中药中香豆素类化合物的提取分离技术.ppt

山西生物应用职业技术学院山西生物应用职业技术学院 山西生物应用职业技术学院山西生物应用职业技术学院 山西生物应用职业技术学院山西生物应用职业技术学院 山西生物应用职业技术学院山西生物应用职业技术学院中药化学实用技术学习情景四——中药中香豆素(Coumarin)类化学成分的提取分离技术学习情境四学习情境四 中药中香豆素类化合物的提取分离技术中药中香豆素类化合物的提取分离技术2掌握掌握秦皮中香豆素秦皮中香豆素的提取分离原理及的提取分离原理及操作技术；操作技术；熟悉蛇床子中香豆熟悉蛇床子中香豆素的提取分离原理素的提取分离原理及操作技术；及操作技术；了解前胡中香豆素了解前胡中香豆素的提取分离原理及的提取分离原理及操作技术操作技术知识要求知识要求3能力要求能力要求学习目标学习目标1掌握中药中香豆素掌握中药中香豆素类化学成分的提取类化学成分的提取分离原理及操作技分离原理及操作技术熟练进行秦皮、熟练进行秦皮、蛇床子中香豆素蛇床子中香豆素的提取分离操作；的提取分离操作；能进行前胡中香能进行前胡中香豆素的提取分离豆素的提取分离操作教学内容教学内容学习学习提示提示香豆素类化学成分的结构、性香豆素类化学成分的结构、性质及提取分离知识质及提取分离知识任务一任务一实训实训实训实训秦皮中香豆素类化合物的提取秦皮中香豆素类化合物的提取分离技术分离技术 秦皮中香豆素类成分的的提取秦皮中香豆素类成分的的提取分离及鉴定分离及鉴定 学习提示学习提示香豆素的结构与特点香豆素的结构与特点一一二三三 香豆素的理化性质及检识香豆素的理化性质及检识 香豆素类化学成分的提取分离香豆素类化学成分的提取分离 命命 名名香豆素最早由豆香豆素最早由豆科植物香豆中提科植物香豆中提取获得，并且具取获得，并且具有芳香气味，故有芳香气味，故而命名为香豆素。

而命名为香豆素定定 义义是具有苯骈是具有苯骈α-吡喃吡喃酮母核的一类天然酮母核的一类天然化合物的总称，在化合物的总称，在结构上可以看成是结构上可以看成是顺邻羟基桂皮酸失顺邻羟基桂皮酸失水而成的内酯水而成的内酯分布与活性分布与活性广泛分布于高等植广泛分布于高等植物中，特别在被子物中，特别在被子植物如伞形科、芸植物如伞形科、芸香科、豆科等科中香科、豆科等科中多见在某些真菌多见在某些真菌中也发现有香豆素中也发现有香豆素成分的存在成分的存在香豆素有多方面的香豆素有多方面的生理活性，祖师麻生理活性，祖师麻中分离的瑞香素有中分离的瑞香素有抗炎和止痛作用；抗炎和止痛作用；蛇床子中分离出的蛇床子中分离出的蛇床子素能治疗脚蛇床子素能治疗脚癣、湿疹等病癣、湿疹等病香豆素香豆素顺式邻羟基桂皮酸 苯骈α-吡喃酮一、一、 香豆素的香豆素的结构类型结构类型简单香豆素类简单香豆素类呋喃香豆素类呋喃香豆素类吡喃香豆素类吡喃香豆素类其他香豆素其他香豆素 简单香豆素简单香豆素 仅在苯核上具有取代基的香豆素常见取代基为仅在苯核上具有取代基的香豆素常见取代基为羟基、甲氧基、亚甲氧基和异戊烯氧基等这一类香羟基、甲氧基、亚甲氧基和异戊烯氧基等。

这一类香豆素多数在豆素多数在C7C7位上连有含氧基团，位上连有含氧基团，7-7-羟基香豆素（伞羟基香豆素（伞形花内酯）可以认为是香豆素类成分的母体，其他如形花内酯）可以认为是香豆素类成分的母体，其他如在在C5C5、、C6C6、、C8C8位上也会有含氧基团取代异戊烯基常位上也会有含氧基团取代异戊烯基常连接在连接在C6C6和和C8C8上 呋喃香豆素呋喃香豆素由香豆素核上的异戊烯基与邻位酚羟基环合而成由香豆素核上的异戊烯基与邻位酚羟基环合而成成环后有时可因降解而失去成环后有时可因降解而失去3个个C原子呋喃香原子呋喃香豆素又分为线型和角型两种类型豆素又分为线型和角型两种类型1.线型分子线型分子 由由C6-异戊烯基与异戊烯基与C7-羟基环合而成（即羟基环合而成（即6，，7-呋喃香呋喃香1.豆）豆），，3个环是处于一直线上的；个环是处于一直线上的； 补骨脂内酯补骨脂内酯 花椒毒内酯花椒毒内酯 2.角形分子角形分子 由由C8-异戊烯基与异戊烯基与C7-羟基成环（即羟基成环（即7，，8-呋喃香素），呋喃香素）， 三个环处在一折线上。

