中药含量测定技术-教学材料.ppt

1第四章-复习n杂质n概念n来源n分类n重金属n概念n检查原因n检查方法n干扰物排除n最终产物n砷盐n检查原因n药典收载方法n检查中酸性SnCl2作用？ 2中药制剂含量测定技术 3方法化学方法*仪器分析方法有效成分指标性成分毒性成分 分析成分中药制剂含量测定技术5仪器分析法之紫外-可见分光光度法6A:吸光度K:吸收系数C:溶液浓度L:液层厚度 基本原理:Lamber-Beer定律紫外-可见分光光度法7uu吸收系数两种表示法：吸收系数两种表示法：u摩尔吸收系数： 一定，C=1mol/L，L=1cm时的吸光度u百分含量吸收系数/ 比吸收系数 一定，C=1g/100ml，L=1cm时的吸光度紫外-可见分光光度法*8紫外-可见分光光度法n吸收光谱（吸收曲线）：n定性依据:n 吸收峰maxn 吸收谷minn 肩峰shn定量依据:吸收峰max9光源光源单色器单色器样品池样品池检测器检测器记录装置记录装置紫紫外外| |可可见见分分光光光光度度计计数据处理数据处理报告书报告书10钨灯或卤钨灯：可见光源 3501000nm氢灯或氘灯：紫外光源 200360nm吸收池： 玻璃-能吸收UV光，仅适用于可见光区 石英-不能吸收紫外光，适用于紫外和可见光区 要求：匹配性（对光的吸收和反射应一致）光源紫外-可见分光光度法11测定波长的选择：max吸光度读数范围的选择：A=0.30.7UV 吸光度测量的条件选择样参调节光路光学性质和厚度相同样品池样品溶液，参比池空白溶液样品池参比池配制样品的溶剂空白溶液ATA+=+%100012样品A值UV-标准曲线法对照品溶液：一系列不同浓度的对照品溶液 相同条件下A为纵坐标，C为横坐标标准曲线（工作曲线）样品的浓度和含量一系列A值13标准曲线又称工作曲线。

如吸光光度法，在绘制时，首先在一定条件下配制一系列具有不同已知浓度吸光物质的标准溶液，然后在确定的波长和光程等条件下，分别测量系列溶液的吸光度，绘制A-c曲线，从而得到一条通过原点的直线，即标准曲线当需要对某未知液的浓度cx进行测定时，只需要在相同条件下测得未知液的吸光度Ax，就可由cx=Ax/b计算得出或直接在标准曲线上查得cx在实际操作中，应注意调整cx的大小，使其对应的Ax处于标准曲线的直线范围（线性范围）之内UV-标准曲线法14UV-标准曲线法 标准曲线的直线部分所对应的被测物质浓度（或含量）的范围称为该方法的线性范围15 标准曲线是依据标准系列的浓度（或含量）和其相对应的相应信号测量值来绘制的如浓度（或含量）分别为x1,x2xn，其相应信号(吸光度)的测量值分别为y1,y2yn，用简单的方法很难绘制出能准确反映y与x之间关系的标准曲线通常，用“一元线性回归法”来给出y与x的关系式 y=a+bx （1-1）式中其中 式(1-1)称为一元线性回归方程，b称为回归系数，即回归直线的斜率，a为截距UV-标准曲线法16当两个变量之间直线关系不够严格，数据的偏离较严重时，虽然也可以求得一条回归线，但是，实际上只有当两个变量之间存在某种线性关系时，这条回归线才有意义。

判断回归线是否有意义，可用相关系数r来检验相关系数的定义式为：r值在-1.0000与+1.0000之间相关系数的物理意义如下：（1）r=1时，y与x之间存在严格的线性关系，所有的yi值都在回归线上2） r=0时， y与x之间完全不存性关系3） 0r1.5n内标物为高纯度标准物质或含量已知物质n n定量分析定量分析- -内标法n n内标法是根据待测组分与内标物的峰面积比与其浓内标法是根据待测组分与内标物的峰面积比与其浓度比在一定浓度范围内呈线性关系，对组分进行定度比在一定浓度范围内呈线性关系，对组分进行定量分析，对照品溶液和供试品溶液中分别加入相同量分析，对照品溶液和供试品溶液中分别加入相同量的内标溶液，在相同条件下分别测定其中被测组量的内标溶液，在相同条件下分别测定其中被测组分和内标物的色谱峰峰面积分和内标物的色谱峰峰面积n n计算计算n校正因子的计算n含量计算71气相色谱法气相色谱法n n检验依据（检验依据（中国药典中国药典20102010年版一部年版一部471471页）页）n n【处方处方】川贝母流浸膏川贝母流浸膏45ml 45ml 桔梗桔梗45g 45g 枇杷叶枇杷叶300g 300g 薄荷脑薄荷脑0.34g0.34gn n川贝枇杷糖浆由川贝母流浸膏、桔梗、枇杷叶、薄荷脑四味中药制备而成。

