紫杉醇生产工艺.ppt

制药工艺学制药工艺学 王王 娟娟  第一篇 化学制药工艺第二章 化学制药工艺路线的设计与选择第三章 化学制药的工艺研究第四章 手性制药技术第五章 氯霉素生产工艺第六章 紫杉醇生产工艺第七章 头孢氨苄生产工艺 第八章 氢化可的松生产工艺6.1 6.1 紫杉醇概述紫杉醇概述6.2 6.2 紫杉醇半合成制备原理紫杉醇半合成制备原理6.3 6.3 紫杉醇半合成工艺过程与质量控制紫杉醇半合成工艺过程与质量控制第六章第六章 紫杉醇生产工艺紫杉醇生产工艺紫杉醇生产工艺紫杉醇生产工艺6.1.1 6.1.1 紫杉醇药物紫杉醇药物6.1.2 6.1.2 紫杉醇的生产工艺路线研究紫杉醇的生产工艺路线研究6. 1 紫杉醇概述紫杉醇概述紫杉醇生产工艺紫杉醇生产工艺概述抗癌药物需求: 全球每年全球每年: : 因癌症死亡的有因癌症死亡的有600600余万余万 另有新诊断的癌症患者约另有新诊断的癌症患者约10001000余万余万 估计现有癌症患者约估计现有癌症患者约40004000万万中国每年：中国每年： 年死亡年死亡130130万人万人 新诊癌症患者约新诊癌症患者约160160万人万人 现存癌症患者总数现存癌症患者总数600600万人以上万人以上紫杉醇生产工艺紫杉醇生产工艺概述紫杉醇与β微管蛋白N端第31位氨基酸和217－231位结合，抑制微管解聚，抑制有丝分裂，使微管稳定，阻滞细胞于G2和M期,癌细胞死亡。

　　紫杉醇作用机理明确紫杉醇作用机理明确:紫杉醇生产工艺紫杉醇生产工艺概述6. 1.1 紫杉醇类药物紫杉醇类药物紫杉醇生产工艺紫杉醇生产工艺概述临床应用临床应用1)1) 晚期乳腺癌有效率为晚期乳腺癌有效率为60%60%，优于其它单种药的治，优于其它单种药的治 疗效果（疗效果（25%-30%25%-30%））2) 2) 晚期非小细胞肺癌有效率达晚期非小细胞肺癌有效率达31%31%3) 3) 对晚期卵巢癌有效率达对晚期卵巢癌有效率达30%30%4) 4) 胰腺癌好转率为胰腺癌好转率为29%29%、头颈癌、头颈癌44%44%、胃癌、胃癌24%24% 6. 1.1 紫杉醇类药物紫杉醇类药物三环二萜类化合物：三个主环的三环二萜类化合物：三个主环的二萜核和一个苯基异丝氨酸侧链二萜核和一个苯基异丝氨酸侧链紫杉醇生产工艺紫杉醇生产工艺概述紫杉醇与多烯紫杉醇理化性质紫杉醇与多烯紫杉醇理化性质分子式C47H51NO14分子量853.9211个手性中心OH(CH3)3O难溶于水，溶于难溶于水，溶于甲醇、二氯甲烷甲醇、二氯甲烷和乙腈6.1.1 6.1.1 紫杉醇药物紫杉醇药物6.1.2 6.1.2 紫杉醇的生产工艺路线研究紫杉醇的生产工艺路线研究6. 1 紫杉醇概述紫杉醇概述紫杉醇生产工艺紫杉醇生产工艺概述红豆杉与紫杉醇-原料来源问题1)天然提取工艺路线PhytonPhyton克克服服细细胞胞培培养养过过程程的的各各种种技技术术障障碍碍，，突突破破细细胞胞培培养养生生产产紫紫杉杉醇醇技术，生产过程得到技术，生产过程得到FDAFDA认证；认证；20022002年年7 7月月1010日日--Phyton, --Phyton, Inc.Inc.与与 Bristol-Myers Bristol-Myers Squibb Squibb 签签署署长长期期合作协议用细胞培养生产紫杉醇；合作协议用细胞培养生产紫杉醇；20042004年年 6 6月月 2828日日 Bristol-Myers Bristol-Myers Squibb Squibb 获总统绿色化学挑战奖。

