玉米中转基因成分的筛查检测策略.docx
3页玉米中转基因成分的筛查检测策略作者:王培珍来源:《农民致富之友(上半月)》2020年第24期王培珍玉米作为禾本科一年生的草本植物,其营养成分丰富,提供大量的碳水化合物转基因的 玉米具有较强的耐寒性、耐旱性、耐贫瘠性等优良性质,容易种植但转基因玉米也存在着一 定安全隐患,转基因检验受到广大消费者的重视基于此,本文将主要论述玉米中转基因成分 的筛查检验策略一、 玉米中转基因成分的筛查检测的重要性转基因成分检验技术是转基因生物研究和安全管理的基础,检验人员通过技术手段判断目 的基因导入到玉米受体细胞中,并检验玉米受体细胞是否成功表达相关性状目前已经有65个 国家和地区对转基因产品采取强制的标志性管理,2015年10月开始实行的中华人民共和国安 全法第69条中明确规定了转基因食品应该明确标注转基因检验行业快速发展,因此建立一个 迅速准确的基因检验方法,是当前检测技术所面临的关键问题截止到2018年中国玉米产量 25733万吨,中国的转基因玉米转化事件有16个,转基因玉米种类过多,同时存在变异亚种, 检验人员应该综合DNA序列分析,选取合适的基因元件,确定转基因玉米的筛查方法二、 玉米中转基因成分的筛查检测技术1、 PCR检验技术PCR检验技术是一种灵敏度高,目前发展较为成熟的转基因检验方法,根据特异性主要分 为筛查基因特异性、翻译产物特异性等。
PCR检验的主要基因包括调控基因、标记基因、及导 入到玉米细胞中的目的基因其中调控基因主要包括基因中前端和后端的启动子与终止子,标 记基因主要包括抗草丁麟基因、抗卡那霉素基因PCR技术在玉米转基因成分检验中有很大的 应用,但由于转基因玉米中含有多个目的基因,往往需要多重PCR进行检验,其快速提高检验 效率,同时保证玉米中转基因成分的特异性2、 环介导等温扩增检验技术环介导等温扩增检验技术作为一种新兴的DNA扩增方法,这种技术主要利用了特异性的核 糖核苷酸引物,综合应用DNA聚合酶,促进DNA在常温下快速增殖,完成核酸的快速扩增环 介导等温扩增检验能够快速检验出个体中的转基因成分,其特异性强,灵敏度高,检验方法用 时较短,成本较低,为玉米转基因检测提供了新思路3、 近远光红外光谱分析检测技术近远光红外光谱是介于可见光和红外光谱之间的电磁波,波长范围一般在780〜2500之间, 它对人体的伤害较少,不会产生光污染近远光红外光谱分析不需要对玉米进行预处理,可以 做到实时的检验其不仅能够检验玉米中的转基因含量,同时能够综合反映玉米土质的各种问 题,分析土壤中的全氮含量与有机质比例4、生物传感检验技术生物传感利用玉米自身的细胞、组织、免疫制剂,进行特异性的生物化学反应,综合应用 外界的光、电、化学、物理刺激等。
并综合等离子共振,完成转基因玉米的检验但由于不同 生物形状千差万别,目前的生物传感器应用存在着一定的限制,使得商业化的玉米检验生物传 感器存在一定的问题,检验人员应该综合微制造技术、生物材料技术,提高生物传感器的检验 精度5、蛋白质检验技术在将目的基因导入到玉米受体细胞中,玉米中自身基因与目的基因杂交,产生特异性蛋白 质,因此对蛋白质进行定性检验,就可以完成玉米转基因成分的测定同时对蛋白质进行定性 检验实现了检验的集约化发展,结果表明玉米LY038中cordapA基因建立的LAMP扩增技术灵敏 度高、特异性好、稳定性较高,具有较好的应用价值和应用前景三、玉米中转基因成分的筛查检测步骤1、 合理选择玉米检验材料转基因玉米多种多样,目的基因也有所不同,检验人员应该综合市场走向,选择合理的转 基因种类,并综合应用PCR扩增仪和Da marketer保证整体的扩增引物在相同环境下进行2、 序列对比与DNA提取核苷酸序列对比与DNA提取作为玉米中转基因成分筛查的重要手段,检测人员要通过计算 软件对不同转基因玉米的地面进行对比分析利用紫外分光光度计ND2000测定获得DNA的纯度 和浓度,进行琼脂糖凝胶电泳和EB染色检测DNA样品的完整性。
3、 定性PCR定性PCR作为DNA扩增的主要技术,定性PCR可以保证玉米中的双链快速解旋,实现快速 复制,为实验数据的有效性提供保障在进行PCR定性扩增时,检验人员要合理设置扩增条件, 利用CaMV35S启动子、NOS终止子2个元件的组合,保证DNA可以快速扩增,并综合应用染色 剂,提高实验效果4、 结果分析玉米的转基因成分有A21、NK603、T25、MON88017、Bt11XGA21等,多样化的基因丰富了 玉米基因库,同时也增加了玉米中转基因成分的筛查难度检验人员要综合利用数据库,分析 外源基因插入玉米基因中的分布规律,选择合适的检验手段判断玉米各种性状,并综合应用不 同基因的特异性检验方法,提高实验的灵敏度1) 以转基因玉米分子中的特异性与基因元件信息经过检验分析,玉米中主要的性状为 抗虫、抗除草剂等性质,检测人员要统计不同元件启动子出现的概率,从而形成一个完整的检 验体系,保证玉米中转基因成分的快速筛选定位2) 基因元件序列分析以及检验方法在转基因玉米研发过程中,为了实现外源基因在宿 主细胞中的正常表达,需要对宿主的密码词进行修饰,在适应过程中,很有可能导致出现不同 的核苷酸序列。
因此在检验过程中必须考虑同名的基因DNA是否有差异应用间分子杂交,选 择合适的引物综上,虽然转基因技术快速发展,但由于转基因特有的弊端,消费者对转基因成分的检验 也提出了更高的要求,检验人员应该综合多种检验方法,保证检验快捷、灵敏、高效,综合应 用纳米技术和计算机显示技术,实现转基因成分数据化、可视化方向作者单位:015000内蒙古自治区巴彦淖尔市种子管理站)。





