
2022年生物选修三基础知识汇总.pdf
6页1、基因工程是在DNA 分子水平上进行设计和施工的,又叫做DNA 重组技术2、基因工程的基本工具限制性核酸内切酶(限制酶)、DNA 连接酶、运载体(常见的是质粒)3、限制性核酸内切酶的功能:能够识别特定的脱氧核苷酸序列,并在特定位点将两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性切割时 不能破坏目的基因、标记基因4、DNA 连接酶的作用是连接两个双链 DNA 片段形成磷酸二酯键;6、基因工程的基本操作程序是:目的基因的获取基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定7、获取目的基因的方法有:(1)从自然界中已有的物种中分离2)人工合成(常用方法有逆转录法(提取目的基因 mRNA)_和化学合成法_)可从基因文库中获取或利用 PCR 技术扩增目的基因9、基因工程的 核心是基因表达载体的构建(限制酶+DNA 连接酶处理质粒和目的基因)基因表达载体的 组成是:目的基因启动子终止子标记基因+复制原点标记基因的作用: 鉴定受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来常用的标记基因是抗生素抗性基因(培养基中加入抗生素进行筛选)目的基因与标记基因一般不是同一种基因11、 (1) 将目的基因导入植物细胞: 采用最多的方法是农杆菌转化法(Ti质粒上的 T-DNA 可转移至受体细胞的染色体),其次还有基因枪法和花粉管通道法等。
受体细胞若是体细胞,还要利用植物组织培养技术精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 1 页,共 6 页2)将目的基因导入动物细胞: 最常用的方法是显微注射技术受体细胞是受精卵(具有全能性) 3)将目的基因导入微生物细胞:钙离子处理,使细胞成为感受态细胞12、目的基因的检测与鉴定:首先要检测转基因生物的染色体 DNA 上是否插入了目的基因,方法是采用DNA 分子杂交技术其次还要检测目的基因是否转录出了 mRNA,方法是采用分子杂交技术都用 基因探针:放射性同位素标忘掉目的基因的单链原理都是碱基互补配对)最后检测目的基因是否翻译成蛋白质,方法是抗原抗体杂交以上都是观察有没有杂交带有时还需进行个体水平的鉴定,即接种实验(即用病原体感染或用虫子吃)意义(优势): 定向改造生物的遗传性状14、 蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活的需求基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质,而蛋白质工程生产的蛋白质是自然界不存在的15、植物组织培养技术原理:前者原理是植物细胞的全能性;植物体细胞杂交技术原理是:细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。
植物细胞全能性实现的条件:离体、一定的营养物质、植物激素、适宜的外界条件16、植物组织培养技术 ( 无菌操作 ) 脱分化再分化精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 2 页,共 6 页过程: 离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织胚状体、丛芽等 植物体 20、动物细胞培养的流程: 取动物组织块 (动物胚胎或幼龄动物的器官或组织)剪碎用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞制成细胞悬液转入培养瓶中到10 代(原代培养)出现接触抑制的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养到 50 代左右绝大多数细胞死亡,少数成为无限增殖的细胞系(癌变特征)原理:细胞增殖21、动物细胞培养需要满足以下条件:无菌、无毒的环境:培养液应进行无菌处理通常还要在培养液中添加一定量的抗生素,以防培养过程中的污染此外,应定期更换培养液,防止代谢产物积累对细胞自身造成危害营养:合成培养基成分:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等通常需加入血清、血浆等天然成分温度:适宜温度:哺乳动物多是36.50.5;pH :7.27.4气体环境:95% 空气5%CO2。
O2是细胞代谢所必需的, CO2的主要作用是维持培养液的 pH 22、动物体细胞核移植技术中选用去核卵 ( 母)细胞做受体细胞的原因: 含有使细胞核表达全能性的物质原理:细胞核的全能性24、植物体细胞杂交的 意义:克服了远缘杂交的不亲和的障碍25、单克隆抗体的制备中必须事先对小鼠注射特定抗原,使其产生浆细胞(B淋巴细胞),然后与骨髓瘤细胞融合;需要经过两次筛选,第一次用选择性培养基, 选出杂交瘤细胞, 第二次需要进行克隆化培养和抗体检测,选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞26、(1)杂交瘤细胞的特点:既能大量繁殖,又能产生专一的抗体精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 3 页,共 6 页(2)单克隆抗体的优点:特异性强,灵敏度高,并能大量制备27、精卵结合首先发生的是顶体反应防止多精入卵的的两道屏障:透明带反应,卵黄膜封闭作用判断受精的依据:透明带和卵黄膜间隙有两个极体28、动物早期胚胎发育的基本过程是:受精卵桑椹胚囊胚原肠胚(1)卵裂期的特点是:细胞有丝分裂,细胞数量不断增加,但胚胎的总体体积并不增加,或略有减小;(2)桑椹胚前细胞具有全能性;(3)囊胚的特点是: 囊胚期开始出现分化(该时期细胞的全能性仍比较高),聚集在胚胎一端个体较大的细胞称为内细胞团,将来发育成胎儿的各种组织,外围的细胞为滋养层细胞,中间的空腔称为囊胚腔; 29 、胚胎干细胞来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来, 主要特性是:在形态上表现为体积小,细胞核大,核仁明显;在功能上,具有发育的全能性,可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。
30、试管动物的培养过程:体外受精、早期胚胎培养、胚胎移植1) 体外受精过程是:卵母细胞的采集和培养精子的采集和获能受精2)采集的卵母细胞必需培养到减数第二次分裂中期,采集的精子必需进行获能处理获得更多卵母细胞的方法:超数排卵处理(促性腺激素)31、胚胎移植时要移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内,其中胚胎移植是胚胎工程的最后一道“工序 ”胚胎移植的意义:充分发挥雌性优良个体的繁殖能力32、胚胎移植的生理学基础:精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页,共 6 页动物发情排卵后,同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的这就为供体的胚胎 移入受体提供了相同的生理环境早期胚胎在一定时间内处于游离状态这就为胚胎的收集提供了可能受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应 这为胚胎在受体的存活提供了可能供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系, 但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响33、胚胎移植的基本程序主要包括:对供、受体的选择和处理 【选择:供体要求遗传性能和生产性能优秀的个体,受体要求有健康的体质和正常的繁殖能力;处理:首先用激素对供体和受体母牛进行同期发情处理。
然后用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理)】 配种或人工授精对胚胎的收集、检查、培养或保存胚胎移植移植后检查受体是否妊娠产下胚胎移植的新个体如何对胚胎进行性别鉴定?取滋养层细胞做 DNA 分析34、胚胎分割一般选择发育良好,形态正常的 桑椹胚或囊胚 对囊胚阶段的胚胎分割时, 要将内细胞团均等分割,否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育意义:提高胚胎的利用率属于无性繁殖35、达到不同目的所利用的技术:(1)转基因植物:基因工程、植物组织培养受体多为体细胞)(2)转基因动物:基因工程、早期胚胎培养、胚胎移植受体多为受精卵)(3)克隆动物:动物细胞培养、细胞 核移植 、早期胚胎培养、胚胎移植4)转基因克隆动物:基因工程、动物细胞培养、细胞核移植、早期胚胎培养、胚胎移植精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 5 页,共 6 页(5)试管动物:体外受精 、早期胚胎培养、胚胎移植6)制备单克隆抗体:动物细胞融合、动物细胞培养36、你对转基因生物的态度?精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 6 页,共 6 页。





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