获总统绿色化学挑战奖2)生物工程方法生产紫杉醇紫杉醇生产工艺紫杉醇生产工艺概述3)化学全合成化学全合成（1）Holton路线-线性合成途径 该路线的策略是A→AB→ABC2）Nicoloau路线-会聚式 A环和C环→ 八元B环，得到ABC三环化合物3）Danishefsky路线-会聚式 D环→ 与A和C、D环片段连接，合成八元B环 紫杉醇生产工艺紫杉醇生产工艺概述ABCD反应步骤多达20—25步大量使用手性试剂 反应条件极难控制 制备成本昂贵 具有重要的理论意义，但不 适合大规模工业生产4) 半合成紫杉醇•母核：红豆杉针叶中提取BaccatinIII（R=Ac）和10-去乙酰基巴卡亭III（10-DAB，R=H）•侧链：化学合成；侧链： (2R,3S)-3- N- -苯甲酰苯异丝氨酸避免了合成紫杉醇复杂的母环部分紫杉醇生产工艺紫杉醇生产工艺概述6.2.1 6.2.1 β-β-内酰胺侧链前体的制备内酰胺侧链前体的制备6.2.2 6.2.2 母环的保护母环的保护6.2.3 6.2.3 紫杉醇的制备紫杉醇的制备6.2 6.2 紫杉醇半合成制备原理紫杉醇半合成制备原理紫杉醇生产工艺紫杉醇生产工艺半合成工艺基础四元环的合成紫杉醇生产工艺紫杉醇生产工艺cis-1-对甲氧基苯基-3-乙酰氧基-4-苯基-2-吖叮啶酮 氧化四元环(cis-3-乙酰氧基-4-苯基-2-吖叮啶酮 )的合成水解四元环(cis-3-羟基-4-苯基-2-吖叮啶酮 )的合成硅化四元环(cis-3-(三乙硅基)-4-苯基-2-吖叮啶酮 )的合成对接四元环(cis-1-苯甲酰基-3-(三乙硅基)-4-苯基-2-吖叮啶酮)的合成6.2.1 β-内酰胺侧链前体的制备内酰胺侧链前体的制备6.2.2 母环的保护母环的保护6.2.3 紫杉醇的制备紫杉醇的制备紫杉醇生产工艺紫杉醇生产工艺半合成工艺6.2 紫杉醇半合成制备原理紫杉醇半合成制备原理10-去乙酰基巴卡亭III(10-DAB)的保护OHO18HOC6H5COO HOOOCOCH3HO71310116171214245689111531920(1) Et3SiCl(2)AcCl硅化反应：ClSi(C2H5)3:10－DAB = 40 :1惰性气体保护下反应10小时。

乙酰化反应反应温度0℃收率：72%6.2.1 6.2.1 β-β-内酰胺侧链前体的制备内酰胺侧链前体的制备6.2.2 6.2.2 母环的保护母环的保护6.2.3 6.2.3 紫杉醇的制备紫杉醇的制备紫杉醇生产工艺紫杉醇生产工艺半合成工艺6.2 紫杉醇半合成制备原理紫杉醇半合成制备原理紫杉醇合成——对接反应•选择碱；•碱的用量：核:侧链:碱=1: 5 : 2.5；•严格无水无氧；•反应温度：－40℃NPhOTESOPhOAOHOcOHOOOOTESOOCH3OPh立体构型控制•乙腈和吡啶混合液；•加入氢氟酸；•0℃反应8小时，然后室温反应10小时OHOAcOOOOTESNHPhOOOOTESOOCH3OPh紫杉醇合成——水解反应总流程图氧化四元环基础四元环羟基乙酸 乙酰氯 二氯亚砜乙酰氧基乙酰氯对氨基苯甲醚 苯甲醛亚胺水解四元环三乙基氯硅烷（Et3SiCl）硅化四元环苯甲酰氯（PhCOCl）饱和NaHCO3、MeOH硝酸铈铵、乙腈、水对接四元环10-DAB7-（三乙硅基）-10DAB2’， 7-双（三乙硅基）-紫杉醇 白色结晶粉末检验紫杉醇对接四元环Et3SiCl/Pyridine对接（nBuLi，THF）水解（HF/Pyridine，CH3CN）总流程图巴卡亭III（Baccatin III）的保护•以Et3Si作为巴卡亭III的7-羟基保护基；•以吡啶为溶剂；•巴卡亭III与三乙基氯硅烷的摩尔比为1:40Baccatin IIIOHOAcOHOOOOHOOCH3OPhEt3SiCl/PyOHOAcOHOOOOTESOOCH3OPh7-TES-Baccatin III6.3.1 6.3.1 β-β-内酰胺侧链前体制备的质量控制内酰胺侧链前体制备的质量控制6.3.2 6.3.2 母环保护的质量控制母环保护的质量控制6.3.3 6.3.3 紫杉醇制备的质量控制紫杉醇制备的质量控制紫杉醇生产工艺紫杉醇生产工艺工艺质控6.3 紫杉醇半合成工艺的质量控制紫杉醇半合成工艺的质量控制1 1、乙酰基酰氯的制备：、乙酰基酰氯的制备：羧基乙酸：乙酰氯：二甲亚砜＝羧基乙酸：乙酰氯：二甲亚砜＝1 1：：3 3：：3 3第一步：第一步：60℃60℃；第二步：；第二步：70℃70℃紫杉醇生产工艺紫杉醇生产工艺工艺质控6.3.1 β-β-内酰胺侧链前体制备的质量控制内酰胺侧链前体制备的质量控制在甲醇中混合、搅拌，室温下反应在甲醇中混合、搅拌，室温下反应4h4h。

