血型鉴定常见的疑难问题分析及处理优秀课件.ppt

血型鉴定常见的疑难问题分析及处理2024/9/71概述 随着输血医学的发展，输血安全问题日益引起各方面的关注，输血安全主要体现在两方面内容，一是经血传播疾病问题，二是血液免疫学方面的问题即血型血清方面的问题2024/9/72概述n n血型血清学不同于一般的血型血清学不同于一般的临床医学检验临床医学检验，有其自身特，有其自身特点一般临床医学检验的工作流程十分明了，即接受点一般临床医学检验的工作流程十分明了，即接受临床医生的申请，按各项检验的操作规程完成其申请临床医生的申请，按各项检验的操作规程完成其申请内容并反馈结果而血型血清学方面的检查则与此有内容并反馈结果而血型血清学方面的检查则与此有很大的不同，临床医生及各医院输血科向血站和血液很大的不同，临床医生及各医院输血科向血站和血液中心血型参比实验室提出的检测申请不外有以下几种中心血型参比实验室提出的检测申请不外有以下几种情况情况: : 2024/9/73血型参比实验室涉及的检测内容n n血型鉴定困难n n交叉配血困难n n输血反应原因分析n n其它：如母婴血型不合新生儿溶血病检测、coombs试验、血小板抗体检测等 2024/9/74ABO血型常规定型方法ØØ玻片法、纸片法玻片法、纸片法ØØ试管法试管法ØØ微量板法微量板法ØØ微柱凝集法微柱凝集法2024/9/75疑难血型鉴定常用的辅助实验n n吸收试验n n放散试验（常用热放散）n nDTT（二硫苏糖醇）处理自身凝集红细胞n n唾液血型物质测定（中和试验）n n分子生物学技术进行基因型检测2024/9/76血型血清学的工作特点n n鉴定技术因不同情况而异，没有一个固定的格式，因此在试验鉴定技术因不同情况而异，没有一个固定的格式，因此在试验过程中随时分析试验结果，选择最有效的方案过程中随时分析试验结果，选择最有效的方案( (程序程序) )是必要的。

是必要的n n血型参比实验室必须全面分析病历情况，有选择的运用相应的血型参比实验室必须全面分析病历情况，有选择的运用相应的实验手段来解决问题，另外在接受检测申请时，还应详细了解实验手段来解决问题，另外在接受检测申请时，还应详细了解患者的既往史患者的既往史- -性别、年龄、民族、临床诊断及临床症状和患者性别、年龄、民族、临床诊断及临床症状和患者的输血史和用药史，如女性已婚患者还应询问其妊娠史这些的输血史和用药史，如女性已婚患者还应询问其妊娠史这些都对解决问题至关重要都对解决问题至关重要2024/9/77血型血清学的工作特点n n例如：对于白血病患者，应考虑到由于疾病原因而引起血型抗原减弱的可能性；对消化系统的疾病的患者应考虑到由于产生“类B物质”而导致血型鉴定错误的可能性；对于多次输血的患者应考虑其体内产生免疫性抗体的可能性，等等2024/9/78 疑难血型鉴定疑难血型鉴定n n共同特点:正反定型不2024/9/79ABO血型正血型正反定型不符及其原因不符及其原因 1.技术和管理错误 2.正定型---红细胞自身相关问题 3.反定型---血清自身相关问题2024/9/710一、技术和管理错误一、技术和管理错误（（1 1）标本或试剂搞错，造成假阳性或假阴性结果。

标本或试剂搞错，造成假阳性或假阴性结果2 2）器材不洁产生假阳性结果器材不洁产生假阳性结果3 3）试剂污染或失效产生假阳性或假阴性结果试剂污染或失效产生假阳性或假阴性结果4 4）离心过度或不足，产生假阳性或假阴性结果离心过度或不足，产生假阳性或假阴性结果2024/9/711二二、正定型、正定型------红细胞自身相关问题红细胞自身相关问题1.1.红红细细胞胞致致敏敏 直直接接抗抗球球蛋蛋白白试试验验阳阳性性的的红红细细胞胞（（如如自自身身免免疫疫性性溶溶血血性性贫贫血血患患者者的的红红细细胞胞））在在含含高高蛋蛋白白介介质质的的试试剂中可发生凝集，产生假阳性结果剂中可发生凝集，产生假阳性结果2.2.异异常常基基因因型型 ABOABO亚亚型型的的弱弱抗抗原原常常规规方方法法难难以以检检出出，，产产生假阴性结果生假阴性结果3.Cis-AB3.Cis-AB型型（（顺顺式式ABAB型型）） 指指从从父父母母的的一一方方同同时时得得到到A A和和B B基基因因在在一一条条染染色色体体上上，，而而另另一一条条染染色色体体上上是是从从父父母母中中另另一方来的一方来的O O基因顺式基因。

