中药栀子中环烯醚萜苷类有效成分的综合色谱分析PPT课件.ppt

色谱实验综合分析报告色谱实验综合分析报告1. 提取及纯化2.薄层色谱鉴别栀子苷3.HPLC对栀子苷含量测定4.GC检测残留溶剂中药栀子中环烯醚萜苷类有效成分的色中药栀子中环烯醚萜苷类有效成分的色谱综合解析谱综合解析熔点：163℃～164℃溶解性：易溶于水，溶于乙醇，不溶于石油醚 性状：环烯醚萜苷类化合物，对α-萘酚、羟肟酸、三氯化铁呈正反应白色结晶 药理作用：栀子苷具有缓泻、镇痛、利胆、抗炎、治疗软组织损伤以及抑制胃液分泌和降低胰淀粉酶等作用 色泽：白色、类白色或浅黄色 口感与气味：无味 栀子苷简介栀子苷简介实验实验1 1 有效成分的提取及分离纯化有效成分的提取及分离纯化粗提物(120mL)⇒有效部位(5.3104g)3.结果固定相：D101型大孔吸附树脂流动相：水（自来水）原理：以吸附为主2.2.分离提分离提纯：柱色谱法栀子药材(100g)⇒粗提物(120mL)1.1.提取提取：以50%乙醇为溶剂，回流提取有效成分实验实验1 1 有效成分的提取及分离纯化有效成分的提取及分离纯化实验结果表明——大孔树脂吸附法具有吸附范围广，吸附容量大，洗脱容易，反复使用等特点，对栀子苷吸附能力较高，其纯化产物栀子苷含量高。

方法简单、可靠1.1.薄层板的铺制薄层板的铺制：硅胶-CMC 板的铺制2.2.溶液的配制溶液的配制：实验实验2 2 有效成分的薄层色谱法鉴别有效成分的薄层色谱法鉴别供试品：供试品： 要求：以50%甲醇为溶剂，配制为相当于原药材0.2g/mL的浓度 方法：(1)量取粗提液2.4mL(100g药材浓缩为120mL溶液)于10mL容量瓶定容 (2)称取有效部位粉末0.1056g(有效部位5.3014g) 于10mL容量瓶定容对照品：对照品： 要求：以乙醇为溶剂，配制成约4mg/mL的浓度以羧甲基纤维素Na为黏合剂3.3.薄层色谱法鉴别薄层色谱法鉴别：实验实验2 2 有效成分的薄层色谱法鉴别有效成分的薄层色谱法鉴别1.1.色谱条件色谱条件：实验实验3 HPLC3 HPLC测定栀子药材及提取测定栀子药材及提取物中栀子苷含量物中栀子苷含量项目项目条件条件色谱柱ODS(150mm×4.6mm，5μm)流动相乙腈-1%醋酸水溶液(15:58，V/V)流动相流速1mL/min检测波长238nm柱温室温进样量20μL实验实验3 HPLC3 HPLC测定栀子药材及提取测定栀子药材及提取物中栀子苷含量物中栀子苷含量2.2.实验步骤实验步骤实验实验3 HPLC3 HPLC测定栀子药材及提取测定栀子药材及提取物中栀子苷含量物中栀子苷含量配制溶液进样及记录线性关系考察(1)溶液配制： 实验实验3 HPLC3 HPLC测定栀子药材及测定栀子药材及提取提取物物中栀子苷含量中栀子苷含量供试品：供试品： 要求：以流动相为溶剂，配制为相当于原药材2mg/mL的浓度。