紫杉醇生产工艺紫杉醇生产工艺工艺质控2 2、、N-N-苯亚甲基苯亚甲基-4--4-甲氧基苯胺（亚胺）的制备甲氧基苯胺（亚胺）的制备•投料比：亚胺投料比：亚胺: :乙酰氧基乙酰氯乙酰氧基乙酰氯: :三乙胺为三乙胺为1:2:31:2:3，，•条件：低温（条件：低温（<-20℃<-20℃），反应），反应8 8－－10 h10 h•环加成产物为单一顺式或反式异构体，产物的立环加成产物为单一顺式或反式异构体，产物的立体构型取决于亚胺上取代基的类型体构型取决于亚胺上取代基的类型•取代基为芳基、芳杂环、共轭烯烃时，环加成产取代基为芳基、芳杂环、共轭烯烃时，环加成产物为顺式物为顺式紫杉醇生产工艺紫杉醇生产工艺工艺质控3、基础四元环的制备、基础四元环的制备氧化反应：投料比为基础四元环氧化反应：投料比为基础四元环:硝酸铈铵为硝酸铈铵为1:5（质量比）质量比）水解反应：投料比为氧化四元环水解反应：投料比为氧化四元环:硝酸铈铵为硝酸铈铵为1:3（摩尔比），溶（摩尔比），溶剂为饱和碳酸氢钠剂为饱和碳酸氢钠-甲醇溶液室温下反应甲醇溶液室温下反应4、氧化四元环与水解四元环的制备、氧化四元环与水解四元环的制备•分离纯化方法对收率的影响。

分离纯化方法对收率的影响•碳酸钠、饱和碳酸氢钠、氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，乙酸乙酯重结晶碳酸钠、饱和碳酸氢钠、氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，乙酸乙酯重结晶•水、饱和亚硫酸氢钠溶液和饱和碳酸氢钠洗涤，旋转蒸发，得到白色固体，水、饱和亚硫酸氢钠溶液和饱和碳酸氢钠洗涤，旋转蒸发，得到白色固体，用乙酸乙酯用乙酸乙酯-正己烷重结晶正己烷重结晶•第一种方法碱用量较大，产品损失重，时间长，萃取液变黑，影响收率第一种方法碱用量较大，产品损失重，时间长，萃取液变黑，影响收率•第二种方法，洗涤较少，简化操作，提高收率，产品晶型和纯度较理想第二种方法，洗涤较少，简化操作，提高收率，产品晶型和纯度较理想紫杉醇生产工艺紫杉醇生产工艺工艺质控投投料料比比：：水水解解四四元元环环: :三三乙乙基基氯氯硅硅烷烷为为180:250180:250，，室室温温下反应下反应8 8－－12 h12 h 保保持持反反应应体体系系的的单单一一性性，，防防止止其其它它具具有有较较强强酸酸性性或或亲亲电性试剂的介入电性试剂的介入反反应应所所需需的的各各种种试试剂剂都都要要经经过过严严格格的的处处理理，，除除去去其其中中所含水分和醇类，只有这样才能保证较高的收率。

所含水分和醇类，只有这样才能保证较高的收率5、硅化四元环的制备、硅化四元环的制备紫杉醇生产工艺紫杉醇生产工艺工艺质控•投料比：四元环投料比：四元环:苯甲酰氯苯甲酰氯:三乙胺为三乙胺为 2:1 :2室温下反应下反应8~12 h•必须不断除去反应中生成的必须不断除去反应中生成的HCl，以防止其与亚，以防止其与亚氨基生成盐，加入了三乙胺来中和生成的氨基生成盐，加入了三乙胺来中和生成的HCl•必须要保证整个反应体系的单一性，不可混入其必须要保证整个反应体系的单一性，不可混入其它的能被它的能被DMAP催化的活性物质催化的活性物质•反应时可加入过量的反应时可加入过量的PhCOCl以保证以保证3-(1-乙氧乙氧乙氧乙氧基基)-4-苯基苯基-2-吖叮啶酮的完全转化吖叮啶酮的完全转化6、对接四元环的制备、对接四元环的制备紫杉醇生产工艺紫杉醇生产工艺工艺质控•巴卡亭巴卡亭III的保护：选择性保护母环的保护：选择性保护母环7-OH、、10-OH，使侧链与，使侧链与13-OH反应，合成过程关键步骤反应，合成过程关键步骤•三乙基氯硅烷为保护剂，得到单一的反应产物三乙基氯硅烷为保护剂，得到单一的反应产物•投料配比及反应时间有很大的影响：巴卡亭投料配比及反应时间有很大的影响：巴卡亭III与与三乙基氯硅烷为三乙基氯硅烷为1:20，，24 h以内无产物。

