植株全氮、全磷、全钾含量的测定.docx

植株全氮、全磷、全钾的测定一、 待测液的制备（HSO—H 0消煮法）2422二、 植株全氮的测定（HSO—H0消煮，蒸馏法）2422三、 植株全磷的测定（H SO—H 0消煮，钒钼黄比色法）4四、 植株全钾的测定（H SO—H 0消煮，火焰光度法4一、待测液的制备（H SO—H 0消煮法）41 HSO —H0消煮原理4植物样品在浓H SO溶液中，经过脱水、碳化、氧化等一系列的作用后，易分解的有机物则分解，然后再加入H0，H0在热4的浓H SO溶液中会分解出新生态氧，具有强烈的氧化作用，可继续分解没被H SO破坏的有机物，使有机态氮全部转化为无机铵盐4 4同时，样品中的有机磷也转化为无机磷酸盐，故可用同一消煮液分别测定N、P、K （植株中K以离子态存在）主要仪器：万分之一电子天平、0.5 mm筛、三角瓶（50ml）或消煮管、移液管（5、10ml）+吸耳球、弯颈小漏斗、消煮炉、吸管、漏斗、 无磷钾滤纸、容量瓶（100ml）试剂：浓硫酸（GB T625）:化学纯、比重1.8430%H0（GB 6684）:阴凉处存放2 23 操作步骤称取烘干、磨细的植物样品（过0.5 mm筛）0.19g,置于50ml三角瓶（或消煮管）底部（勿将样品粘附在瓶颈上），加浓硫酸 5mL，摇匀（最好放置过夜），瓶口盖一弯颈小漏斗，在电炉上先缓缓加热，待浓硫酸分解冒大量白烟时再升高温度（在消煮炉上 先250C消煮一温度稳定后计时，时间约30min，待浓硫酸分解冒大量白烟时再升高温度至400C）。

消煮至溶液呈均匀的棕黑色 时，取下三角瓶，稍冷后提起弯颈漏斗，滴加30%H 0 10滴，并不断摇动三角瓶再加热（微沸）约7-10 min，取下，稍冷后重复滴2 2加30%H 0 5~10 滴,再消煮如此反复进行3-5 次,每次添加的H 0应逐次减少，消煮至溶液呈无色或清亮后，再加热5-10min （以2 2 2 2赶尽剩余的H 0 ），取下三角瓶冷却，用少量水冲洗漏斗，洗液流入三角瓶中将消煮液无损地洗入100 ml容量瓶中，用水定容,2 2摇匀过滤或放置澄清后供氮、磷、钾测定二、植株全氮的测定（H SO—H 0消煮，蒸馏法）41、 方法原理蒸馏过程的反应:（NH） S0 + NaOH f Na SO + 2NH +2H04 4 3NH + H0 f NH OH3 2 4NHOH + HBO f NH ・HBO + HO4 3 3 4 2 3 2滴定过程的反应:NH .HBO + HSO f （NH） SO + 2H B04 2 3 2 4 4 2 4 3 32、 主要仪器、试剂（1） 主要仪器：万分之一电子天平、移液枪（2ml）、移液管（5、10ml）、三角瓶（50、150ml）、容量瓶（100、1000ml）、量筒、 研钵、酸式滴定管、pH仪、定氮仪（2） 需用的试剂:40%Na0H溶液（10mol/L氢氧化钠溶液）：称取40g氢氧化钠（GB 629分析纯）溶于100ml水中硫酸（GB 625—77）:分析纯，0.005mol/L硫酸（将0.01mol/L硫酸标准溶液用水稀释一倍）或0.01mol/L盐酸标准溶液 0.02mol/L硫酸标准溶液：量取浓硫酸（C.R） 2.83ml，加蒸馏水稀释至5000ml，此为0.02mol/L的（1/2H S0 ）标准溶液，2 4然后用标准碱或硼砂标定之，将0.02mol/L的（1/2HS0 ）标准溶液用水稀释4倍。