顺式ABAB细胞的细胞的B B抗原较弱，类似抗原较弱，类似B3B3亚型 2024/9/713二、二、正定型正定型------红细胞自身相关问题红细胞自身相关问题4.4.嵌嵌合合体体血血型型 体体内内有有两两群群红红细细胞胞，，定定型型时时显显示示““混混合合外外观观凝凝集集””现现象象也也可可见见于于ABOABO不不同同型型的的骨骨髓髓移移植植术术后后真真正正的的嵌嵌合合体体非非常常少少见见，，可可出出现现于于双双胞胞胎胎，，在在胚胚胎胎期期由由于于血血管管的的吻吻合合使使得得2 2个个胎胎儿儿的的血血液液发发生生混混合合，，2 2种种血血液液都都被被机机体体认认做做自自我我，，不不产产生生抗抗体体人人工工嵌嵌合合状状态态可可出出现现于于输输血血后后（（如如O O型型红红细细胞胞输输给给A A或或B B型型人），骨髓移植术后，交换输血及母体、胎儿出血人），骨髓移植术后，交换输血及母体、胎儿出血 2024/9/714二、二、正定型正定型------红细胞自身相关问题红细胞自身相关问题5.5.疾疾病病因因素素导导致致抗抗原原减减弱弱 常常见见的的如如白白血血病病、、何何杰杰金金病病、、1010号号染染色色体体转转位位、、红红细细胞胞系系统统极极度度增增生生如如海海洋洋性性贫贫血血等等病病人人ABOABO血血型型抗抗原原可可受受到到暂暂时时抑抑制制，，抗抗原原减减弱弱检检出出困困难难。

红红细细胞胞ABOABO抗抗原原减减弱弱与与病病程程有有关关，，病病情情缓缓解解时时抗抗原原性性会会恢复 6.6.红红细细胞胞多多凝凝集集现现象象 当当病病人人感感染染细细菌菌或或病病毒毒后后，，病病毒毒或或细细菌菌产产生生的的酶酶使使红红细细胞胞上上掩掩蔽蔽的的T T抗抗原原暴暴露露激激活活，，由由于于正正常常人人血血清清中中都都含含有有抗抗-T-T抗抗体体，，因因此此可可与与正正常常人人血血清清产产生凝集反应，生凝集反应，正定型正定型正定型正定型试验假阳性试验假阳性 2024/9/715二、二、正定型正定型------红细胞自身相关问题红细胞自身相关问题7.7.获获得得性性类类B B 由由于于革革兰兰氏氏阴阴性性杆杆菌菌的的作作用用，，红红细细胞胞可可获获得得““类类B”B”的的活活性性 (肠肠梗梗阻阻、、结结肠肠、、直直肠肠癌癌或或其其他他下下消消化化道道疾疾病病时时肠肠壁壁通通透透性性增增加加，，细细菌菌多多糖糖入入血血，，使使A A型患者出现获得性类型患者出现获得性类B B现象现象) ) 8.8.可可溶溶性性血血型型物物质质增增多多 胃胃或或胰胰腺腺恶恶性性肿肿瘤瘤患患者者血血清清中中可可能能含含有有过过多多的的可可溶溶性性血血型型物物质质，，这这些些物物质质中中和和抗抗A A（（B B）血清从而影响正定型结果。

血清从而影响正定型结果 2024/9/716二、二、正定型正定型------红细胞自身相关问题红细胞自身相关问题9.红细胞发生自凝现象 患者血清中的高效价自身冷凝集素使红细胞发生凝集10. 近期输血 曾异型输血，使病人血液标本成为不同型别的红细胞混合物，定型时显示“混合外观凝集”现象2024/9/717三、三、反定型反定型------血清自身相关问题血清自身相关问题1.1.血血浆浆置置换换治治疗疗后后 近近期期内内进进行行大大量量的的血血浆浆置置换换治治疗疗，，影影响抗体效价，造成反定型困难响抗体效价，造成反定型困难2.2.异异常常的的血血浆浆蛋蛋白白 病病人人血血浆浆中中异异常常的的白白蛋蛋白白、、球球蛋蛋白白比比例例和和高高浓浓度度的的纤纤维维蛋蛋白白原原等等能能导导致致缗缗钱钱状状形形成成，，造造成成假假凝凝集集现现象象，，多多见见于于如如多多发发性性骨骨髓髓瘤瘤、、巨巨球球蛋蛋白白血血症症、、何何杰金淋巴瘤、严重的肝病等患者杰金淋巴瘤、严重的肝病等患者 3.3.高高分分子子聚聚合合物物的的影影响响 血血浆浆增增容容剂剂（（葡葡聚聚糖糖、、PVPPVP等等））也也会引起缗钱状凝集导致假阳性结果。