三个环处在一折线上 异补骨脂异补骨脂 茴芹内酯茴芹内酯  吡喃香豆素吡喃香豆素由香豆素苯环上异戊烯基和邻位羟基环合形成由香豆素苯环上异戊烯基和邻位羟基环合形成2 2，，2-2-二甲基二甲基αα- -吡喃环结构吡喃环结构同呋喃香豆素类似，也分成线型（6，7-吡喃香豆素）和角型（7，8-吡喃香豆素）两种类型[根据酬和位置分]花椒内酯花椒内酯 邪蒿内酯邪蒿内酯 其他香豆素其他香豆素主要包括指在主要包括指在α-α-吡喃酮环上有取代的一类香豆素（多在吡喃酮环上有取代的一类香豆素（多在C3C3或或C4C4上，例如上，例如calanolidecalanolide A A）；双香豆素类（双七叶内脂）；）；双香豆素类（双七叶内脂）；异香豆素类（茵陈内脂）异香豆素类（茵陈内脂）calanolide A茵陈内酯茵陈内酯紫苜蓿酚紫苜蓿酚  内酯环内酯环的水解的水解二、香豆素二、香豆素的理化性质的理化性质溶解性溶解性性状性状显色显色反应反应游离香豆素多为结晶性物质，有一游离香豆素多为结晶性物质，有一定熔点，多有芳香气味。

分子量小定熔点，多有芳香气味分子量小的有挥发性，能随水蒸气蒸出，并的有挥发性，能随水蒸气蒸出，并能升华 香豆素苷多数无香味和挥香豆素苷多数无香味和挥发性，也不能升华发性，也不能升华αα、、β-β-不饱和内不饱和内酯环在稀碱液的酯环在稀碱液的条件下，可被水条件下，可被水解开环，生成顺解开环，生成顺邻羟基桂皮酸盐，邻羟基桂皮酸盐，该盐经酸化即闭该盐经酸化即闭环恢复成原来的环恢复成原来的内酯结构，该性内酯结构，该性质可用于提取分质可用于提取分离1.1.内酯的颜色反应内酯的颜色反应（异羟肟酸铁反应（异羟肟酸铁反应 ））2.2.酚羟基的颜色反酚羟基的颜色反应应3.Gibb’s3.Gibb’s反应反应 4.Emerson4.Emerson反应反应 游离香豆素能溶于游离香豆素能溶于沸水，易溶于甲沸水，易溶于甲（乙）醇、氯仿、（乙）醇、氯仿、乙醚等，可溶于石乙醚等，可溶于石油醚 香豆素苷香豆素苷类能溶于水、甲醇、类能溶于水、甲醇、乙醇，而难溶于乙乙醇，而难溶于乙醚、苯等极性小的醚、苯等极性小的有机溶剂有机溶剂荧光性荧光性香豆素母核本身无荧光，但香豆素母核本身无荧光，但羟基香豆素类化合物在紫外羟基香豆素类化合物在紫外光下大多显蓝色或蓝绿色荧光下大多显蓝色或蓝绿色荧光，在碱液中更加显著。

香光，在碱液中更加显著香豆素的荧光性质可用于香豆豆素的荧光性质可用于香豆素成分的检识鉴别素成分的检识鉴别色谱色谱检识检识1.1.薄层色谱法薄层色谱法2.2.纸色谱法纸色谱法内酯环的水解内酯环的水解 【【注注】】如果与碱液长时间加热，水解产物顺如果与碱液长时间加热，水解产物顺邻羟桂皮酸衍生物则转变为邻羟桂皮酸衍生物则转变为反邻羟基桂皮酸反邻羟基桂皮酸的衍生物，再经酸化也不能环合成内酯，故的衍生物，再经酸化也不能环合成内酯，故提取时要注意碱的浓度与作用时间提取时要注意碱的浓度与作用时间内酯的颜色反应内酯的颜色反应 “异羟肟酸铁反应异羟肟酸铁反应” 在碱性条件下，内酯开环，在碱性条件下，内酯开环，与盐酸羟胺中的羟基缩合生成异羟肟酸，然后与盐酸羟胺中的羟基缩合生成异羟肟酸，然后在酸性条件下再与三价铁盐络合而显红色在酸性条件下再与三价铁盐络合而显红色 酚羟基的颜色反应酚羟基的颜色反应 ①①三氯化铁反应三氯化铁反应 具有酚羟基取代的香豆素类在水溶液中可与具有酚羟基取代的香豆素类在水溶液中可与Fe3+络合而产生绿色至墨绿色沉淀络合而产生绿色至墨绿色沉淀②②重氮化反应重氮化反应 若酚羟基的邻对位无取代时，可与重氮化试剂反应若酚羟基的邻对位无取代时，可与重氮化试剂反应产生红色至紫红色。

