常用溶液的配制.docx

一、常用溶液的配制（一）溶液配制注意事项1. 药品要有较好的质量 试剂分为优级纯（保证试剂，Guaranteed reagent, G. R.）、分析试剂（Antalytical reagent, A. R.）化学纯（Chemical pure, C. P.） 和实验试剂（Laboratory reagent, L. R.）等等工业用的化学试剂，杂质较多， 只在个别情况下应用,如配洗液用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等2. 药品称量要精确3. 配制试剂用水应用新鲜的去离子水或双蒸馏水,比电阻值在50万欧姆以上, pH在5.5〜7.0之间才可应用，在组织培养等特殊用途时应注意此项要求，配制一般 化验用溶液只要求用双蒸馏水或去离子水4. 配好后的溶液，应立即除菌处理（如高压灭菌、抽滤或加抑菌物质），以 防杂菌生长二） 0.067 （1/15） Mol/L磷酸缓冲液1. 1/15Mol/L磷酸二氢钾溶液的配制：称取磷酸二氢钾（KH2PO4，A. R.） 9.08g，用蒸馏水溶解后，倾入1 000ml容量瓶内，再稀释至刻度（1 000ml ）2. l/15Mol/L磷酸二氢钠溶液的配制：称取无水磷酸氢二钠（Na2HPO4, A.R.） 9.47g （或者Na2HPO4・2电0 11.87g ）用蒸馏水溶解后，放入1 000ml容量瓶内， 再加蒸馏水稀释至刻度（1 000ml 。

3. 按附表的比例，配制成不同pH值的缓冲溶液附表 1 磷酸盐缓冲液配制法（单位：毫升）pH1/15Mol/LNa2HPO41/15Mol/LKH PO2 4 pH1/15Mol/LNa2HPO41/15Mol/LKH PO2 4 5.88.092.07.166.623.45.99.990.17.272.028.06.012.287.87.376.823.26.115.384.77.380.819.26.218.681.47.584.115.96.322.477.67.687.013.06.426.773.37.789.410.66.531.868.27.891.58.56.637.562.57.993.26.86.743.556.58.894.75.36.849.650.48.195.84.26.955.444.68.297.03.07.061.138.98.498.02.0(三)0.15Mol/L PB 液附表20.15Mol/LPB液配制法pH°.15Mol几 ^HPq(mlO.WM1几 NaHoPq(ml)6.426.573.56.637.562.56.849.051.07.061.039.07.272.028.07.481.019.07.687.013.0Na2HPO4 ・ 2H2O 分子量=175.05 0.15Mol/L 溶液含 26.7g/L。

Na2HPO4 ・ 12H2O 分子量=358.22 0.15Mol/L 溶液含 53.7g/LNaH2PO4 ・ H2O 分子量=138.00 0.15Mol/L 溶液含 20.7g/LNaH2PO4 ・ 2H2O 分子量=156.03 0.15Mol/L 溶液含 23.4g/L四) 0.2Mol/L PB 缓冲液附表3 0.2mol/L PB缓冲液配制法pH0.2 Mol/L NaHPO (ml2 40.2Mol/L NaHPO (ml2 45.88.092.06.012.387.76.218.581.56.426.573.56.637.562.56.849.051.07.061.039.07.272.028.07.481.019.07.687.013.07.891.58.58.094.75.30.2Mol/L Na2HPO4 ・ 2 H2O 溶液 35.61g/L Na2HPO4 ・ 12 H2O 溶液含 71.64g/L 0.2Mol/LNaH2PO4 ・也0 溶液含 27.60g/L NaH2PO4 ・ 2 H2O 溶液含 31.21g/L欲配0.1Mol/L PB缓冲液则在0.2Mol/L PB缓冲液的基础上加也0稀释1倍即 可。

