生物检测技术试题集.doc

生物检测技术试题集一、名词解释1、引物：PCR反应过程中的一段与模板链互补，DNA聚合酶以其作为起始进行核酸聚合反应的一段短核苷酸序列 2、Sanger reaction：是在近于中性或碱性和室温的情况下, 2,4-二硝基氟化苯DNP与蛋白质分子中N-端氨基酸中的游离α氨基生成DNP衍生物，浓盐酸加热水解全部肽键,生成物中有一DNP氨基酸3、Tm值：50％DNA分子发生变性的温度称为变性温度（即熔解曲线中点对应的温度），由于这一现象和结晶的熔解相类似，故又称熔点或熔解温度(meltin temperature，Tm)因此Tm是指消光值上升到最大消光值一半时的温度4、DNA变性：是指核酸双螺旋碱基对的氢键断裂，双链变成单链，从而使核酸的天然构象和性质发生改变变性时维持双螺旋稳定性的氢键断裂，碱基间的堆积力遭到破坏，但不涉及到其一级结构的改变凡能破坏双螺旋稳定性的因素，如加热、极端的pH、有机试剂甲醇、乙醇、尿素及甲酰胺等，均可引起核酸分子变性5、全基因组鸟枪法测序：将基因组打成小片段后将其克隆到质粒载体中，然后随机挑取克隆对插入片段测序，并以获得的测序序列构建重叠群在此基础上进一步搭建序列支架，最后以分子标记为向导将序列支架锚定到基因组整合图上。

6、real-time PCR：是1996 年由美国Applied Biosystems 公司推出的一种新定量试验技术，它是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时监控反应过程，结合相应的软件可以对产物进行分析，计算待测样品模板的初始浓度7、蛋白质一级结构(primary structure)：就是蛋白质多肽链中氨基酸残基的排列顺序（sequence），也是蛋白质最基本的结构它是由基因上遗传密码的排列顺序所决定的各种氨基酸按遗传密码的顺序，通过肽键连接起来，成为多肽链，故肽键是蛋白质结构中的主键8、蛋白质的三级结构：是指球状蛋白质的多肽链在二级结构的基础上相互配置而形成特定的构象α螺旋、β折叠、β转角和无规则卷曲等二级结构通过侧链基团的相互作用进一步卷曲、折叠，借助次级键的维系形成三级结构，三级结构的形成使肽链中所有的原子都达到空间上的重新排布，它是建立在二级结构、超二级结构和结构域基础上的球状蛋白质的高级空间结构9、宏基因组学（Metagenomics）又叫微生物环境基因组学、元基因组学它通过直接从环境样品中提取全部微生物的DNA,构建宏基因组文库，利用基因组学的研究策略研究环境样品所包含的全部微生物的遗传组成及其群落功能。

10、蛋白质组学本质上指的是在大规模水平上研究蛋白质的特征，包括蛋白质的表达水平，翻译后的修饰，蛋白与蛋白相互作用等，由此获得蛋白质水平上的关于疾病发生，细胞代谢等过程的整体而全面的认识，这个概念最早是由Marc Wilkins 在1994年提出的二、填空题1、核酸分离纯化的技术路线包括破碎细胞、分离除杂、浓缩、分析鉴定以及分装保存等步骤2、质粒DNA的分离纯化主要包括：碱裂解法；沸煮裂解法；SDS裂解法等3、DNA复性不仅受温度、时间影响还受DNA浓度以及DNA顺序的复杂性影响4、PCR根据时间和温度可分为三个步骤，即变性、退火和延伸5、高通量测序技术步骤分为：1. 样本准备（sample fragmentation)；2.文库构建(library preparation)；3.测序反应(sequencing reaction)；4.数据分析(data analysis)6、基因作图有三种类型，即遗传作图、物理图谱和转录图谱7、比较基因组学是基于基因组图谱和测定基础，对已知的基因和基因组结构进行比较，从而了解基因的功能、表达机理和物种进化的学科8、由于蛋白质分子结构中特殊的键或基团造成蛋白质具有紫外吸收、蛋白黄反应、Millon反应、双缩脲反应、ninhydrin反应、亚硝酸反应、硫的反应、sakaguchi反应、丹酰化反应以及两性电解质等特点。

9、蛋白质一级结构测定通常是将蛋白质水解、部分水解以及选择性水解，再分别测定水解产物的组成，包括肽类和氨基酸，以观察组成蛋白质的氨基酸种类、数目、排列状态和次序等10、氢键是稳定蛋白质二级结构的主要作用力，二级结构包括：α-螺旋(α-helix)、β-折叠(β-sheet) 、β-转角(β-turn) 和无规卷曲(randon coil) 11、蛋白质高级结构分析测定方法分为仪器分析法和理论分析法12、蛋白质组学检测技术主要包括：电泳分析法；层析技术和质谱技术13、生物传感器是利用生物要素与物理化学检测要素组合在一起对被分析物进行检测的装置，包括三个部分：识别元件；换能器和检测元件组成14、根据电子鼻探测信号的类型可将其分为电信号电子鼻、光信号电子鼻、温度信号电子鼻和质量信号电子鼻，其中电信号电子鼻应用最为广泛三、 判断改错题1、 CT值越小，模板DNA的起始拷贝数越少 （×）2、 测定蛋白质水解程度可采用双缩脲法 （√）3、 变性温度低，解链不完全是导致PCR失败的最主要原因（×）4、 .PCR的三个反应步骤反复进行，使DNA扩增，靶序列DNA片段的增加一直成指数形式（×）5、 模板核算的量与纯化程度，是PCR成败与否的关键环节之一。