产生红色至紫红色 其他的颜色反应其他的颜色反应 ①① Gibb’s反应反应 香豆素类成分在碱性条件（香豆素类成分在碱性条件（pH 9~10）下内酯环水解生成酚羟）下内酯环水解生成酚羟基，如果其对位（基，如果其对位（6位）无取代，与位）无取代，与2，，6－二氯苯醌氯亚胺－二氯苯醌氯亚胺（（Gibb’s试剂）反应显蓝色试剂）反应显蓝色 ②② Emerson反应反应与与Gibb’s反应类似，香豆素类成分如在反应类似，香豆素类成分如在6位无取代，内酯环在碱位无取代，内酯环在碱性条件下开环后与性条件下开环后与4－氨基安替比林和铁氰化钾（－氨基安替比林和铁氰化钾（Emerson试剂）试剂）显红色  三三 香豆素的提取与分离香豆素的提取与分离溶剂提取法香香豆豆素素的的提提取取与与分分离离提取提取 分离分离 碱溶酸沉法水蒸气蒸馏法色谱法 酸碱分离法超临界流体萃取法分步结晶法真空升华或蒸馏法任务一任务一 秦皮中香豆素类化学成分的提取分离技术秦皮中香豆素类化学成分的提取分离技术 学习目标学习目标一一二三三秦皮中香豆素类化学成分的提取分离技术秦皮中香豆素类化学成分的提取分离技术必备知识五四六相关知识链接及拓展 课堂互动目标测试一一 学习目标学习目标2掌握秦皮中香豆素掌握秦皮中香豆素类化合物的提取、类化合物的提取、分离及鉴定技术。

分离及鉴定技术熟悉秦皮中香豆素熟悉秦皮中香豆素类化合物的结构及类化合物的结构及性质了解秦皮中香豆素了解秦皮中香豆素类化合物的存在及类化合物的存在及生物活性生物活性知识要求知识要求3能力要求能力要求1掌握秦皮中香豆素掌握秦皮中香豆素类化学成分的提取类化学成分的提取分离原理及操作技分离原理及操作技术 熟练进行秦皮中熟练进行秦皮中香豆素类化合物香豆素类化合物的提取、分离及的提取、分离及鉴定操作鉴定操作学会秦皮中香豆学会秦皮中香豆素类化合物的色素类化合物的色谱鉴定技术谱鉴定技术学习目的二 秦皮中香豆素类化学成分的提取分离技术 秦秦皮皮为为木木犀犀科科植植物物苦苦栎栎白白蜡蜡树树Fraxiuusrhyuchophylla Hance.、、白白蜡蜡树树F. chinensis Roxb.、、尖尖叶叶白白蜡蜡树树F.chinensis Roxb. Var. acuminate Lingelsh. 或或宿宿柱柱白白蜡蜡树树F. stylosa Lingelsh. 的的干干燥燥枝枝皮皮或或干干皮皮具具有有清清热热燥燥湿湿、、收收涩涩、、明明目目等等功功效效临临床床主主治治慢慢性性菌菌痢痢，，对对慢慢性性支支气气管管炎炎亦亦有有一一定定疗疗效效。

秦秦皮皮含含有有七七叶叶内内酯酯、、七七叶叶苷苷、、秦秦皮皮素素以以及及秦秦皮皮苷苷等等香香豆豆素素类类化化合合物物，，此此外外还还有有鞣鞣质质、、皂皂苷苷、、树树脂脂和和脂脂溶溶性性色色素素等等成成分分七七叶叶内内酯酯和和七七叶叶苷苷为为其其主主要要成成分分，，具具有有抗抗炎炎、、镇镇痛痛、、止止咳咳、、祛祛痰痰与与平平喘喘等等功功效秦皮秦皮中中七叶内酯和七叶苷的提取分离七叶内酯和七叶苷的提取分离工艺流程工艺流程 课课 堂堂 互互 动动 用95%乙醇回流提取和减压浓缩是各应注意什么问题?（三）秦皮中香豆素类的提取分离（三）秦皮中香豆素类的提取分离（二）秦皮中主要有效成分的性质（一）秦皮中主要有效成分及结构（一）秦皮中主要有效成分及结构三三 必备知识必备知识（一）秦皮中主要有效成分及结构 秦皮含有七叶内酯、秦皮含有七叶内酯、七叶苷、秦皮素以及秦皮七叶苷、秦皮素以及秦皮苷等香豆素类化合物，此苷等香豆素类化合物，此外还有鞣质、皂苷、树脂外还有鞣质、皂苷、树脂和脂溶性色素等成分七和脂溶性色素等成分七叶内酯和七叶苷为其主要叶内酯和七叶苷为其主要成分，具有抗炎、镇痛、成分，具有抗炎、镇痛、止咳、祛痰与平喘等功效。

