病原性球菌及检验.docx

二、链球菌属（—）概念链球菌属为触酶阴性，兼性厌氧，呈圆形或卵圆形的革兰阳性球菌，在液体培养基中生长时 易形成长链而表现为沉淀生长（但肺炎链球菌为混浊生长）二）生物学特性1•形态与染色：革兰染色阳性菌体呈圆形，直径为0.8〜l.Op m,呈链状排列，在液体培 养基中易成长链在脓汁标本中为短链，成双或单个散在无鞭毛、无芽胞、某些菌株在血 清肉汤中可有荚膜2•培养特性：本属细菌大多为需氧或兼性厌氧菌，少数微需氧及专性厌氧营养要求较高， 在含有腹水的培养基上生长良好最适温度为35°C〜37°C，最适pH为7.4〜7.6,在5%C02 环境下生长更好在血琼脂平板上，经35C 18〜24h培养后可形成灰白色、圆形、 凸起、直径为0.1〜0.75mm细小菌落，菌落周围出现不同溶血环3•生化反应：本属细菌触酶试验阴性（与葡萄球菌属鉴别）A群琏球菌B群琏球菌D群琏球菌a -溶血性琏球菌杆菌肽（S）CAA1P试验，马尿醍水解试验（-）Optochin耐药(-)/胆汁溶解与肺炎琏球菌鉴4.分类（1） 根据溶血能力分类：利用链球菌在血平板上溶血情况分为三类，1） 甲型（a ）溶血性链球菌：又称草绿色链球菌本菌为条件致病菌。

2） 乙型（B ）溶血性链球菌：通称溶血性链球菌，透明溶血环该型细菌致病性最强，常 引起人和动物多种疾病3） 丙型（丫）链球菌：无溶血环一般无致病性2） 根据链球菌细胞壁抗原（即C抗原）分类：即常用Lancefield血清分型法，将链球菌 分为A、B、C、D……T等18个群（其中I和J缺），对人类有致病性的90%属 A 群, B、C、 D、G群链球菌感染较少见5•对理化因素的抵抗力：不强三）致病性A群链球菌：―猩红热所致疾病急性化脓性感染丹羞,痈,蜂窝组织炎, 咽炎,豊卖炎，中耳炎, 脑膜炎，产溥热*凤湿热（关节，心脏）变态反应性疾病＜肾小球肾炎草绿色链球菌：属条件致病菌，常与亚急性心内膜炎相关B群链球菌：是新生儿肺炎、脑膜炎和败血症的病原体D群链球菌：引起呼吸道和泌尿道感染治疗原则：A群链球菌感染，青霉素G被列为首选B群链球菌常采用青霉素G和一种氨基糖苷类合用四）微生物学检验方法与原理1•标本采集：不同疾病采集不同标本2. 检验方法及鉴定（1） 直接镜检：革兰染色，镜检如符合链球菌的形态特征可初报2） 直接检测抗原3） 分离培养：血液标本，以无菌操作取两份血液各8〜10ml，分别注入肉汤培养基，分 别置需氧和厌氧环境中增菌，有细菌生长，然后分别接种于两个血平板，置需氧和厌氧环境 中培养。

脓汁和咽拭标本接种血平板并涂片染色镜检，若形态酷似链球菌，并革兰阳性，可 初报上述的培养物经35°C18〜24h培养后，观察菌落特征和溶血情况链球菌的菌落通常 较小，透明或半透明，似针尖大小、凸起，菌落周围可出现a -溶血或B -溶血，也可不出现溶血然后取可疑菌落经涂片、染色镜检证实甲型溶血性链球菌和肺炎链球菌可产生 a -溶血，它们的菌落形态非常相似，应予以区别猪链球菌在羊血平板上为a溶血，在兔 血平板上呈B溶血4）鉴定：见生化反应三、肺炎链球菌（—）概念肺炎链球菌属链球菌科，链球菌属二） 生物学特性1•形态与染色：革兰阳性，呈矛头状，成双排列，球菌有荚膜（在人或动物体内易形成）， 无鞭毛，无芽胞2•培养特性：需氧或兼性厌氧最适的温度为35°C〜37°C，最适的pH7.6〜8. 0营养要求 较高在血琼脂平板上可形成脐状菌落，周围有草绿色溶血圈在液体培养基中培养时间过长，可因产生自溶，培养液可变澄清，管底沉淀3•生化反应：菊糖、胆汁溶解试验阳性、Optochin敏感试验阳性与草绿色链球菌的鉴 别三） 致病性致病物质：荚膜所致疾病主要有大叶性肺炎、支气管炎四） 微生物学检验方法与原理1. 标本米集2. 试验方法及鉴定（1） 直接涂片检查：经革兰染色，镜检见革兰阳性矛尖状双球菌。

