实验诊断学课件：脑脊液及浆膜腔积液检查.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,脑脊液及浆膜腔积液检验,2,脑脊液检查,（,The examination of cerebrospinal fluid,）,脑脊液（,cerebrospinal fluid,CSF,）是存在于脑室及蛛网膜下隙内的一种无色透明液体,70%,侧脑室脉络丛通过主动分泌和超滤生成,30%,大脑和脊髓的细胞间隙形成间质液,4,脑脊液生成图,侧脑室,室间孔,第三脑室,中脑导水管,第四脑室,外侧孔和正中孔,脑脊髓蛛网膜下隙,蛛网膜绒毛,回上矢状窦,5,脑脊液的功能：,保护作用,调节作用,物质交换中介,中枢神经系统病变,血脑屏障通透性,脑脊液成分改变,通过对脑脊液的检查对神经系统疾病的诊断、疗效观察、和预后,判断有重要意义,6,一,.,标本采集,1.,适应证,有脑膜刺激征者,疑有颅内出血者,疑有脑膜白血病者,有剧烈头痛、抽搐、昏迷或瘫痪等神经系统体征而原因未明者,2.,禁忌症,颅内压显著升高，视神经乳头水肿、疑有颅内肿瘤者,凡病人处于休克、衷竭或濒危状态以及局部皮肤有炎症、颅后窝有占位性病变或伴有脑干症状者均禁忌穿刺,开放性颅脑损伤或有脑脊液漏者,7,3.,标本采集,腰椎穿刺,先作压力测定,0.69-1.76kpa(70-180mm H,2,O),三管,细菌培养,化学分析和免疫学检查,一般性状及显微镜细胞计数检查,&,每管收集,1-2,毫升 及时送检,8,二 检查内容,一、一般性状检查,1,颜色（,color,）,无色透明,（,1,）红色 出血引起,应该鉴别穿刺出血和病理性出血,鉴别,:a,三管试验,b,离心试验,c,隐血试验,9,穿刺出血和病理出血鉴别,穿刺出血：,病理出血：,1 2 3,离心,离心,OD:+,OD:-,（,2,）黄色：颅内陈旧性出血、脊髓肿瘤或蛛网,膜下腔粘连梗阻,（,3,）白色或灰白色：化脓性脑膜炎,（,4,）褐色或黑色：脑膜黑色素瘤,11,2,透明度（,diaphaneity,）：,清晰透明,WBC 300 10,6,/L,混浊,化脓性脑膜炎时，白细胞，脓样乳白混浊,结核性脑膜炎时，白细胞，呈轻度毛玻璃样混浊,病毒性脑膜炎时，仍清晰透明或微浊,12,3,凝块或薄膜（,pellicle formatioan and clot,）,正常脑脊液,24h,不凝,脑膜炎时,Fg,凝块或薄膜,急性化脓性脑膜炎，,1,2 h,凝块,结核性脑膜炎时，,12,24h,纤细的薄膜,13,1.,蛋白质（,protein,）检验,1,）,.,蛋白质定性（,Pandy test,）,A,、原理,:,蛋白 饱和石碳酸蛋白盐,结果以（,-,）（,+,）表示,B,、参考值,:,阴性，部分可呈弱阳性,二 化学检验,）,.,蛋白定量,14,中枢神经系统炎症：,化脓性脑膜炎,定性,+,定量可达,50g/L,结核性脑膜炎,定性,+,+,定量达,10 g/L,病毒性脑膜炎,定性,+,+,出血：脑及蛛网膜下腔出血时，蛋白质多轻度,脑部肿瘤、脊髓肿瘤、蛛网膜下腔粘连，蛋白质,C,、临床意义,:,蛋白质可见于,:,15,（,2,）葡萄糖,（,glucose,）,方法,葡萄糖氧化酶法,自动生化分析法,参考值,成人,2.5,4.5 mmol/L,（,45,80mg/dl,）,儿童,2.8,4.5 mmol/L,（,50,80mg/dl,）,临床意义：约为血糖,60,：细菌感染如化脑、结脑等,16,（,3,）氯化物,（,chloride,）,方法 硝酸汞滴定法 离子电极法,硫氰酸汞比色法,参考值,120-130mmol/l,临床意义：,神经系统炎症，,结核性脑膜炎,减少最显著,17,（四）酶学检查,LDH,：见于化脑、脑血管病、脑瘤等,AST:,见于脑栓塞、脑萎缩、中毒性脑病等,CK,：见于化脑、结脑、蛛网膜下腔出血等,ADA,：见于结脑等,Lzm,：见于结脑等,18,三 