止咳、祛痰与平喘等功效 glc-O七叶内酯七叶内酯七叶苷七叶苷（二）秦皮中主要有效成分的性质（二）秦皮中主要有效成分的性质 七叶内酯七叶内酯(aescule-tin,七叶素）为无色或淡黄色针状结七叶素）为无色或淡黄色针状结晶，熔点晶，熔点276℃，易溶于甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、，易溶于甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、稀碱水，略溶于水，难溶于氯仿等亲脂性有机溶剂；稀碱水，略溶于水，难溶于氯仿等亲脂性有机溶剂； 七叶苷七叶苷(aesculin)为无色或浅黄色针状结晶，熔点为无色或浅黄色针状结晶，熔点206℃，溶于甲醇、乙醇、碱水或水，难溶于乙酸乙脂，不溶于，溶于甲醇、乙醇、碱水或水，难溶于乙酸乙脂，不溶于氯仿两者均显明显的蓝色荧光两者均显明显的蓝色荧光（二）秦皮中主要有效成分的性质（二）秦皮中主要有效成分的性质 秦皮素秦皮素 (fraxetin) 分子式分子式C10H8O5，相对分子质量，相对分子质量208.16片状结晶（乙醇水溶液），熔点片状结晶（乙醇水溶液），熔点227～～228℃溶于乙醇及盐酸水溶液，微溶于乙醚和沸水于乙醇及盐酸水溶液，微溶于乙醚和沸水。

秦皮苷秦皮苷 (fraxin) 分子式分子式C16 H18O10，相对分子质量，相对分子质量370.30水合物为黄色针状结晶（水或稀乙醇溶液），无水合物为黄色针状结晶（水或稀乙醇溶液），无水物熔点水物熔点205℃微溶于冷水，易溶于热乙醇及热水微溶于冷水，易溶于热乙醇及热水秦皮素秦皮素 R=H 秦皮苷秦皮苷 R=glu 12提取提取分离分离依据依据根据秦皮中七叶苷和七叶内酯均根据秦皮中七叶苷和七叶内酯均溶于热乙醇的性质，用乙醇为溶溶于热乙醇的性质，用乙醇为溶剂进行回流提取剂进行回流提取 利用七叶苷和七叶内酯均不溶于氯仿利用七叶苷和七叶内酯均不溶于氯仿的性质除去亲脂性杂质利用在乙酸的性质除去亲脂性杂质利用在乙酸乙酯中的溶解度差异分离二者乙酯中的溶解度差异分离二者三）秦皮中香豆素类成分的提取分离（三）秦皮中香豆素类成分的提取分离苦枥白蜡树中秦皮素、秦皮苷的提取分离四 知识拓展（一）白蜡树树皮中七叶素的提取分离（一）白蜡树树皮中七叶素的提取分离 索氏提取器内，用索氏提取器内，用95%乙醇回流提取，回收溶剂，浓缩物加乙醇回流提取，回收溶剂，浓缩物加硫酸水浴加热后冷却过滤，滤液用乙醚萃取，回收乙醚，放置析晶，硫酸水浴加热后冷却过滤，滤液用乙醚萃取，回收乙醚，放置析晶，甲醇重结晶得七叶素。

工艺流程如下：甲醇重结晶得七叶素工艺流程如下：四 知识拓展（二）苦枥白蜡树中秦皮素、秦皮苷的提取分离工艺流程如下：（二）苦枥白蜡树中秦皮素、秦皮苷的提取分离工艺流程如下：四 知识拓展（三）白蜡树树皮中七叶素的提取分离工艺流程（三）白蜡树树皮中七叶素的提取分离工艺流程 任务二任务二 蛇床子中香豆素类化学成分的提取分离蛇床子中香豆素类化学成分的提取分离 学习目标学习目标一一二三三蛇床子中香豆素类化学成分的提取分离蛇床子中香豆素类化学成分的提取分离必备知识五四六相关知识链接及拓展 课堂互动目标测试一一 学习目标学习目标2掌握蛇床子中香豆掌握蛇床子中香豆素类化合物的提取、素类化合物的提取、分离及鉴定技术分离及鉴定技术熟悉蛇床子中香豆熟悉蛇床子中香豆素类化合物的结构素类化合物的结构及性质了解蛇床子中香豆了解蛇床子中香豆素类化合物的存在素类化合物的存在及生物活性及生物活性知识要求知识要求3能力要求能力要求1掌握蛇床子中香豆掌握蛇床子中香豆素类化学成分的提素类化学成分的提取分离原理及操作取分离原理及操作技术 熟练进行蛇床子熟练进行蛇床子中香豆素类化合中香豆素类化合物的提取、分离物的提取、分离及鉴定操作。