会引起缗钱状凝集导致假阳性结果 2024/9/718三、三、反定型反定型------血清自身相关问题血清自身相关问题4.4.不不规规则则抗抗体体或或自自身身冷冷凝凝集集素素的的存存在在 受受检检者者血血浆浆中中含含有有ABOABO血血型型抗抗体体以以外外的的IgMIgM类类不不规规则则抗抗体体与与试试剂剂A A、、B B、、O O细胞上的相应抗原起反应细胞上的相应抗原起反应5.5.低低丙丙种种球球蛋蛋白白血血症症 低低丙丙种种球球蛋蛋白白血血症症病病例例( (如如白白血血病病、、淋淋巴巴瘤瘤及及使使用用免免疫疫抑抑制制剂剂的的患患者者、、先先天天丙丙种种球球蛋蛋白白缺缺乏乏的的患患者者、、免免疫疫缺缺陷陷的的患患者者) ) 可可能能会会因因免免疫疫球球蛋蛋白白水水平平全全面面下下降降使使血血清清定定型型时时不不见见凝凝集集或或仅仅见见弱弱凝凝集集反应2024/9/719三、三、反定型反定型------血清自身相关问题血清自身相关问题6.6.年龄因素年龄因素 在未产生自己抗体的婴儿、由母亲被在未产生自己抗体的婴儿、由母亲被动获得抗体的婴儿，或抗体水平下降的老人，试动获得抗体的婴儿，或抗体水平下降的老人，试验时可出现不见凝集或仅见弱凝集反应等异常结验时可出现不见凝集或仅见弱凝集反应等异常结果。

果7.7.骨髓移植术后骨髓移植术后 ABOABO不同型骨髓移植患者术后不同型骨髓移植患者术后8.8.纤维蛋白原的影响纤维蛋白原的影响 使用血浆或凝固不完全的血使用血浆或凝固不完全的血清会形成很小的纤维蛋白凝集包裹的红细胞凝块清会形成很小的纤维蛋白凝集包裹的红细胞凝块 2024/9/720 小小 结（一）结（一）一、红细胞抗原增多（额外的反应）的原因一、红细胞抗原增多（额外的反应）的原因n n红细胞致敏：直接抗人球蛋白试验阳性红细胞致敏：直接抗人球蛋白试验阳性n n红细胞多凝集现象红细胞多凝集现象n n红细胞发生自凝现象红细胞发生自凝现象n n获得性类获得性类B Bn n其它：近期异型输血、嵌合体血型其它：近期异型输血、嵌合体血型 二、红细胞抗原减弱的原因二、红细胞抗原减弱的原因n n异常基因型（异常基因型（ABOABO亚型等）亚型等）n nCis-ABCis-AB型（顺式型（顺式ABAB型）型）n n疾病因素导致抗原减弱（常见于白血型等血液病患者）疾病因素导致抗原减弱（常见于白血型等血液病患者）n n可溶性血型物质增多（常见于胃或胰腺恶性肿瘤患者）可溶性血型物质增多（常见于胃或胰腺恶性肿瘤患者）2024/9/721 小小 结（二）结（二）三、血型抗体增多（额外的反应）的原因n n异常的血浆蛋白（串钱状假凝集）：多见于如多发性异常的血浆蛋白（串钱状假凝集）：多见于如多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、何杰金淋巴瘤、严重的肝病骨髓瘤、巨球蛋白血症、何杰金淋巴瘤、严重的肝病等患者等患者 。

n n高分子聚合物的影响：血浆增容剂（葡聚糖、高分子聚合物的影响：血浆增容剂（葡聚糖、PVPPVP等）等）也会引起缗钱状凝集导致假阳性结果也会引起缗钱状凝集导致假阳性结果 n n不规则抗体或自身冷凝集素的存在不规则抗体或自身冷凝集素的存在n n纤维蛋白原的影响纤维蛋白原的影响2024/9/722 小小 结（三）结（三）四、血型抗体减弱的原因n n血浆置换治疗后血浆置换治疗后n n低丙种球蛋白血症低丙种球蛋白血症n n年龄因素：婴儿、老年人抗体水平低年龄因素：婴儿、老年人抗体水平低n n骨髓移植术后骨髓移植术后2024/9/723正正反定型不符一般处理程序不符一般处理程序一、 询问、查阅病史n n患者的年齡患者的年齡n n患者的病史患者的病史n n患者的近期输血史患者的近期输血史n n患者的近期用药史患者的近期用药史n n患者是否进行了骨髓移植患者是否进行了骨髓移植n n患者以前的血型患者以前的血型n n患者是否进行过血浆置换术患者是否进行过血浆置换术2024/9/724正正反定型不符一般处理程序不符一般处理程序 二、二、 使用试管法重做试验并判断可能的原因使用试管法重做试验并判断可能的原因试管法定型的优点试管法定型的优点1.1.1.1.可以反复离心看结果。