投料比为以内无产物投料比为1:30，，24 h，得到产物，但仍有大部分巴卡亭，得到产物，但仍有大部分巴卡亭III未反应投料配比为未反应投料配比为1:40，反应时间，反应时间60 h，巴卡亭，巴卡亭III完全转化为产物完全转化为产物7-三乙基硅巴卡亭三乙基硅巴卡亭III 6.3.2 母环原料保护的质量控制母环原料保护的质量控制紫杉醇生产工艺紫杉醇生产工艺工艺质控2′-2′-乙氧乙基乙氧乙基-7--7-三乙基硅三乙基硅- -紫杉醇的制备：紫杉醇的制备：•该反应对水和氧极其敏感，在惰性气体保护下进该反应对水和氧极其敏感，在惰性气体保护下进行，严格无水无氧操作行，严格无水无氧操作•反应原料和溶剂要经严格的无水处理四氢呋喃反应原料和溶剂要经严格的无水处理四氢呋喃容易吸水，四元环溶于四氢呋喃时也必须在惰性容易吸水，四元环溶于四氢呋喃时也必须在惰性气体保护下进行操作气体保护下进行操作•正丁基锂用量很关键近正丁基锂用量很关键近3 3倍量时破坏四元环倍量时破坏四元环•温度控制很关键，低于温度控制很关键，低于-45℃-45℃不能反应但亦不能不能反应但亦不能过高，温度高于过高，温度高于-20℃-20℃时母环降解。

时母环降解6.3.4 紫杉醇的制备的质量控制紫杉醇的制备的质量控制紫杉醇生产工艺紫杉醇生产工艺工艺质控•在后处理时，有机相应迅速处理，严格控制蒸除在后处理时，有机相应迅速处理，严格控制蒸除溶剂过程中温度，高温会导致紫杉醇降解，极大溶剂过程中温度，高温会导致紫杉醇降解，极大地影响产品的收率地影响产品的收率•用柱层析和重结晶方法进行纯化柱层析中常用用柱层析和重结晶方法进行纯化柱层析中常用硅胶做层析材料，用二氯甲烷、丙酮、乙酸乙酯、硅胶做层析材料，用二氯甲烷、丙酮、乙酸乙酯、石油醚等溶剂组成洗脱液进行梯度洗脱石油醚等溶剂组成洗脱液进行梯度洗脱•二次柱层析，或用重结晶方法进一步提高产品纯二次柱层析，或用重结晶方法进一步提高产品纯度，直至达到药用标准度，直至达到药用标准6.3. 4紫杉醇制备的质量控制原理紫杉醇制备的质量控制原理紫杉醇生产工艺紫杉醇生产工艺工艺质控小结小结紫杉醇与多烯紫杉醇的结构特点：手性与活紫杉醇与多烯紫杉醇的结构特点：手性与活性的关系性的关系紫杉醇半合成制备原理：工艺路线的设计与紫杉醇半合成制备原理：工艺路线的设计与制备策略，侧链制备、母环保护、对接反应制备策略，侧链制备、母环保护、对接反应机理机理紫杉醇半合成工艺过程与质量控制：关键工紫杉醇半合成工艺过程与质量控制：关键工艺和控制要点艺和控制要点紫杉醇生产工艺紫杉醇生产工艺小 结思考题思考题6-1 紫杉醇与多烯紫杉醇的化学结构有何特征？紫杉醇与多烯紫杉醇的化学结构有何特征？ 6-2 紫杉醇半合成路线的基本策略是什么？与生物合成、紫杉醇半合成路线的基本策略是什么？与生物合成、化学全合成路线进行比对分析。

化学全合成路线进行比对分析6-3 紫杉醇有几个手性中心紫杉醇有几个手性中心?在半合成过程中是如何实在半合成过程中是如何实现的？现的？ 紫杉醇生产工艺紫杉醇生产工艺思考题。