普通肉汤琼脂培养基使用.docx

中文名称：营养琼脂（普通肉汤琼脂培养基）英译名称：Nutrient Agar品种编号：022020营养琼脂规格：250g干粉培养基营养琼脂用途：用于细菌总数测定、保存菌种及纯培养，也可用于消毒效果 测定营养琼脂使用原理：蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;氯化钠能维持均衡的 渗透压；琼脂是培养基的凝固剂微生物图册：MKM营养琼脂配方（每升）:蛋白胨10g牛肉膏粉3g氯化钠5g琼脂15g最终 pH 7.3±0.2营养琼脂使用方法：1、 称取本品33g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解， 分装三角瓶，121°C高压灭菌15min,备用2、 （食品）以无菌操作称取检样25克（或25mL）,放入含有225mL灭菌生理 盐水或其他稀释液的玻璃三角瓶中（瓶内预置适当数量的玻璃珠），充分振摇，即 为1： 10的均匀稀释液依次做1： 100，1：1000……稀释液3、 根据对样品污染情况的估计，选择2—3个合适的稀释度，分别在做10 倍稀释的同时，吸取1mL稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做2个平皿4、 稀释液移入平皿后应及时将凉至46C左右的培养基注入平皿约15mL，并 转动平皿使混合均匀，同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内 作空白对照。

待琼脂凝固后，倒置于36±1C温箱中培养48±2h5、 观察结果6、 菌落计数方法：做平板菌落计数时，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏，在计 下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数7、 菌落计数的报告：选取菌落数在30-300之间的平板作为菌落总数测定标准一个稀释度使用 两个平板，应采用两个平板平均数，其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不 宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数，若片状菌落不到 平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以2以代 表全皿菌落数平皿内如有我链状菌落生长时（菌落之间无明显界线），若仅有一 条链，可视为一个菌落;如有不同来源的几条链，则应将每条链视为一个菌落计营养琼脂质量控制：本营养琼脂接种下列菌株，置于36±1C温箱中培养48±2h，结果如下：生长状况菌落特征阿KM®大肠埃希氏菌 ATCC25922 良好 白色一灰白色，圆形，边缘整齐，表面光滑，湿润金黄色葡萄球菌ATCC6538 良好 黄色，圆形，边缘整齐，表面光滑、湿润，不透明贮 存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖贮存期三年。