24硼酸—指示剂溶液：硼酸-指示剂混合液：每升A溶液中加20ml B混合指示剂，并用稀碱调节至红紫色（pH值约4.5）此液放置时间不宜过长, 如在使用过程中pH值有变化，需随时用稀酸或稀碱调节之A 2%硼酸溶液：20g硼酸（GB 628-78分析纯）溶于1L约60°C去离子水中B甲基红-溴甲酚绿混合指示剂：0.5g溴甲酚绿（HG3-1220-79）和O.lg甲基红（HG3-958 -76）于研钵中，加入少量95% 乙醇，研磨至指示剂全部溶解后，加 95%乙醇至 100mlpH4.5 的水3、 测定步骤在150ml三角瓶中，加入2%硼酸-指示剂混合液5ml,放在定氮仪冷凝管末端，管口置于硼酸液面以上3〜4cm处之后吸取 待测液10.00 mL （含NH+-N约lmg）置于蒸馏器的定氮内室中，于定氮仪相应位置上，盖上具塞并密封使之不漏气4然后从加液漏斗处向蒸馏室内缓缓加入20ml 10mol/L氢氧化钠溶液，立即关紧蒸汽发生器上排气口的旋钮，同时打开蒸汽发 生器和定氮冷凝管连接橡皮管上的夹子通入蒸汽蒸馏，蒸馏约15min左右，馏出液体积约50ml时，即蒸馏完毕取下三角瓶， 关闭蒸汽发生器和定氮冷凝管连接橡皮管上的夹子，并打开蒸汽发生器上排气口的旋钮。

用少量已调节至 pH4. 5的水洗涤冷凝管 的末端，取下三角瓶之后，用气压差的原理，倒吸的方法洗蒸馏瓶中的废液，洗净蒸馏瓶用0.005 mol/L硫酸（或0.01mol/L盐酸）标准溶液滴定馏出液由蓝绿色至刚变为紫红色记录所用酸标准溶液的体积（ml） 空白测定所用酸标准溶液的体积，一般不得超过0.4ml4、 结果计算植株中 N （%） = （V-V ） XCX14XDX10-3 X 100/m10式中：V ――样品测定所消耗标准酸mL数；V ――空白试验所消耗标准酸mL数；0C 标准酸（H+1）的浓度mol・L-i；・14 氮原子的摩尔质量（g • mol ）；10-3 ——mL换算为L；D一一分取倍数，定容体积/分取体积，100/10 m 干样品质量（g）5、 注意事项（1）碱液要过量要求中和完硫酸后再过量2mL；（ 2）蒸馏装置不能漏气；（3） 硼酸要足量估算方法：按1mL浓度为10.0g・L-1的硼酸能吸收0.46mg的N计算；（4） 指示剂和硼酸最好分开配置保存因二者混合过久，有指示终点不明显的可能5） 指示剂和硼酸的pH要调到4.5 （变色点）6）定氮仪参数设置中，加碱量设置为3S；定氮仪开机预热后，要多空蒸几次，等读数稳定后再进行样品测定。

三、植株全磷的测定（HSO—H 0消煮，钒钼黄比色法）2 4 2 21、 方法原理在酸性条件下，正磷酸能与偏钒酸和钼酸发生反应，形成黄色的三元杂多酸一钒钼磷酸溶液黄色稳定，黄色的深浅与磷的 含量成正相关，所以，可用比色法测定溶液中磷的含量2、 主要仪器、试剂（1） 主要仪器：万分之一电子天平、电磁炉、移液管（1、5、10ml 2个）、吸耳球、容量瓶 （50ml 8个、100、1000ml）、量筒 吸管、塑料瓶、棕色瓶、pH试纸、烘箱722 或 723 型分光光度比色计（ 2 ）试剂浓硝酸（分析纯）0.2%二硝基酚指示剂（0.25g 2,6-二硝基酚或2,4-二硝基酚溶于100ml水中，其变色范围是pH 2.4 （无色）一4.0 （黄色）， 变色点是 pH 3.1）6mol/LNa0H溶液（24g NaOH （分析纯）溶于水，稀释至100ml）磷标准液50ug・mL-1 （准确称取经105C烘干的KH P0 （分析纯）0.2195g溶于水，移入1L容量瓶，加水约400ml，加入5ml浓24HSO （或浓硝酸），用水定容，装入塑料瓶中低温保存）24钒钼酸铵试剂：A液：将25忌的钼酸铵［(呵6M°7°24・彎，分析纯］溶于400mL水中。

