠混 合液中2. 如果含有红细胞或颗粒 物时应低温离心3. 米集细胞应使用专业米• 依据科研需求确定样 本份数2. 采集量N3ml3. 分装 3 管,0.5-1ml/管• 样本置于液氮内转 运2. 上清液-80C长期保存3. 分离细胞W-150C长期 保存4.脑脊液保存应加入保护 剂(DMSO)并使用程序降 温仪进行梯度降温唾液样本• 使用蛋白酶抑制剂处 理样本• 进行离心、分离上清 和可能存在物质、米 集上清和颗粒物• 依据科研需求确定样 本份数• 分装3-5管,0.5ml/管。

      • 样本置于液氮内转 运• W-80°C长期保存。

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