虎杖提取工艺的探讨.doc

虎杖提取工艺的探讨【摘要】目的：探寻虎杖有效成分提取的最佳工艺条件方法：运用超声技术辅助提 取虎杖的虎杖廿，采用高效液相测定其含量，辅以适当的分析及实验对比结果：提取方法 影响大于提取次数，大于溶剂量优选条件为采用超声辅助I叫流提取3次加入20倍的溶剂量 结论：该方法稳定，可靠，简便，快速，准确关键词】虎杖；提取工艺；提取率虎杖为蓼科植物虎杖Polygonum CuspidatumSicb. et Zucc.的T燥根茎及根［1］具有 清热解毒，活血定痛，祛风利湿，化痰止咳，泻下通便的功效，其制剂日前许多法定标准及 各类文献均有记载，多数厂家的提取工艺大都采用水煮醇沉法或醇提法，其法存在一些不合 理因素，从而影响了成品的主要成分含最，为了进一步提高产品质量，我们对虎杖的提取工 艺进行了探讨并对提取溶媒的用量，提取方法，提取次数等工艺条件进行了实验，并以虎杖 甘为指标进行提取条件论证及含量测定通过实验对比，从中选择最佳提取T艺条件希望 可以为虎杖有效成分提取的新方法研究提供参考1仪器与试药1.1仪器高效液相色谱仪（岛津SPD-10AVP监测器，岛津LC-10ATVP泵），柱温箱（汉邦HB-230A 型,汉邦科技有限公司）,25KIIz超声波清洗器（KQ2200E型,昆山市超声仪器有限公司）,十 力分之一电了天平（梅特勒•托利多，瑞士梅特勒•托利多仪器有限公司），万分Z—电了天 平（梅特勒•托利多，瑞士梅特勒•托利多仪器有限公司）。

1.2试药虎杖廿对照品（中国药品生物制品坚定所,编号111575-200502,供含量测定用）,乙 醇（分析纯，南京宁试化学试剂有限公司），乙腊（色谱纯，上海陆部化学试剂厂），水（超 纯水），虎杖（批号20061206,安徽协和成药业有限公司，由木厂质量部陈主任鉴定）2方法与结果2.1因素与水平根据相关文献报道和预实验，确定正交试验的考察因素为溶剂的用量A,提取次数B,提 取方法C各因素选取3个水平，采用L9 （33）正交表安排试验，见表1表1因素水平2. 2色谱条件色谱柱（SinoChrom ODS —BP C185 u m4. GinmX200mm）,流动相：乙赭一水（23 ： 77）,紫 外检测波长：306nm,流速：0. 8mL・min-1,柱温:25度,进样＞：10uLo在该色谱条件下, 虎杖廿与木品其它组分达到基线分离，与其相邻峰的分离度大于1.5,按虎杖廿峰计算理论 塔板数大于3000 o对照品（1虎杖甘）供试品（1虎杖甘）2.3对照品制备：精密称取经五氧化二磷为干燥剂减压干燥24小时的虎杖廿对照品 11.26mgo置25mL量瓶中,加乙醇溶解并稀释至刻度摇匀,精密量取lmL,置25mL量瓶中, 加乙醇至刻度。

摇匀，即得（C对=18. 02mg - L-l）o2. 4线性关系分别精密吸取2. 3项下虎杖昔对照品溶液2.0, 4.0, 8. 0, 12.0, 16.0和20. OmL进样， 以峰血积积分值为纵坐标（Y）,虎杖廿的进样量为横坐标（X）进行线性冋归，得到冋归方稈 为:Y=7. 1606X+0. 5551, r二0.9999,结果表明虎杖昔进样量在36. 04-360. 40mg范围内呈良 好的线性关系2. 5精密度试验精密吸取对照品溶液10 uL,重复进样5次，测得对照品溶液峰面积，计算RSD为0.6% （n=5）表明精密度良好2.6稳定性试验：精密吸取同一供试品溶液10uL,分别于0, 1, 2, 4, 8和24小时进 行测定,结果24小时内测定结果稳定,RSD为1.05% 5=6）2. 7重复性试验取同批样品（批号20061206）5份，按2. 9样品测定项下所述方法测定，结果RSD为1. 74%, 结果表明本方法重现性良好2. 8加样冋收率试验精密取己知含量的虎杖粉末0.02g （样品含量为1238. 4 u g • g-1） 5份,分别置25mL量 瓶中，各精密加入一定浓度的对照品溶液（2. 3项下对照品溶液）5mLo加乙醇至25mL,摇匀， 照供试品溶液同法制备。

按上述色谱条件，每次进样10 uL,测定虎杖廿含量，虎杖廿平均 回收率为98. 99%, RSD为1. 54%o测定结果见表22. 9样品测定精密取木品虎杖粉末0. 02g,称定后置25mL 瓶中加乙醇适量，采用适当方法提取1 小时，［2］取出避光放冷至室温用乙醇稀释至刻度，摇匀，过滤取续滤液作为供试品溶液, 精密吸取供试品溶液10uL,按上述色谱条件测定，分别对在不同因索下制备的供试品测定, 测定结果见表3表3正交实验虎杖廿含量测定结果3分析和结论根据表3育观分析可知，3因素对实验结果影响的程度为CBA,即提取的方法影响最大, 其次是提取的次数，最后是溶剂的用量结合备因素K值的大小可知最优的［3］T艺条件是C >B>A即采用冋流加超声的方法，提取3次，加入20倍的溶剂量由方差分析可知，在木 实验的考察范I飼内，3因素对虎杖廿的提取都有显著煤响木实验利用高效液相（HPLC）测定虎杖廿的含量，方法稳定可靠，准确性高，操作简单 并且通过正交试验确立了最优的丁•艺条件但本文最为重要的意义在于超声波提取技术辅助 冋流提取的应用，［4］虽然由于没有适合大生产的提取设备，以及超声波提取设备的工稈化 暂时无法向产业化发展，但这一技术的应用为将来进一步的工业化生产提供了参考。

参考文献［1］ 中国药典［S］. —部.2005 : 145［2］ 谭桂莲,秦邦才.时珍国医药［J］. 2006 （1）： 4L3］原思通.医用中药饮片学［M］.中华人民共和国人民卫生出版社.2001 : 135［4］谢秀琼，周叔芳，韩丽.现代中药技术［M］.北京：化学工业出版社.2004 : 38。