及鉴定操作学会蛇床子中香学会蛇床子中香豆素类化合物的豆素类化合物的色谱鉴定技术色谱鉴定技术学习目的二 蛇床子中香豆素类化学成分提取分离技术 蛇蛇 床床 子子 为为 伞伞 形形 科科 植植 物物Cnidium monnieri(L.)Cuss的的果果实实 主主产产于于河河北北、、山山东东、、江江苏苏等等地地具具有有温温肾肾助助阳阳，，祛祛风风燥燥湿湿，，杀杀虫虫的的功功能能，，用用于于男男子子阳阳痿痿，，阴阴囊囊湿湿痒痒，，女女子子带带下下阴阴痒痒、、宫宫寒寒不不孕孕、、风风湿湿痹痹痛痛、、疥癣湿疮等的治疗疥癣湿疮等的治疗蛇床子蛇床子中中蛇床子素和欧前胡素的提取分离蛇床子素和欧前胡素的提取分离工艺流程工艺流程 （三）蛇床子中（三）蛇床子中主要有效成分的提取分离的提取分离（二）蛇床子中主要有效成分的性质（一）蛇床子中主要有效成分及结构（一）蛇床子中主要有效成分及结构三三 必备知识必备知识（一）蛇床子中主要有效成分 蛇床子主含挥发油和香豆素类成分果实含蛇床子主含挥发油和香豆素类成分果实含挥发油挥发油1.3%1.3%香豆素类成分包括蛇床子素香豆素类成分包括蛇床子素( (ostholeosthole) )、欧前胡、欧前胡( (imperatorineimperatorine) )、佛手柑内、佛手柑内酯酯( (bergaptenbergapten) )、异虎耳草、异虎耳草( ( isopimpinellineisopimpinelline ) )等成分。

等成分（二）蛇床子中香豆素类成分的结构、性质（二）蛇床子中香豆素类成分的结构、性质 蛇床子素蛇床子素 棱柱状结晶（乙醚），针状结晶（稀乙醇），熔点棱柱状结晶（乙醚），针状结晶（稀乙醇），熔点83~84℃，溶于甲醇、乙醇、氯仿、丙酮、乙酸乙酯和沸石油醚，，溶于甲醇、乙醇、氯仿、丙酮、乙酸乙酯和沸石油醚，不溶于水和冷石油醚不溶于水和冷石油醚 欧前胡素欧前胡素 棱柱结晶（乙醚），长细针晶（热水），熔点棱柱结晶（乙醚），长细针晶（热水），熔点102℃ ，不溶于水，易溶于沸水，易溶于氯仿、溶于苯、乙醇、乙，不溶于水，易溶于沸水，易溶于氯仿、溶于苯、乙醇、乙醚、石油醚和碱性氢氧化物醚、石油醚和碱性氢氧化物 佛手柑内酯佛手柑内酯 白色带丝光的针状结晶，熔点白色带丝光的针状结晶，熔点188~190 ℃，易溶，易溶于氯仿，微溶于苯、乙酸乙酯和乙醇，不溶于水，具有升华性于氯仿，微溶于苯、乙酸乙酯和乙醇，不溶于水，具有升华性 异虎耳草素异虎耳草素 淡黄色结晶，熔点淡黄色结晶，熔点189~191℃课课 堂堂 互互 动动 蛇床子中化学成分的溶解性有什么特点？如何利用其特点进行提取分离？（三）蛇床子中香豆素类成分的生物活性（三）蛇床子中香豆素类成分的生物活性 蛇床子素蛇床子素对须发藓菌有对须发藓菌有较强抑制作用，较强抑制作用，花椒毒酚则具花椒毒酚则具有显著的抗霉有显著的抗霉菌作用。

菌作用 蛇床子总香豆素蛇床子总香豆素能直接扩张豚鼠器官能直接扩张豚鼠器官平滑肌，对豚鼠吸入平滑肌，对豚鼠吸入致痉剂所致的药物性致痉剂所致的药物性哮喘有明显的保护作哮喘有明显的保护作用，在体外能拮抗组用，在体外能拮抗组织胺、慢反应物质引织胺、慢反应物质引起的肠肌收缩，对小起的肠肌收缩，对小鼠被动性皮肤过敏反鼠被动性皮肤过敏反应有抑制作用，同时应有抑制作用，同时有一定的祛痰作用有一定的祛痰作用 蛇床蛇床子素具有子素具有钙拮抗剂钙拮抗剂的作用 蛇床子总香蛇床子总香豆素对角叉菜胶豆素对角叉菜胶和鸡蛋清引起的和鸡蛋清引起的大鼠足趾肿胀均大鼠足趾肿胀均有明显的抑制作有明显的抑制作用四 知识拓展 蛇床子膏的制备工艺流程蛇床子膏的制备工艺流程 蛇床子粗粉用蛇床子粗粉用70%乙醇浸提乙醇浸提3次，合并提取液，减压回收乙醇，次，合并提取液，减压回收乙醇，得稠膏然后加稠膏得稠膏然后加稠膏3倍量的氯仿回流提取，过滤，减压回收氯仿，倍量的氯仿回流提取，过滤，减压回收氯仿，得含蛇床子素的干膏工艺流程如下：得含蛇床子素的干膏。

工艺流程如下：任务三任务三 前胡中香豆素类化学成分的提取分离前胡中香豆素类化学成分的提取分离 学习目标学习目标一一二三三前胡中香豆素类化学成分的提取分离前胡中香豆素类化学成分的提取分离必备知识五四六相关知识链接及拓展 课堂互动目标测试一一 学习目标学习目标2掌握前胡中香豆素掌握前胡中香豆素类化合物的提取、类化合物的提取、分离及鉴定技术分离及鉴定技术熟悉前胡中香豆素熟悉前胡中香豆素类化合物的结构及类化合物的结构及性质了解前胡中香豆素了解前胡中香豆素类化合物的存在及类化合物的存在及生物活性生物活性知识要求知识要求3能力要求能力要求1掌握前胡中香豆素掌握前胡中香豆素类化学成分的提取类化学成分的提取分离原理及操作技分离原理及操作技术 熟练进行前胡中熟练进行前胡中香豆素类化合物香豆素类化合物的提取、分离及的提取、分离及鉴定操作鉴定操作学会前胡中香豆学会前胡中香豆素类化合物的色素类化合物的色谱鉴定技术谱鉴定技术学习目的二 前胡中香豆素类化学成分提取分离技术 前前胡胡为为伞伞形形科科植植物物白白花花前前胡胡(Peucedanum praeruptorum Dunn.））的的干干燥燥根根。