2） 分离培养：血液、脑脊液需增菌培养，经葡萄糖硫酸镁肉汤增菌后，肺炎链球菌可呈 均匀混浊，而且有绿色荧光无须增菌培养的脓汁或脑脊液沉渣接种于血琼脂，置5%〜 10%C02环境中，经35C 18〜24h培养后观察茵落，并取可疑菌落作进一步鉴定3） 鉴定试验1） 胆汁溶解试验：阳性2） 菊糖发酵试验：阳性3） 动物试验：小白鼠对肺炎链球菌极为敏感4） 荚膜肿胀试验：阳性5） Optochin敏感试验：阳性6） 快速乳胶凝集试验阳性四、 肠球菌属（—）概念肠球菌属是肠道的正常栖居菌二） 生物学形状为革兰阳性，成双或短链状排列的卵圆形球菌，无芽胞，无荚膜，部分肠球菌有稀疏鞭毛 营养要求高，需氧及兼性厌氧，在胆汁七叶苷和含6.5%NaCl培养基中可以生长（此点可与 链球菌鉴别）在血平板上主要表现为Y -和a -溶血触酶阴性，多数肠球菌能水解吡咯 烷酮-B -萘基酰胺（PYR）与同科链球菌的显著区别在于肠球菌能在高盐（6.5%NaCl）、高碱（pH9.6）、40%胆汁培养 基上和10°C〜45°C环境下生长，并对许多抗菌药物表现为固有耐药目前，肠球菌是革兰阳性菌中仅次于葡萄球菌属的重要医院感染病原菌，其所致感染中最常 见的为尿路感染，其次为腹部和盆腔等部位的创伤和外科术后感染。

临床上分离率最高的是 粪肠球菌，其次是屎肠球菌粪肠球菌的某些菌株在马血、兔血平板上出现B溶血三） 微生物学检查方法与原理合理采取相应标本，如尿液、脓汁、胆汁、分泌物或血液等，以直接涂片进行初步检查分 离培养后，挑取可疑菌落，进行涂片、染色、镜检、触酶试验、胆汁七叶苷试验和6.5%NaCl 耐受试验，可鉴定到属如鉴定到种还需进行必要的生化试验对具有临床意义的肠球菌应 进行体外药敏试验，一般要测试对B -内酰胺类尤其是青霉素类（如青霉素、氨苄西林）、 万古霉素和氨基糖貳类（如庆大霉素）的敏感性，耐万古霉素肠球菌（VRE）国外检出率较 国内高四） 治疗原则治疗肠球菌感染一般采用B-内酰胺类和氨基糖貳类联合治疗五、 ^奈瑟、菌^属奈瑟菌属为一大群革兰阴性双球菌，无鞭毛，无芽胞，有菌毛专性需氧，氧化酶阳性本 属主要有9个种其中对人致病的是脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌一）脑膜炎奈瑟菌1. 概念脑膜炎奈瑟菌简称脑膜炎球菌，是引起流行性脑脊髓膜炎（简称流脑）的病原体2. 生物学特性（1） 形态与染色：为革兰阴性双球菌，菌体呈肾形，成对排列，坦面相对，菌体直径0.6〜 1.5“m,在患者的脑脊液中位于中性粒细胞内。

2） 培养特性：营养要求高，属苛养菌，必须在含有血清或含有多种氨基酸，无机盐等物 质的培养基上生长良好3） 生化反应：绝大多数菌株能分解葡萄糖和麦芽糖，产酸不产气（因淋病奈瑟菌不分解 麦芽糖，借此与之鉴别），触酶试验阳性，氧化酶试验阳性4） 抗原及分型：主要有四种抗原：荚膜多糖群特异性抗原、外膜蛋白型特异性抗原、脂 多糖抗原及核蛋白抗原根据群特异性荚膜多糖抗原不同，采用凝集反应和琼脂扩散试验可 将本菌分为 A、B、C、D、X、Y、Z、1916、29E 和 W135 等目前，对人致病的主要是A群偶见8群、C群及1916群引起散发病例3•临床意义致病物质：菌毛，荚膜，内毒素所致疾病：脑膜炎奈瑟菌是流行性脑脊髓膜炎的病原菌主要表现发热，皮肤瘀斑，脑膜刺 激症状存在于携带者或病人的鼻咽部，借飞沫经空气传播，冬末春初为流行高峰4.微生物学检验（1） 标本采集：血液；瘀斑渗出液；脑脊液；鼻咽分泌物因本菌能产生自溶酶，易自溶, 故采集的标本不宜置冰箱，应立即送检2） 检验方法及鉴定：1） 直接涂片检查：取脑脊液离心后沉淀物涂片或刺破瘀斑血印片，干燥固定后革兰染色 若发现中性粒细胞内（或胞外）革兰阴性双球菌，呈肾形成对排列，可初报。