欲配制 PBS 液时，则在溶液中加 0.85％的 NaCl 溶液即可五）无钙镁离子磷酸缓冲盐水（PBS）（0.15Mol/L PH 7.2）8.0g0.2gNaClKClNa2HPO4 1.15g（如为 Na2HPO4 ・ 12H2O，则为 2.89g）KH2PO4 0.2g将上述试剂依次溶于1 000ml去离子水中，完全溶解后，115°C高压灭菌 10min~15min,存在4C冰箱中备用此液可用于配制和稀释细胞分散剂以及洗涤 细胞培养物六）硼酸盐缓冲液（Bora.te saline buffer）1 •硼酸（h3bo3）0.2Mol/L 硼酸：硼酸 12.37g 加水至 1 000ml2•硼砂（Na2B4O7）0.05Mol/L 硼砂：硼砂 19.07g 加水至 1 000ml附表4 不同pH的0.2Mol/L硼酸缓冲液配制法pH 0.05Mol/L 硼砂 0.2Mol/L 硼酸 pH 0.05Mol/L 硼砂 0.2Mol/L 硼酸(ml)(ml)ml(ml)7.41.09.08.23.56.57.61.58.58.44.55.57.82.08.08.76.04.08.0 3.0 7.0 9.0 8.0 2.0（七） 巴比妥缓冲液1. pH8.2离子强度0.05MO1/L巴比妥缓冲液巴比妥钠 47.6g蒸馏水 3 000ml1.17N HCl 55.0ml（1.17 N HCl=193ml 浓 HC1 加 1 807ml 蒸馏水）⑴ 将4.76g巴比妥钠溶于3 000ml蒸馏水。

⑵ 加 1.17 N HCl 55ml⑶ 用HCl调节pH到8.2，并加蒸馏水至4 265ml2. pH8.4 0.06Mol/L巴比妥缓冲液巴比妥 1.84g巴比妥钠 10.30g加蒸馏水至 1 000.00ml3. pH8.6 0.06Mol/L巴比妥缓冲液巴比妥 1.66g巴比妥钠 12.76g加蒸馏水 1 000.00ml（八） 0.2Mol/L醋酸盐缓冲液 见表附表5附表5 0.2Mol/L醋酸盐缓冲液配制法pH0.2Mol/LTris (ml)0.1Mol/LHCl (ml)pH0.2Mol/LTris (ml)0.1Mol/LHCl (ml)23 °C37 C23 C37 C9.108.952558.067.902527.58.928.76257.57.967.822530.08.758.602510.57.877.732532.58.628.482512.57.777.632535.08.508.372515.57.667.522537.58.408.272517.57.547.402540.08.328.182520.07.367.222542.5（九）三羟甲基甲烷一盐酸缓冲液（Tris—HCl缓冲液）不同 pH， 0.05Mol/L25ml0.2Mol/L三羟甲基氨基甲烷加x ml0.1NHCl,加水稀释至100ml （见下表）附表 6 Tris—HCl 缓冲液配制法pH0.2Mol/LTris(ml)0.1NHCl(ml)pH0.2Mol/LTris(ml)0.1NHCl(ml)23 °C37 C23 C37 C9.108.962558.057.902527.58.928.78257.57.967.822530.08.748.602510.07.877.732532.58.628.482512.57.777.632535.08.508.372515.07.667.522537.58.408.272517.57.547.402540.08.328.182520.07.367.222542.58.238.102522.57.207.052545.08.148.002525.025三羟甲基氨基甲烷（Tris）分子量=121.140.2Mol/L三羟甲基氨基甲烷：Tris24.23g,加水至1 000ml。

0.1NHC1 :取 HCl8.6ml，加水至 1 000ml十）0.5Mol/L pH9.5碳酸盐缓冲液NaHCO3 3.70gNa2CO3 0.60g溶于 600.00ml 蒸馏水中即得不用时塞紧瓶塞，以免吸收空气中二氧化碳使PH下降最好小量配制十一）甘油磷酸缓冲液1. 配制pH8.0磷酸缓冲液0.1Mol/L NaHPO 94.50ml240.1N NaHPO 5.50ml24混合即可2. 9份甘油与1份pH8.0磷酸缓冲液混合，即为甘油磷酸缓冲液用途：用于免疫荧光试验十二） Hank's 液1 .贮存液NaCl80.00gKCl4.00gNa HPO ・ 12 HO2 4 21.52gKH PO240.60g葡萄糖 4.00g0.4％酚红液 50.00ml双馏水加至 100.00ml115°C高压灭菌15m in,冰冻保存2．工作液贮存液 1 份双馏水 9 份115C高压灭菌15min临用时用灭菌的5.6%NaHCO3液调pH值至7.2左右 溶液呈橙红色）十三）萘（钠）氏试剂（Nessler's reagent）配方 1：氯化汞6.0g碘化钾12.4g20% NaOH30ml加蒸馏水至100ml配方 2：碘化汞11.5g碘化钾8g蒸馏水50ml（完全溶解后）过滤，加 20% NaOH 50ml。

用途：检测溶液中氨离子十四）阿氏（Alsever's）液葡萄糖2.05g柠檬酸钠0.80g氯化钠0.42g蒸馏水100ml溶解后，以10%柠檬酸调节pH至6.1,过滤，分装，10磅10min灭菌。