具具有有散散风风清清热热、、降降气气化化痰痰的的功功效效，，用用于于风风热热咳咳嗽嗽痰痰多多、、痰痰热热喘喘满满、、咯咯痰痰黄黄稠稠等等症症主主产于浙江、江西、四川等省产于浙江、江西、四川等省白花前胡成分白花前胡丙素的提取分离工艺流程白花前胡成分白花前胡丙素的提取分离工艺流程（三）前胡中（三）前胡中主要有效成分的提取分离的提取分离（二）前胡中主要有效成分的性质（一）前胡中主要有效成分及结构（一）前胡中主要有效成分及结构三三 必备知识必备知识（一）前胡中主要有效成分 前胡中主要含有香豆素类化合物，主要有效成分为前胡中主要含有香豆素类化合物，主要有效成分为白花前胡丙素（白花前胡丙素（PraeruptorinPraeruptorin C C）白花前胡丙素和其）白花前胡丙素和其消旋体白花前胡甲素为其主要活性成分，研究表明白花消旋体白花前胡甲素为其主要活性成分，研究表明白花前胡丙素与其消旋体白花前胡甲素前胡丙素与其消旋体白花前胡甲素( (praeruptorinpraeruptorin A ) A )具有相似的药理作用此外，前胡中还含有白花前胡乙具有相似的药理作用此外，前胡中还含有白花前胡乙素（素（PraeruptorinPraeruptorin B B）、、白花前胡丁素）、、白花前胡丁素（（PraeruptorinPraeruptorin D D）、白花前胡戊素（）、白花前胡戊素（PraeruptorinPraeruptorin E E）等成分。

等成分（二）前胡中香豆素类成分的性质、结构（二）前胡中香豆素类成分的性质、结构 (1) 白花前胡甲素白花前胡甲素 分子式分子式C20 H22O5，相对分子质量，相对分子质量342.40 (2) 白花前胡丙素白花前胡丙素 分子式分子式C21H22 O7，相对分子质量，相对分子质量386.41白色针晶，熔点白色针晶，熔点136℃～～138℃ (3) 白花前胡丁素白花前胡丁素 分子式分子式C24 H26 O7 ,相对分子质量相对分子质量426无色针晶，熔点针晶，熔点174℃～～176℃ (4) 白花前胡戊素白花前胡戊素 分子式分子式C24 H28O7，相对分子质量，相对分子质量428.46 白花前胡甲素 白花前胡丙素课课 堂堂 互互 动动 根据白花前胡丙素的提取分离工艺分析白花前胡丙素的溶解性特点四四 知识链接知识链接白花前胡成分提取分离白花前胡成分提取分离 五 知识拓展 商商品品前前胡胡的的药药用用原原植植物物还还有有紫紫花花前前胡胡，，但但是是2005版版药药典典未未收收载载。

紫紫花花前前胡胡中中主主要要含含有有的的香香豆豆素素类类成成分分有有紫紫花花前前胡胡素素D、、紫紫花花前前胡素胡素F、、Pd-C-Ⅳ、、Pd-C-Ⅱ、（、（+））-3/ S-decursinol等成分紫花前胡素紫花前胡素D R1=H R2=当归当归酰基酰基紫花前胡素紫花前胡素F R1=乙酰基乙酰基 R2=H化合物化合物Ⅴ—紫花前胡素紫花前胡素D 化合物化合物Ⅵ—紫花前胡素紫花前胡素F 化合物化合物Ⅶ—Pd-C-Ⅳ 化合物化合物Ⅷ—Pd-C-Ⅱ 化合物化合物Ⅸ—（（+））-3/ S-decursinol学学 习习 小小 结结 香香豆豆素素类类化化合合物物提取分离提取分离提取分离提取分离提取、分离提取、分离结构测定结构测定结构测定结构测定理化性质理化性质理化性质理化性质性状、溶解性、荧光反应、内酯环的性状、溶解性、荧光反应、内酯环的碱水解碱水解结构类型结构类型结构类型结构类型简单香豆素简单香豆素 、呋喃香豆素、吡、呋喃香豆素、吡喃香豆素、其他香豆素喃香豆素、其他香豆素 应用实例应用实例应用实例应用实例紫外、红外、核磁、质谱紫外、红外、核磁、质谱秦皮、蛇床子、前胡秦皮、蛇床子、前胡检识反应检识反应检识反应检识反应显色反应显色反应、、、、色谱检识色谱检识 （一）学习内容（一）学习内容（二）学习方法与体会（二）学习方法与体会¨ 香豆素类化合物由于结构特殊，既具香豆素类化合物由于结构特殊，既具有酯类化合物的某些特性，也具有苷类化有酯类化合物的某些特性，也具有苷类化合物的特性。

