粪污降解菌LPF-1降解猪粪过程GS-MSD分析.doc

粪污降解菌 LPF-1（Brevibacillus brevis LPF-1）降解猪粪过程GS-MSD 分析 蓝江林， 陈峥，史怀，栗丰，刘波 *福建省农业科学院农业生物资源研究所，福建 福州 350003摘 要：我国养猪业规模化的迅猛发展，养猪粪污产量大而且集中，远远超过了自然分解能力，造成的环境污染问题日益凸显，而且存在传播疾病的潜在风险，众多的专家学者尝试用各种各样的方法降解粪污，以减少或消除养殖业对环境造成的影响，实现可持续发展但猪粪的结构及其降解过程都是十分复杂的，研究者通过气相色谱法获得了些许相关信息，谢军飞等（2003）利用封闭式测定箱对两种不同堆肥处理方式的猪粪产生的气体进行了取样，然后通过气相色谱分析仪对其所含二氧化碳(CO 2)、氧化亚氮(N 2O)、甲烷(CH 4 )进行了测定分析近年来，随着测定技术的发展，气-质联用技术（GS-MSD）被越来越多的用在挥发性有机物（VOCs ）分析中黄俊等（2007）采用顶空固相微萃取-气相色谱/质谱法分析鉴定畜禽粪便中的挥发性有机化合物，从猪粪中分离鉴定出40种VOCs而对于猪粪降解过程中挥发性物质的变化，尚缺乏具体的信息，也未见相关文献报道。

本研究利用气-质联用（GS-MSD ）分析猪粪污降解菌 LPF-1 降解猪粪的过程的物质变化以匹配度大于 80（最大为 100）为依据，在第 0、3、6、9、12 和 15 天时猪粪水溶液检测到的物质分别为 22、9、11、14、23 和 18 种，整个过程中检测到的含量大于 5%物质共 15 种，分别是：1,2-二甲苯、2,4-二叔丁基苯酚、2,5-二叔丁基酚、2-乙基己醇、4- 甲基苯酚、苯酚、苯乙烯、对二甲苯、甲基苯酚、间二甲苯、氢化肉桂酸、乙基己醇、乙酸、正戊酸和棕榈酸甲酯猪粪+LPF-1 溶液第 0 天未检测，第3、6、9、12 和 15 天检测到的物质分别为 13、18、14、23 和 31 种整个过程中检测到的含量大于 5%物质共 10 种分别是：2,4-二叔丁基苯酚、2-甲基丁酸、4-甲基苯酚、苯酚和 4-甲基苯酚、对二甲苯、二甲苯、环辛四烯、氢化肉桂酸、乙酸和棕榈酸甲酯猪粪降解是一个复杂的过程，本研究结果为进一步阐明猪粪降解的机理提供参考关键词：Brevibacillus brevis LPF-1，猪粪，GS-MSD基金项目：国家水体污染控制与治理科技重大专项（2008ZX07425-002 ） ；福建省发改委项目（闽发改投资[2008]762 号） ；省科技计划项目（2009S0089） ；福建省财政专项-福建省农业科学院科技创新团队建设基金（STIF-Y03） 。

福建省属公益类科研院所基本科研专项（2010R1020-1） 作者简介：蓝江林，博士，副研究员，研究方向：农业微生物与生物防治E-mail：lanfz2008@.通讯作者：刘波，研究员，博士，研究方向：生物技术与生物防治E-mail：liubofz@.生防菌 ANTI-8098A 在土壤的存活能力测定及其对土壤微生物种群数量的影响葛慈斌 刘波 **（福建省农业科学院农业生物资源研究所，福建 福州 350003）摘 要：植物细菌性青枯病是由青枯雷尔氏菌（Ralstonia solanacearum）引起的一种土传病害，广泛流行于我国南方，尤其是江苏、江西、广东和福建等省茄科作物种植区对青枯病的生物防治研究，越来越引起各国学者的重视，也筛选出一些能够高效拮抗青枯病菌的有益微生物，但大田防治效果不甚理想，这可能与这些有益微生物在大田土壤中不能大量定殖、缺乏与其它微生物的竞争力有关青枯病生防菌 ANTI-8098A由本研究室分离自番茄根际土壤，对青枯雷尔氏菌具有较强的抑制、致弱作用；由ANTI-8098A 与微生物存活基质（survival medium 99，SM99）加工而成的生防菌ANTI-8098A 制剂，对番茄、茄子、辣椒等作物青枯病有较好的防效。