方法：(1)量取粗提液0.24mL(100g药材浓缩为120mL溶液)于10mL容量瓶定容，取1mL于10mL容量瓶定容 (2)称取有效部位粉0.1069g(有效部位5.3014g) 于100mL容量瓶定容，取1mL于10mL容量瓶定容对照品：对照品： 要求：以流动相为溶剂，精密配制成约10μg/mL、20μg/mL 、40μg/mL 、60μg/mL 、80μg/mL的浓度(2)线性关系考察实验实验3 HPLC3 HPLC测定栀子药材及提取测定栀子药材及提取物中栀子苷含量物中栀子苷含量3.3.结果 栀子药材中栀子苷含量为39.086mg/g，栀子有效部位中栀子苷含量为591.733mg/g栀子苷得率为80.396%实验实验3 HPLC3 HPLC测定栀子药材及测定栀子药材及提取提取物物中栀子苷含量中栀子苷含量实验实验4 GC4 GC检查环烯醚萜类有效检查环烯醚萜类有效部位部位中中的残留溶剂的残留溶剂1.1.色谱条件色谱条件：实验实验4 GC4 GC检查环烯醚萜类有效检查环烯醚萜类有效部位部位中中的残留溶剂的残留溶剂项目项目条件条件色谱柱SPB-1(30m×0.25mm×0.25μm)毛细管柱载气高纯氮(柱前压7Pa，分流比30：1)进样量0.5μL柱温进样口温度：230 ℃；程序升温(初始为50℃，恒温3min，变为40 ℃升温至230 ℃后，恒温5min)检测器FID检测氢焰离子化检测器选择性检测器质量型检测器2.2.实验步骤实验步骤实验实验4 GC4 GC检查环烯醚萜类有效部位检查环烯醚萜类有效部位中的残留溶剂中的残留溶剂配制溶液进样及记录样品鉴定(1)溶液配制： 实验实验4 GC4 GC检查环烯醚萜类有效检查环烯醚萜类有效部位部位中中的残留溶剂的残留溶剂对照品照品要求：以要求：以DMFDMF为溶溶剂，正丁，正丁醇醇为内内标物，配制含乙醇和物，配制含乙醇和正丁醇均正丁醇均为0.5mg/mL0.5mg/mL的的浓度。

度 供供试品品要求：以要求：以DMFDMF为溶溶剂，正丁，正丁醇醇为内内标物，配制含有效部物，配制含有效部位位0.1g/mL0.1g/mL和正丁醇和正丁醇0.5mg/mL0.5mg/mL的的浓度 内标法：由于进样量很小(0.5μL)，导致相对误差会很大所以以内标物为基准以比值的方式进行数据处理，可以提高准确度方法：量取无水乙醇方法：量取无水乙醇0.633mL0.633mL、正丁醇、正丁醇0.618mL0.618mL，以，以10mL10mL容容量瓶按照量瓶按照1 1：：1010的比例的比例稀释稀释2 2次，再以次，再以10mL10mL容量瓶定容容量瓶定容方法：量取方法：量取0.618mL0.618mL正丁正丁醇于醇于10mL10mL容量瓶定容，再容量瓶定容，再以以10mL10mL容量瓶，以容量瓶，以1 1：：1010的比例稀释的比例稀释1 1次，取次，取1mL1mL于于10mL10mL容量瓶，称取容量瓶，称取0.9846g0.9846g有效部位粉末加有效部位粉末加入同一容量瓶，加入适量入同一容量瓶，加入适量溶剂溶剂( (不超过刻度线不超过刻度线) )，振荡，振荡使固体溶解后，定容使固体溶解后，定容。

(2)样品鉴定： 按照上述色谱条件进行检测，得到供试品溶液和对照品溶液的气相色谱图实验实验4 GC4 GC检查环烯醚萜类有效检查环烯醚萜类有效部位部位中中的残留溶剂的残留溶剂3.3.结果计算结果计算实验实验4 GC4 GC检查环烯醚萜类有效部位检查环烯醚萜类有效部位中的残留溶剂中的残留溶剂哪些因素有可能影响到栀子苷的得率？思考与讨论思考与讨论栀子的前处理栀子的采集时间提取液的选择流动相的选择提取的方法 ∴以10mL容量瓶配制，即理论上需量取2.4mL粗提液 ∴以10mL容量瓶配制，即理论上需称取0.1062g有效部位粉末 ∴以10mL容量瓶配制，即理论上需量取0.024mL粗提液思路：量取0.24mL(1mL的移液吸管)，以1：10的比例稀释一次 ∴以10mL容量瓶配制，即理论上需量取1.062mg有效部位粉末思路：称取0.1062g，以1：100的比例稀释一次    。