显微镜检查,（一）细胞计数,1.,细胞总数计数 改良牛鲍氏计数盘,少：直接计数法,多：稀释计数法，结果再乘以稀释倍数,2.,白细胞计数 冰醋酸破坏红细胞，其他同上,3.,红细胞计数 红细胞数细胞总数白细胞数,&,当穿刺损伤血管导致血性脑脊液或出血性脑血管病,时，计数细胞总数已无意义，白细胞数须经校正,19,4.,参考值,正常脑脊液内无红细胞，白细胞极少,成人 （,0-8,）,10,6,/L,儿童 （,0-10,）,10,6,/L,新生儿 （,0-30,）,10,6,/L,（,10-50,）,10,6,/L,轻度增加,（,50-100,）,10,6,/L,中度增加,20010,6,/L,显著增加,白细胞,20,（二）白细胞分类,1,、步骤：脑脊液离心沉渣涂片瑞氏染色油镜,2,、正常：主要是,M,、,L,3,、意义：,化脑,：白细胞显著增加，以,N,为主,结脑,：白细胞中度增加，早期以,N,为主，中晚期,以,L,为主,病脑,：白细胞轻度增加，以,L,为主,隐球菌脑膜炎：以,L,为主，可发现,隐球菌,脑寄生虫病：,WBC E,急性脑膜白血病：,WBC,，可见原始及幼稚细胞,化脓性脑膜炎,图注：嗜中性粒细胞数量增多，见激活单核细胞出现。

图中央见浆细胞和激活淋巴细胞各一个结核性脑膜炎,图注：以淋巴细胞反应为主，伴有嗜中性粒细胞和单核样细胞，中下方见一泡沫浆细胞病毒性脑膜炎,图注：图正中为一大淋巴样细胞，胞浆内见一圆形嗜酸性包涵体,24,四 细菌学检查,1,显微镜检查,革兰氏染色,化脓性脑膜炎时其阳性率约为,60-90%,2,细菌培养,主要用于脑膜炎奈瑟菌、链球菌、葡萄球菌、大肠埃希菌、流感嗜血杆菌分离培养,巧克力平板应放入,CO,2,烛缸，有利于脑膜炎奈瑟菌和流感嗜血杆菌、肺炎链球菌等生长,.,图注：中性粒细胞胞浆内外见大量杆菌经脑脊液细胞培养证实为大肠杆菌）,化 脓 性 脑 膜 炎,26,图注：图中隐球菌呈大小不等的球体，散在和成堆出现，可见有芽胞隐球菌脑膜炎,27,脑囊虫病,图注：典型的嗜酸性粒细胞反应，并伴有较多淋巴细胞28,五,免疫学检查,1,免疫球蛋白（,immunoglobumin,）,方法：免疫散射比浊法,参考值：,IgG:10-40mg/l,IgA,：,0-6mg/l,IgM:0-13mg/l,几种中枢神经系统疾病时脑脊液内免疫球蛋白的改变,免疫球蛋白,化脓性脑膜炎,病毒性脑膜炎,结核性脑膜炎,脑瘤,神经梅毒,IgA,IgG,IgM,IgE,30,.,结核性脑膜炎的检查：,（,1,）,抗,-TB-Ab,：,ELISA,简便，敏感度较高。

2,）,PCR,：测,TB-DNA,敏感度高（,10-20,个），假阳性高3.,神经性梅毒,CSF,检查,（,1,）,FIA-ABC,：,CSF,密螺旋体荧光抗体吸收试验,特异性好，灵敏度高2,）,USR,：梅毒血凝试验,过筛试验，灵敏度低3,）,TPHA,：梅毒确诊试验,特异性强，灵敏度高32,4,、寄生虫免疫检查,（,1,）脑囊虫：补体结合试验（,CF,）,胶乳凝集试验（,LA,）,间接红斑试验（,LHA,）,（,2,）广圆线虫：,ELISA,法,间接荧光抗体试验（,IFAT,）,（,3,）旋毛虫 单克隆抗体技术：流式细胞仪,33,六 蛋白电泳,（,protein