2） 分离培养：将标本葡萄糖肉汤增菌培养液直接接种于血琼脂平板、巧克力琼脂或EPV琼 脂，置5%〜10%C02环境中，35°C培养18〜24h后可见圆形、灰褐色、湿润、光滑、边缘整 齐、直径1〜2mm的小菌落，经涂片证实为草兰阴性双球菌，并进一步根据相应的生化反应 等试验予以鉴定3） 鉴定：①细菌染色形态；②氧化酶试验阳性；③触酶试验阳性；④分解葡萄糖、麦芽糖 产酸不产气；⑤荚膜多糖抗原直接凝集试验5•治疗原则：青霉素G为首选，三代头抱对脑膜炎奈瑟菌也具有很强的抗菌活性青霉素过 敏的病人可考虑选用三代头抱或氯霉素二）淋病奈瑟菌1•概念：淋病奈瑟菌简称淋球菌，是淋病的病原体，人类是其唯一的天然宿主和传染源2.生物学特性（1）形态与染色：本菌的形态与脑膜炎奈瑟菌很相似在脓汁标本中，此菌通常位于中性粒细胞内，而在慢性淋病时常位于细胞外从患者体内新分离的菌株可有荚膜和菌毛，经人 工培养后，呈卵圆形或球形，排列不规则无芽胞和鞭毛2） 培养特性：营养要求较高，须在含有血液、血清或多种氨基酸和无机盐类物质的培养 基上生长良好国内常用血液琼脂、巧克力琼脂、EPV琼脂等培养基初次分离时，须置5%〜 10%C02条件下才能生长。

3） 生化反应：可发酵葡萄糖、产酸，但不酵解麦芽糖（常借此与脑膜炎奈瑟菌相鉴别） 氧化酶和触酶试验均阳性主要有三种抗原：菌毛蛋白抗原、脂多糖抗原和外膜蛋白抗原 对外界抵抗力极低3. 微生物学检验（1） 标本采集：脓性分泌物，尿道拭子，宫颈口分泌物，结膜分泌物，血液2） 检验方法及鉴定：1） 直接涂片检查：收集标本后立即涂片、革兰染色镜检时见中性粒细胞内数对革兰阴性 双球菌，可初报2） 分离培养：细菌培养仍是目前世界卫生组织推荐的筛选淋病患者的唯一方法所采集的 标本应及时接种含有两种以上抗生素（万古霉素和多粘菌素等）的营养培养基（EPV）上 淋球菌对培养基的营养要求很高，且对冷、热、干燥和消毒剂抵抗力低，故采样后须立即接 种于预温的选择性培养基和非选择性培养基中，如巧克力平板，置于含5%〜10%的二氧化碳 环境中，35°C培养48h取小而透明似水滴状、无色素易乳化菌进一步鉴定3） 鉴定：取可疑菌落进行涂片，革兰染色镜检，若见革兰阴性双球形，①生化反应：氧化 酶阳性，仅分解葡萄糖产酸；②免疫学方法：荧光抗体染色法、协同凝集试验；③核酸探针 杂交法氧化酶试验阳性，可初判，并进行相关的生化反应，如仅发酵葡萄糖而不发酵麦芽 糖与蔗糖，以及30%H202试验阳性可与脑膜炎奈瑟菌等相鉴别。

4•临床意义：淋病奈瑟菌是常见的性传播疾病淋病的病原菌，主要通过性接触直接侵袭感染 泌尿生殖道，口咽部及肛门直肠的黏膜如单纯性淋病、盆腔炎、淋菌型结膜炎5•治疗原则：一般为三代头抱菌素，氟喹诺酮类、壮观霉素可作为替代药物本章练习题：淋病奈瑟菌与脑膜炎奈瑟菌用哪项实验鉴别A. 葡萄糖发酵试验B. 麦芽糖发酵试验C. 氧化酶试验D. 触酶试验E. 革兰染色正确答案：BSPA是A. 肠杆菌科的细菌的抗原B. 葡萄球菌细胞壁的蛋白成分C. 沙门菌的表面抗原D. 核蛋白抗原E. 链球菌属表面抗原正确答案：B鉴别肺炎链球菌与甲型溶血性链球菌可用A. 外斐试验B. 肥大试验C. 乳糖发酵试验D. 菊糖分解试验E. 血浆凝固酶试验正确答案：D耐甲氧西林的表皮葡萄球菌为A. MRSAB. MRSEC.。