为探索 ANTI-8098A 制剂防治青枯病的作用机理，本文研究了生防菌 ANTI-8098A 以制剂、菌粉的状态施用到菜园土后，ANTI-8098A 在土壤中的存活状况及其对土壤微生物种群数量的影响本研究测定了生防菌 ANTI-8098A 菌粉、生防菌 ANTI-8098A 制剂施用到菜园土后，生防菌 ANTI-8098A 在土壤中的存活状况及其对土壤中细菌、真菌和放线菌种群数量的影响结果表明，经生防菌制剂处理的土壤，14d 和 60d 后 ANTI-8098A 的菌体数量分别为 5.1×105、3.6×10 4cfu/g，比用生防菌菌粉处理的土壤中 ANTI-8098A 的菌体数量为高 158 和 115 倍；经生防菌制剂处理 14d 后，土壤中细菌、真菌和放线菌的种群数量依次为 1.7×108、2.8×10 5、3.5×10 6cfu/g，与对照相比有增长，也分别比生防菌菌粉处理的土壤中这三类微生物的种群数量高 54.55%、7.69%和 45.83%关键词：生防菌 ANTI-8098A；制剂；土壤微生物；种群数量*基金项目：福建省自然科学基金项目(2006J0320)；福建省财政专项- 福建省农业科学院科技创新团队建设基金(STIF-Y03)。

作者简介：葛慈斌，男， （1973-） ，副研究员，从事植物病虫害生物防治研究，email: benci2000@*通讯作者：刘波， （1957-） ，男，博士，研究员，从事生物技术与生物农药研究，email： fzliubo@, 蜡样芽孢杆菌 ANTI-8098A 在番茄内的定殖和对青枯病的防治研究张彦 1,2，车建美 1,3，刘波 1*，唐 乐尘 21 福建省农业科学院农业生物资源研究所，福州，350003；2 福建农林大学植物保护学院，福州，350002；3 福建农林大学生物 农药与化学生物学教育部重点 实验室，福州， 350002； 摘 要：随着绿色荧光蛋白标记的应用日渐广泛，激光共聚焦显微镜也越来越广泛的应用到植物病害生物防治领域关于生防菌定殖对植株影响的报道也有不少，刘波等研究了生物杀菌剂 ANTI-8098 防治番茄青枯病的作用机理，贺忠群等 ]研究了不同丛枝菌根对番茄酶活性及光合作用的影响然而，利用 gfp 基因标记生防菌研究其在番茄植株内生定殖及其对番茄产生的影响未见报道本试验研究了生防菌 ANTI-8098A 在番茄植株内的定殖以及对青枯病的生防特性，采用激光共聚焦显微镜技术对 gfp 基因标记生防菌 ANTI-8098A:pCM20 在番茄根系的分布进行观察，研究了该生防菌对番茄盆栽苗 PPO 活性、叶绿体色素含量和根际微生物的影响，并进行了盆栽防效测定。

结果表明：ANTI-8098A 及其标记菌株 ANTI-8098A:pCM20 可以很好的定殖于番茄植株内，在根内定殖浓度最高，达 104-105 cfu/g，茎部、叶片内次之，达 103-104 cfu/g；ANTI-8098A 处理后番茄根系 PPO 活性得到显著提高，对番茄叶绿素含量有短期效应；处理后 5-15 d 番茄根际微生物数量略低于对照，其后逐渐对照趋于一致；ANTI-8098A 及其 gfp 基因标记菌株对番茄青枯病有较高的防效，达 57.1-100 %，不同浓度的生防菌液生防效果有差异，浓度为 108 cfu/ml的标记生防菌液与原始菌株 ANTI-8098A 对番茄青枯病的防效有显著性差异，浓度为106 cfu/ml 的 标记生防菌液与原始菌株 ANTI-8098A 对番茄青枯病的防效差异不显著关键词：蜡质芽孢杆菌 ANTI-8098A，青枯雷尔氏菌，内生定殖，番茄生理特性，生防效果基金项目：福建省自然基金项目（2008J0054） ，国家自然基金（30871667） ，国家 863 计划项目（2006AA10A211） ，福建省财政专项-福建省农业科学院科技创新团队建设基金（ STIF-Y03）作者简介：张彦（1986-） ，女，硕士研究生， E-mail：zy1322ttt@；*通讯作者：刘波（1957-） ，男，博士，研究员 , E-mail：fzliubo@保鲜功能微生物 FJAT-JK-2-GLX 对龙眼保鲜特性的研究付萍 1,2，车建美 1，刘波 1*，郑雪芳 1，林抗美 11 福建省 农业科学院农业生物资源研究所，福州，350003；2 福建农林大学生命科学学院，福州，350002摘 要：目前，龙眼保鲜主要采用低温、熏硫和生物保鲜膜等方法，对采后龙眼的保鲜效果和生理变化、套袋对龙眼果实品质及贮藏生理的影响等有过报道。