electrophotesis,）,A,、方法：电泳前浓缩,:,透析法,载体：琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等B,、,正常脑脊液蛋白电泳分带与血清蛋白不同点：,出现较多的前白蛋白而血清中较少,-,球蛋白略高于血清,-,球蛋白仅为血清中的一半,34,C,、参考值：,前白蛋白,2-6%0.02,0.06,白蛋白,55%-65%0.55,0.65,1,球蛋白,3%-8%0.03,0.08,2,球蛋白,4%-9%0.04,0.09,球蛋白,10-18%0.10,0.18,球蛋白,4-13%0.04,0.13,35,D,、临床意义,a,、前白蛋白：脑萎缩、脑积水及中枢神经变性疾病,b,、白蛋白：脑血管病变、椎管阻塞等,c,、球蛋白：脑膜炎、脑肿瘤等,常见中枢神经系统疾病的脑脊液检查特点,压力,外观,凝固,细胞,蛋白质,葡萄糖,氯化物,细菌,化脑,浊,可有,多核,化脓菌,结核性,微浊,薄膜,早中,TB,病毒性,清,无,淋巴,N,N,阴性,隐球菌性,不定,可有,淋巴,中,隐球菌,蛛网膜下腔出血,血性,可有,RBC,不定,N,无,绿色瘤,清,无,淋巴,轻度,N,N,无,脑脓肿,浊,可有,淋巴,轻度,N,N,不定,第六节 浆膜腔积液检查,（,The examination of serous membrane fluid,）,浆膜腔：少量液体 润滑作用 浆膜腔积液,胸腔,20ml,胸水,腹腔,50ml,腹水,心包腔,10,50ml,心包积液,38,根据积液的产生原因和性质不同,漏出液（,transudate,）,非炎性积液,原因：血浆胶体渗透压降低,毛细血管内流体静脉压升高,淋巴管阻塞,渗出液（,exudate,）,炎性积液,原因：感染性 化脓菌、分支杆菌、病毒等感染,非感染性 外伤、化学物理刺激、肿瘤、,风湿性疾病等,40,标本采集,四管 细菌培养（结核检查留,10,毫升）,化学分析和免疫学检查,显微镜细胞计数检查（,EDTA-K,2,抗凝）,不抗凝观察凝集现象,&,每管收集,1-2,毫升 及时送检,41,检查项目,1.,颜色,漏出液淡黄色，渗出液不定,红色：血性,黄色脓性：化脓菌感染,乳白色：胸导管淋巴管阻塞,2.,透明度,漏出液多为清晰透明，渗出液多混浊,3.,比重,漏出液,1.018,4.,凝固性,漏出液不易凝固，渗出液 能自凝,（一）一般性状检查,42,（二）化学检测,1.,粘蛋白定性试验,（,Rivalta Test,）,原理：酸性糖蛋白,PI3-5,，在稀醋酸溶液中产生白色沉淀,漏出液多为阴性，渗出液多为阳性,2.,蛋白定量实验,方法同脑脊液蛋白定量,是鉴别漏出液和渗出液最有用的方法之一,漏出液,30g/L,3.,葡萄糖测定,漏出液接近血糖水平，渗出液往往低于血糖水平,4.,乳酸测定,乳酸浓度升高往往提示细菌感染，有助于,漏出液渗出液的判断,5.LDH,测定,渗出液,LDH,浓度升高,43,（三）显微镜检查,1.,细胞计数,方法同脑脊液检查,漏出液,WBC500,10,6,/L,2.,细胞分类,离心沉渣涂片瑞氏染色油镜分类,漏出液,L,和间皮细胞为主，渗出液可见各种细胞增多,3.,细胞学检查,如肿瘤细胞的检出可作为原发性或继发性肿瘤的诊断依据,4.,寄生虫检查,乳糜液可检查微丝蚴，阿米巴病积液可找到阿米巴滋养体,44,（四）细菌学检查,1.,镜检,离心沉渣涂片革兰染色或抗酸染色找病原菌,2.,细菌培养,（必要时）,漏出液和渗出液的鉴别诊断,鉴别要点 漏出液 渗出液,原因 非炎性所致,炎症,肿瘤化学物理刺激,外观 淡黄，浆液性 不定，可为血性脓性乳糜性,透明度 透明或微混 多混浊,比重,1.018,凝固性 不自凝 能自凝,粘蛋白定性 阴性 阳性,蛋白定量,30g/L,葡萄糖定量 与血糖相近 常低于血糖水平,细胞计数 常,500 10,6,/L,细胞分类 以,L,、间皮细胞为主 根据病因，分别以,N,、,L,为主,细菌学检查 阴性 可找到病原菌,积液,/,血清总蛋白,0.5,积液,/,血清,LDH,比值,0.6,LDH 200IU,。