B液：将1.25g的偏钒酸铵(NHVO，分析纯)溶于300mL沸水中，冷却后，加入250mL浓硝酸(分析纯)，冷却至室温43将A液缓缓注入B液中，不断搅匀，加水稀释到1L,贮入棕色瓶中3、 测定步骤吸取消煮好的待测液20.00 mL (含P 0.05~1.0mg)置于50ml容量瓶中，加2,6-二硝基酚(或2,4-二硝基酚)指示剂2滴， 用6mol・L-iNaOH调pH至刚显黄色，准确加入钒钼酸铵试剂10.00mL，用水定容，摇匀同时做空白实验15min后，用分光光度 计在450nm处比色，以空白液调节吸光值的零点标准曲线制作：准确吸取50ug・mL-1的P标准溶液0、1.0、2.5、5、7.5、10.0、15.0mL,于50mL容量瓶中，加与吸取的待测液 等量的空白消煮液，同上述操作步骤显色和比色该标准系列P的浓度分别为0、1.0、2.5、5、7.5、10.0、15.0 ug・mL-1 P4、 结果计算植株全P(%)=p • VX分取倍数X10-4 /m式中：p ――从标准曲线査得显色液P的质量浓度(ug/mL)V ――显色液体积(mL)分取倍数：定容体积/分取体积， 100/10m 烘干样品质量(g)10-4—将 ug/L浓度单位换算为百分含量的换算因数5、 注意事项显色液的酸度要求在0.04~1.6mol.L -1H+内，酸度过高时，显色不完全或不显色，酸度太低时则可能生成沉淀或其它物质的颜色； 比色要在15min后、24h内完成。

四、植株全钾的测定(H2SO4—H2O2消煮，火焰光度法)1、 方法原理植物体内的钾几乎全部以离子状态存在于植物组织中，样品经消煮或浸提，并经稀释后，待测液中的K可用火焰光度法测定2、 主要仪器、试剂(1) 主要仪器：容量瓶(50ml 8个、1000ml)；移液管(1.0、5.0、10ml)+吸耳球、火焰光度计2) 试剂：100 ug・mL-1K标准溶液(准确称取在105°C干燥2h后的0.1907gKCl,溶于水，于1L容量瓶中定容，存于塑料瓶中3、测定步骤吸取消煮好的待测液5.000mL (含K 10 mg/L~50 mg/L)，置于50 mL容量瓶，用水定容，摇匀，直接在火焰光度计上测定， 读取检流计读数标准曲线制作：准确吸取100 ug ・mL-1K标准溶液0, 0.5，1.0, 2.5, 5.0，10, 20ml，分别放入50ml容量瓶中，加入与吸 取的待测液等量的空白消煮液，加水定容即得0, 1, 2, 5, 10, 20, 40mg/L K的标准系列溶液以浓度最高的标准溶液定火焰光 度计检流计的满度，然后从稀到浓依次进行测定，记录检流计读数，以检流计读数为纵坐标绘制标准曲线。

4、 结果计算植株全钾(%)=p • VX分取倍数X10-4 /m式中：p :从标准曲线査得显色液K的质量浓度(ug ・mL-1)V：测定液体积(mL) 50ml分取倍数：定容体积/分取体积， 100/10m：烘干样质量(g)10-4：将ug/L浓度单位换算为百分含量的换算因数5、 注意事项(1) 按要求制作标准曲线；(2) 标准溶液和待测液的组成要基本相同因为，溶液组成的改变(包括酸碱、阴、阳离子的浓度)对测定结果有影响；(3) 仪器状态(如空气压力、火焰的状态等)对测定结果有影响植物全氮、磷、钾的测定植物中氮、磷、钾的测定包括待测液的制备和氮磷钾的定量两大步骤植物全氮待测液的制备通常用开氏消煮法(参考有机肥 料全氮的测定)植物全磷、钾可用干灰化或其他湿灰化法制备待测液本书介绍HSO—H O消煮法，可用同一份消煮液分别测定2 4 2 2氮、磷、钾以及其它元素(如钙、镁、铁、锰等)一、 植物样品的消煮(HSO—H 0法)2422方法原理植物中的氮磷大多数以有机态存在，钾以离子态存在样品经浓HSO和氧化剂H0消煮，有机物被氧化分解，有机氮2422 和磷转化成铵盐和磷酸盐，钾也全部释出消煮液经定容后，可用于氮、磷、钾等元素的。