√） 6、 PCR循环次数主要取决于模板DNA的浓度，一般的循环次数选在30-40次之间√）7、 PCR循环次数越多，特异性产物的量亦随之增多（×） 8、 TaqMan探针是高度特异性的定量PCR技术，其核心是利用Taq酶的3’→5’外切核酸酶活性，切断探针，产生荧光信号√）9、 DNA变性后两条互补链还能重新结合，称为复性，无论外界条件如何都能复性×）10、 酚抽提法是基因组DNA分离纯化的一种方法√）11、 蛋白质高级结构最终由初级结构所决定√）12、 蛋白质是一种两性电解质是由于蛋白质既有氨基又有羧基√）13、 氢键是稳定蛋白质二级结构的主要作用力√）14、 相比于基因组包含的全部基因，蛋白质组包含了更多的功能性多肽，部分归因于蛋白质的修饰作用√）15、 X射线衍射法不但可以测定晶体结构而且可以用于测定非晶体结构×）16、 蛋白质二级结构属于高级结构√）17、 β折叠属于蛋白质三级结构的一种×）18、 生物芯片，又称蛋白芯片或基因芯片，它们起源于DNA杂交探针技术与半导体工业技术相结合的结晶√）19、 微生物传感器比酶传感器价格昂贵不利于推广应用×）20、 生物传感器用途广泛，涉及医疗保健、疾病诊断、食品检测、环境监测、发酵工业等各个领域。

√）四、 选择题1、高效毛细管电泳和一般电泳法的区别在于（B） A.电渗流的速度 B.使用毛细管柱 C.操作自动化 D.毛细管容易冷却 2、PCR反应的特异性决定因素中的关键是（A） A. 引物与模板DNA特异正确的结合 B. 碱基配对原则 C. Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性 D. 靶基因的特异性与保守性 3、对PCR产物检测的方法不正确的是 （B） A.凝胶电泳分析法 B.荧光标记法 C.分子杂交法 D.核酸序列分析法4、以下哪项不是目前常见的生物芯片（D） A.基因芯片 B.芯片实验室 C.蛋白芯片 D.核酸芯片5、32.什么是PCR特异性反应的关键（B） A．酶 B、引物 C .dNTP D模板 6、双链DNA在（A）温度范围内变性 A、90-95摄氏度 B、75-80摄氏度 C、80-85摄氏度 D、70-75摄氏度7、下列关于缓冲液的性质叙述错误的是（C） A.溶液PH值距离其等电点越远，电泳的速度就越大 B.当缓冲液PH大于蛋白质分子的等电点时，其电泳方向指向正极C.对两性分子而言，缓冲液PH并不影响其电泳方向D.泳动度与溶液黏度是成反比关系8、 下列关于PRC反映的五要素说法正确的是（A ） A． 引物、酶、dDTP、摸板、Mg2+浓度 B．引物、蛋白质、dNTP、摸板、Mg2+浓度 C．引物、温度、dNTP、模板、Mg2+浓度 D．引物、酶、dDTP、RNA、PH值9、.在常规紫外光测定时，紫外光波长集中于（B）区 A.小于190 nm B.200 ～400nm C.400～ 800nm D.800nm以上10、下列方法中不属于生物样品的预处理方法的是（E） A. 消化分解 B.提取 C.分离 D.浓缩 E.结晶 11、在显微镜的光学系统中，能够在上涂抹香柏油为介质的器材是（C） A.反光镜 B.聚光器 C.物镜 D.目镜12、下列微生物涂片的制作过程正确的是（C） A.涂片→干燥→固定→水洗→染色→干燥→镜检 B.涂片→干燥→水洗→染色→干燥→固定→镜检 C.涂片→干燥→固定→染色→水洗→干燥→镜检 D.涂片→干燥→染色→固定→水洗→干燥→镜检 13、对PCR产物检测的方法不正确的是 （B） A.凝胶电泳分析法 B.荧光标记法 C.分子杂交法 D.核酸序列分析法14、以下哪项不是目前常见的生物芯片（D） A.基因芯片 B.芯片实验室 C.蛋白芯片 D.核酸芯片 15．在探针制备中常用到某些荧光物质，以下哪项不是（A） A.PNA B.TMR C.罗丹明 D.Cy5 16.从酶的反应温度来看，温度变化1摄氏度，反应速度可能相差（A）A．10% 以上 B.5% C.不变 D.1% 17.不属于固化酶的优点的是（D） A .可反复使用 B.高稳定性 C.干扰较小 D.酶活力最高 18.下列哪项不是影响电泳分析的因素（D） A.待分离生物大分子的性质 B.电渗 C.溶液粘度 D.分离时间19. PCR反应的特异性的决定因素中(C)_是最关键的. A.碱基配对原则 B.TagDNA聚合酶合成反应的忠实性 C.引物与模板DNA特意正确的结合 D.靶基因的特异性与保守性20. ＴＬＣ 是什么的简称 （A） A 薄层层析 B 纸层析 Ｃ 高效液相色谱 Ｄ气相色谱21. 凝胶的种类很多，常用的凝胶主要有（D）。

①葡聚糖凝胶②聚丙烯酰胺凝胶③琼脂糖凝胶④多孔玻璃珠⑤多孔硅胶⑥聚苯乙烯凝胶A. ①②③ B.①②④⑤ C.③④⑤⑥ D.以上都是22. .下列关于核酸探针的分类叙述错误的是（C） A. 根据核酸的性质，可分为DNA和RNA探针 B. 根据是否使用放射性标记物的与否，可分为放射性标记探针和非放射性标记探针C．根据是否存在互补链，可分为互补链探针和非互补链探针D．根据放射性标记物掺入情况，可分为均匀标记和末端标记探针 五、 简答题1、简述PCR原理、方法及应用 PCR技术类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；②模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在。