可以反复离心看结果可以反复离心看结果可以反复离心看结果2.2.2.2.可以随意延长抗原抗体反应时间，可以改可以随意延长抗原抗体反应时间，可以改可以随意延长抗原抗体反应时间，可以改可以随意延长抗原抗体反应时间，可以改 变反应温度（变反应温度（变反应温度（变反应温度（4℃4℃4℃4℃、、、、37℃37℃37℃37℃孵育），有利于弱抗原、抗孵育），有利于弱抗原、抗孵育），有利于弱抗原、抗孵育），有利于弱抗原、抗体的检出或排除冷凝集素的干扰体的检出或排除冷凝集素的干扰体的检出或排除冷凝集素的干扰体的检出或排除冷凝集素的干扰3.3.3.3.可以观察红细胞混合外观现象可以观察红细胞混合外观现象可以观察红细胞混合外观现象可以观察红细胞混合外观现象4.4.4.4.可以观察红细胞溶血现象可以观察红细胞溶血现象可以观察红细胞溶血现象可以观察红细胞溶血现象 2024/9/725ABO定型常见问题的解决方法 ABOABO亚型亚型 * * 正定：抗正定：抗-A-A、抗、抗-B-B、抗、抗-AB-AB、抗、抗-A1-A1、抗、抗-H-H * * 反定：反定：A1cA1c、、A2cA2c、、BcBc、、OcOc、自身对照、自身对照 * *正反定型在不同温度下反应并比较凝集强度的变化正反定型在不同温度下反应并比较凝集强度的变化 * * 吸收放散试验吸收放散试验 * * 唾液血型物质检测唾液血型物质检测 * * 有条件者可作家系调查或有条件者可作家系调查或PCRPCR检测血型基因检测血型基因2024/9/7262024/9/727ABOABO定型常见问题的解决方法定型常见问题的解决方法 A、B抗原减弱* 延长孵育时间、4℃孵育* 酶处理红细胞* 吸收放散试验* 唾液血型物质检测* 既往血型调查 2024/9/728ABOABO定型常见问题的解决方法定型常见问题的解决方法 抗体减弱* 延长孵育时间、4℃孵育* 酶处理试剂红细胞* 既往血型调查 * 免疫球蛋白水平测定2024/9/729ABOABO定型常见问题的解决方法定型常见问题的解决方法 冷自身抗体* * 将血清和红细胞分别在将血清和红细胞分别在3737孵育后再混合孵育后再混合* * 用用37℃37℃温盐水洗涤红细胞、温盐水洗涤红细胞、45℃45℃热放散热放散3 3分钟分钟* * 巯基试剂巯基试剂(DTT)(DTT)处理红细胞处理红细胞* * 自身吸收去除血清中的自身冷抗体自身吸收去除血清中的自身冷抗体 2024/9/730ABOABO定型常见问题的解决方法定型常见问题的解决方法 室温反应的同种抗体* 用谱细胞做抗体鉴定* 选择没有相应抗原的A、B细胞做反定型反定型 2024/9/731ABOABO定型常见问题的解决方法定型常见问题的解决方法 获得性B红细胞* 询问病史* 酸化抗-B血清（pH6.0)* 唾液型物质检测 * 家系调查证明没有遗传基础2024/9/732ABOABO定型常见问题的解决方法定型常见问题的解决方法 致敏红细胞造成的假阳性 洗涤后的压积受检红细胞于56℃水浴放散10分钟，直至直抗试验阳性结果明显减弱或消失，再次洗涤放散后的细胞用于正定型试验。

2024/9/734ABOABO定型常见问题的解决方法定型常见问题的解决方法 *缗钱状凝集：洗涤红细胞、盐水替代试验 * 前带现象：稀释血清后再做试验2024/9/735 疑难血型举例疑难血型举例2024/9/7362024/9/7372024/9/7382024/9/7392024/9/7402024/9/7412024/9/7422024/9/7432024/9/7442024/9/7452024/9/7462024/9/7472024/9/752。