薄川贝枇杷糖浆由川贝母流浸膏、桔梗、枇杷叶、薄荷脑四味中药制备而成薄荷脑具局麻作用，有薄荷的特殊香气，味初灼热后清凉，可掩盖苦味；在乙醇荷脑具局麻作用，有薄荷的特殊香气，味初灼热后清凉，可掩盖苦味；在乙醇、三氯甲烷、乙醚中极易溶解，在水中极微溶解三氯甲烷、乙醚中极易溶解，在水中极微溶解中国药典中国药典采用挥发油测采用挥发油测定法（附录定法（附录X DX D）试验，用环己烷为溶剂提取、气相色谱法测定薄荷脑含量试验，用环己烷为溶剂提取、气相色谱法测定薄荷脑含量72气相色谱法气相色谱法- -川贝枇杷糖浆中薄荷脑的测定川贝枇杷糖浆中薄荷脑的测定薄荷脑对照品气相色谱图 川贝枇杷糖浆气相色谱图n n【含量测定含量测定】照气相色谱法（附录照气相色谱法（附录 E E）测定n n色谱条件与系统适用性试验色谱条件与系统适用性试验 改性聚乙二醇毛细管柱（柱长改性聚乙二醇毛细管柱（柱长30m30m，内径，内径0.32mm0.32mm，膜厚度，膜厚度0.25m0.25m）；柱温为）；柱温为110110，分流进样，分流比为，分流进样，分流比为25:125:1，理，理论板数按萘峰计算应不低于论板数按萘峰计算应不低于50005000。

n n校正因子测定校正因子测定 取萘适量，精密称定，加环己烷制成每取萘适量，精密称定，加环己烷制成每1ml1ml含含15mg15mg的溶液，的溶液，作为内标溶液另取薄荷脑对照品作为内标溶液另取薄荷脑对照品75mg75mg，精密称定，置，精密称定，置5ml5ml量瓶中，加环量瓶中，加环己烷溶解并稀释至刻度，摇匀精密量取己烷溶解并稀释至刻度，摇匀精密量取1ml1ml，置，置20ml20ml量瓶中，精密加入量瓶中，精密加入内标溶液内标溶液1ml1ml，加环己烷至刻度，摇匀吸取，加环己烷至刻度，摇匀吸取1l1l，注入气相色谱仪，计，注入气相色谱仪，计算校正因子算校正因子n n测定法测定法 精密量取本品精密量取本品50ml50ml，加水，加水250ml250ml，照挥发油测定法（附录，照挥发油测定法（附录X X D D）试）试验，自测定器上端加水使充满刻度部分并溢流入烧瓶为止，加环己烷验，自测定器上端加水使充满刻度部分并溢流入烧瓶为止，加环己烷3ml3ml，连接回流冷凝管，加热保持微沸，连接回流冷凝管，加热保持微沸4 4小时，放冷，将测定器中的液体移至小时，放冷，将测定器中的液体移至分液漏斗中，冷凝管及挥发油测定管内壁用少量环己烷洗涤，并入分液漏分液漏斗中，冷凝管及挥发油测定管内壁用少量环己烷洗涤，并入分液漏斗中，分取环己烷液，水液再用环己烷提取斗中，分取环己烷液，水液再用环己烷提取2 2次，每次次，每次3ml3ml，用铺有无水硫，用铺有无水硫酸钠酸钠0.5g0.5g的漏斗滤过，合并环己烷液，置的漏斗滤过，合并环己烷液，置20ml20ml量瓶中，精密加入内标溶液量瓶中，精密加入内标溶液1ml1ml，加环己烷至刻度，摇匀，即得。