在学习过程中要重点掌握香合物的特性在学习过程中要重点掌握香豆素的结构特点和理化性质，以及提取分豆素的结构特点和理化性质，以及提取分离和鉴定方法通过理论学习和实训操作离和鉴定方法通过理论学习和实训操作使学生达到能灵活运用掌握的知识分析提使学生达到能灵活运用掌握的知识分析提取分离工艺流程的原理具有用化学方法取分离工艺流程的原理具有用化学方法鉴别香豆素类化合物的能力，能设计简单鉴别香豆素类化合物的能力，能设计简单的提取分离流程的提取分离流程六六 目目 标标 检检 测测¨一、选择题一、选择题¨（一）单项选择题（一）单项选择题¨1 1、下列化合物具有强烈天蓝色荧光的是、下列化合物具有强烈天蓝色荧光的是¨A.A.七叶内酯七叶内酯 B.B.大黄素大黄素 C.C.大豆皂苷大豆皂苷 D.D.甘草酸甘草酸¨2 2、异羟肟酸铁反应的现象是、异羟肟酸铁反应的现象是¨A.A.绿色绿色 B.B.蓝色蓝色 C.C.红色红色 D.D.黑色黑色¨3 3、、FeCl3FeCl3试剂反应的条件是试剂反应的条件是¨A.A.内酯环内酯环 B.B.酚羟基酚羟基 C.C.芳环芳环 D.D.甲氧基甲氧基¨4 4、异羟肟酸铁反应作用的基团是、异羟肟酸铁反应作用的基团是¨A. A. 酚羟基酚羟基 B. B. 芳环芳环 C. C. 甲氧基甲氧基 D. D. 内酯环内酯环¨5 5、秦皮中的七叶内酯属于下列哪类香豆素成分、秦皮中的七叶内酯属于下列哪类香豆素成分¨A.A.异香豆素异香豆素 B.B.简单香豆素简单香豆素 C.C.吡喃香豆素吡喃香豆素 D.D.呋喃香豆素呋喃香豆素¨6 6、香豆素的基本母核是、香豆素的基本母核是¨A.A.苯丙素苯丙素 B.B.顺式邻羟基桂皮酸顺式邻羟基桂皮酸 C.C.苯并苯并α-α-吡喃酮吡喃酮 D.D.桂皮酸衍生物桂皮酸衍生物¨7 7、下列化合物脱水后能生成香豆素的是、下列化合物脱水后能生成香豆素的是¨A. A. 桂皮酸衍生物桂皮酸衍生物 B. B. 苯并苯并α-α-吡喃酮吡喃酮 C. C. 顺式邻羟基桂皮酸顺式邻羟基桂皮酸 D. D. 苯丙素苯丙素8 8、游离香豆素可溶于热的氢氧化钠水溶液是由于其结构中存在、游离香豆素可溶于热的氢氧化钠水溶液是由于其结构中存在A.A.酚羟基对位的活泼氢酚羟基对位的活泼氢 B.B.酮基酮基 C.C.甲氧基甲氧基 D.D.内酯环内酯环9 9、异补骨酯素属于、异补骨酯素属于A. A. 呋喃香豆素呋喃香豆素 B.B.简单香豆素简单香豆素 C.C.吡喃香豆素吡喃香豆素 D. D. 异香豆素异香豆素1010、七叶内酯具有、七叶内酯具有A.A.升华性升华性 B.B.香味香味 C.C.两者均无两者均无 D.D.两者均有两者均有（二）多项选择题（二）多项选择题1 1、含有香豆素的中药有、含有香豆素的中药有A.A.秦皮秦皮 B.B.厚朴厚朴 C.C.五味子五味子 D.D.补骨脂补骨脂 E.E.大黄大黄 2 2、游离的小分子香豆素提取可用、游离的小分子香豆素提取可用A.A.碱溶酸沉淀法碱溶酸沉淀法 B.B.水蒸气蒸馏法水蒸气蒸馏法 C.C.色谱法色谱法 D.D.升华法升华法 E.E.有机溶剂法有机溶剂法3 3、提取游离香豆素的方法有、提取游离香豆素的方法有A.A.酸溶碱沉法酸溶碱沉法 B. B. 乙醚提取法乙醚提取法 C. C. 碱溶酸沉淀法碱溶酸沉淀法 D.D.热水提取法热水提取法 E.E.乙醇提取法乙醇提取法4 4、蛇床子中主要含有的化学成分有、蛇床子中主要含有的化学成分有A. A. 槲皮素槲皮素 B.B.蛇床子素蛇床子素 C.C.欧前胡素欧前胡素 D.D.佛手柑内醋佛手柑内醋 E.E.大黄素大黄素5 5、前胡中主要含有的化学成分有、前胡中主要含有的化学成分有A.A.白花前胡甲素白花前胡甲素 B.B.白花前胡戊素白花前胡戊素 C.C.白花前胡丙素白花前胡丙素 D. D. 欧前胡素欧前胡素 E.E.花色素花色素（三）简答题（三）简答题1.1.香豆素类化合物具有哪些理化性质？香豆素类化合物具有哪些理化性质？2.2.简述薄层色谱中展开剂的简述薄层色谱中展开剂的pHpH值对弱酸性香豆素值对弱酸性香豆素RfRf值的影响离？值的影响离？实训实训 秦皮中七叶苷和七叶内酯的提取、分离和鉴定秦皮中七叶苷和七叶内酯的提取、分离和鉴定【【实训目的实训目的】】1.1.能够运用回流和连续回流法、减压浓缩法对秦皮中能够运用回流和连续回流法、减压浓缩法对秦皮中七叶苷和七叶内酯进行提取和精制。