国内外未见对龙眼的微生物保鲜研究报道，因此，借鉴其它水果的微生物保鲜技术，开展龙眼的微生物保鲜研究，将会成为这种水果采后保鲜研究的一个重要方向本试验选择“福眼”这一龙眼品种，用微生物保鲜的方法对其采后果实品质变化进行研究，旨在为龙眼的保鲜提供无公害的微生物保鲜方法，为龙眼微生物保鲜技术的应用提供可靠数据龙眼果皮褐变腐烂与过氧化物酶（POD） 、多酚氧化酶 （PPO ）活性的关系极为密切，本研究探讨微生物 FJAT-JK-2-GLX 通过抑制龙眼果皮 POD、PPO 的活性从而达到龙眼保鲜的目的主要利用分光光度计测定品种“ 福眼” 在自然状态下及使用保鲜剂后龙眼 POD、 PPO 酶的活性，同时检测采后 在室温 29～30℃和相对湿度 60～70%下贮藏六天，龙眼果实好果率、脱粒率、可溶性固形物含量的变化，探讨保鲜微生物FJAT-JK-2-GLX 对龙眼的保鲜机理结果表明：龙眼在自然状态下，随着龙眼的逐渐腐烂，多酚氧化酶（PPO ） 、过氧化物酶（POD） 活性逐渐升高结果还表明，使用保鲜剂 FJAT-JK-2-GLX 不但能抑制病原菌而且能更好的抑制龙眼果皮 POD、PPO 酶活性且保鲜剂 FJAT-JK-2-GLX 对龙眼果实的保鲜效果明显好于对照。

关键词：龙眼；多酚氧化酶（PPO）；过氧化物酶（POD ）；好果率；脱粒率；可溶性固形物含量（TSS）基金项目：省科技厅重点项目（2008I0007 ） ；福建省财政专项- 福建省农业科学院科技创新团队建设基金 (STIF-Y03)；作者简介：付萍（1982-） ，女，山东省临沂市人，硕士研究生，研究方向为微生物分子生物学通讯作者：刘波（1957-） ，博士 , 研究员, 研究方向为微生物生物技术与农业生物药物. Tel ：13905917339；E-mail：fzliubo@；微生物发酵床养猪垫料发酵转化的生物肥药特性研究欧阳江华 1，刘波 1**，郑雪芳，林抗美，车建美 1，福建省农业 科学院农业生物资源研究所，福建福州 350003摘 要：微生物肥药生产成本低，应用效果好，不污染环境，使用后不仅增产，而且提高农产品的质量，因此，在我国农业可持续发展中占重要地位但是目前我国单一品种微生物肥药存在作用效果缓慢、功能单一、范围小、效果不理想等缺点，研制出既具有防虫抗病效果有具有肥料效果的生物肥药，将成为我国微生物肥药今后的发展和研究趋势目前，通过向物料中接种外源微生物菌剂以提高发酵效率，研制生物肥药的的研究已有大量报道，但关于向零排放发酵舍养猪垫料中添加生防菌剂的研究仍然少见报道。

本研究把ANTI-8098A:pCM20菌剂添加到养猪垫料，经过一段时间固体发酵，测定ANTI-8098A:pCM20能否在养猪垫料中存活以及存活的数量，同时测定固体发酵的养猪垫料中微生物群落以及理化性质的变化 ]，为开发出既具有田间肥效又具有防虫抗病的生物肥药提供理论和实际依据以利用两年后废弃的微生物发酵床养猪垫料为发酵原料，进行垫料好氧发酵试验，探讨添加了生防菌剂 ANTI-8098A 后生物肥药的特性首先进行一级液体发酵，发酵出 108cfu/g 的 ANTI-。