吸取，加环己烷至刻度，摇匀，即得吸取1l1l，注入气相色谱仪，测定，注入气相色谱仪，测定，即得n n本品每本品每1ml1ml含薄荷脑（含薄荷脑（C C1010H H2020O O）应不少于）应不少于0.20mg0.20mg73气相色谱法气相色谱法- -川贝枇杷糖浆中薄荷脑的测定川贝枇杷糖浆中薄荷脑的测定n n校正因子测定校正因子测定 精密称定环己酮精密称定环己酮75.15mg75.15mg，置，置5ml5ml量瓶中，加无水量瓶中，加无水乙醇适量溶解并稀释至刻度，作为内标溶液另精密称取薄荷乙醇适量溶解并稀释至刻度，作为内标溶液另精密称取薄荷脑对照品脑对照品73.26mg73.26mg，置，置5ml5ml量瓶中，加环己烷溶解并稀释至刻度量瓶中，加环己烷溶解并稀释至刻度，摇匀精密量取，摇匀精密量取1ml1ml，置，置20ml20ml量瓶中，精密加入内标溶液量瓶中，精密加入内标溶液1ml1ml，加环己烷至刻度，摇匀吸取，加环己烷至刻度，摇匀吸取1l1l，注入气相色谱仪，计算，注入气相色谱仪，计算校正因子校正因子n n测定法测定法 精密量取本品精密量取本品50ml50ml，加水，加水250ml250ml，照挥发油测定法（附，照挥发油测定法（附录录X X D D）试验，自测定器上端加水使充满刻度部分并溢流入烧瓶）试验，自测定器上端加水使充满刻度部分并溢流入烧瓶为止，加环己烷为止，加环己烷3ml3ml，连接回流冷凝管，加热保持微沸，连接回流冷凝管，加热保持微沸4 4小时，小时，放冷，将测定器中的液体移至分液漏斗中，冷凝管及挥发油测放冷，将测定器中的液体移至分液漏斗中，冷凝管及挥发油测定管内壁用少量环己烷洗涤，并入分液漏斗中，分取环己烷液定管内壁用少量环己烷洗涤，并入分液漏斗中，分取环己烷液，水液再用环己烷提取，水液再用环己烷提取2 2次，每次次，每次3ml3ml，用铺有无水硫酸钠，用铺有无水硫酸钠0.5g0.5g的漏斗滤过，合并环己烷液，置的漏斗滤过，合并环己烷液，置20ml20ml量瓶中，精密加入内标溶量瓶中，精密加入内标溶液液1ml1ml，加环己烷至刻度，摇匀，即得。

吸取，加环己烷至刻度，摇匀，即得吸取1l1l，注入气相色，注入气相色谱仪，测定，即得谱仪，测定，即得n n实验数据：实验数据：m m内内为为75.15mg75.15mg、m m对对为为73.26mg73.26mg；A A内内=851302.0=851302.0、A A对对=798023.5=798023.5、 =841603.2=841603.2、A A供供=814180.5=814180.574气相色谱法气相色谱法- -川贝枇杷糖浆中薄荷脑的测定川贝枇杷糖浆中薄荷脑的测定75气相色谱法气相色谱法- -川贝枇杷糖浆中薄荷脑的测定川贝枇杷糖浆中薄荷脑的测定 n检验依据（中国药典2010年版一部1222页）n【检查】乙醇量 应为60%70%（附录 M）n测定:精密量取恒温至20的颠茄酊8ml和正丙醇5ml，置100ml容量瓶中，加纯化水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液精密量取恒温至20的无水乙醇5ml和正丙醇5ml，置100ml容量瓶中，加纯化水稀释至刻度，摇匀，作为标准溶液取标准溶液和供试品溶液各2l，连续进样3次，测得校正因子（f）分别为0.6925、0.6921、0.6918AX/AS分别为1.466、1.458、1.431。

求出该供试品乙醇量及其相对标准偏差（RSD）76气相色谱法气相色谱法- -颠茄酊中乙醇量的检查颠茄酊中乙醇量的检查 77气相色谱法气相色谱法- -颠茄酊中乙醇量的检查颠茄酊中乙醇量的检查 78气相色谱法气相色谱法79适用性浸出物测定有效成分不清楚的无定量方法的有效成分溶解性能药用部位制剂处方溶剂浸出物含量质量n测定方法n水溶性浸出物测定法 n醇溶性浸出物测定法 n挥发性醚浸出物测定法n前处理n粉碎二号筛（水、醇）n四号筛（醚）80浸出物测定81水溶性浸出物测定法溶剂：水水溶性成分方法冷浸法热浸法不含或少含淀粉、黏液质浸出物测定n水溶性浸出物测定法n冷浸法:取供试品约4g，称定重量，置250300ml的锥形瓶中，精密加入水100ml，塞紧，冷浸，前6小时内时时振摇，再静置18小时，用干燥滤器迅速滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液20ml，置己干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴蒸干后，于105干燥3小时，移置干燥器中，冷却30分钟，迅速精密称定重量，除另有规定外，以干燥品计算供试品中水溶性浸出物的含量（%）n热浸。