七叶苷和七叶内酯进行提取和精制2.2.会用显色反应、色谱法进行香豆素类成分的检识会用显色反应、色谱法进行香豆素类成分的检识化学成分概述化学成分概述】】秦皮为木樨科植物白蜡树、苦枥白蜡树、尖叶白蜡秦皮为木樨科植物白蜡树、苦枥白蜡树、尖叶白蜡树、宿柱白蜡树的干燥枝皮或干皮秦皮主要含七树、宿柱白蜡树的干燥枝皮或干皮秦皮主要含七叶内酯、七叶苷、秦皮素、秦皮苷等，结构见前述叶内酯、七叶苷、秦皮素、秦皮苷等，结构见前述实训原理实训原理】】本实验是根据秦皮中的七叶内酯、七叶苷均能溶于沸本实验是根据秦皮中的七叶内酯、七叶苷均能溶于沸乙醇，可用沸乙醇将两者提取出来，然后利用两者在乙醇，可用沸乙醇将两者提取出来，然后利用两者在醋酸乙酯中的溶解度不同进行分离醋酸乙酯中的溶解度不同进行分离设备、仪器及药品设备、仪器及药品】】索氏提取器、分液漏斗、索氏提取器、分液漏斗、50ml50ml圆底烧瓶、冷凝圆底烧瓶、冷凝 管、水浴锅、硅胶管、水浴锅、硅胶G G薄层板、紫外光灯薄层板、紫外光灯 （（254nm254nm）、）、95%95%乙醇、氯仿、醋酸乙酯、盐酸、乙醇、氯仿、醋酸乙酯、盐酸、 盐酸羟胺、甲醇、氢氧化钠、三氯化铁、正丁盐酸羟胺、甲醇、氢氧化钠、三氯化铁、正丁 醇、醋酸、秦皮苷标准品。

醇、醋酸、秦皮苷标准品【【操作步骤操作步骤】】1、七叶内酯、七叶苷的提取分离 秦皮粗粉150g置索氏提取器中，用乙醇回流提取4次，减压浓缩，回收乙醇，得浓缩物浓缩物用水温热溶解加等体积氯仿萃取2次，除去非极性杂质水液挥取残留的氯仿，加等体积的醋酸乙酯萃取2次合并萃取液水液浓缩析晶滤过，甲醇、水反复重结晶得七叶苷醋酸乙酯液加无水硫酸钠脱水，减压蒸干，残留物用甲醇溶解，适当浓缩后放置过夜析晶滤过，水、甲醇反复重结晶的七叶素2、鉴定 （1）荧光：取样品少量，加入乙醇0.5ml ，用毛细管滴于滤纸上，在紫外灯下观察 （2）三氯化铁反应：取样品少量，加入乙醇0.5ml ，加入1%三氯化铁试剂2～3滴，观察颜色变化 （3）内酯的颜色反应：取样品少量，加0.5ml乙醇溶解，加10%盐酸羟胺甲 【【操作步骤操作步骤】】¨醇溶液数滴，醇溶液数滴，10%10%氢氧化钠氢氧化钠5 5～～6 6滴，水浴加热滴，水浴加热2 2分钟放冷后加分钟放冷后加5%5%盐盐酸数滴（酸数滴（pH 3pH 3～～4 4），加），加5%5%三氯化铁三氯化铁2 2～～3 3滴，观察颜色变化。

滴，观察颜色变化¨（（4 4）薄层检识）薄层检识¨吸附剂：硅胶吸附剂：硅胶GF254GF254薄层板薄层板¨样品：秦皮提取物样品：秦皮提取物1%1%甲醇溶液甲醇溶液¨对照品：对照品：2%2%秦皮甲素标准品甲醇液；秦皮甲素标准品甲醇液；2%2%秦皮乙素标准品甲醇液秦皮乙素标准品甲醇液¨展开剂：三氯甲烷展开剂：三氯甲烷- -甲醇甲醇- -甲酸（甲酸（6∶1∶0.56∶1∶0.5））¨显色：三氯化铁显色：三氯化铁- -铁氰化钾试液（铁氰化钾试液（1∶11∶1））。