土壤速效氮的测定.docx

土壤铵态氮的测定（KCl浸提一靛酚蓝比色法）方法原理：用2mol/L KCl溶液浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH4+浸提出来土壤浸出液中的铉态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和 苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的颜色很稳定在含氮0.05-0.5mg/L的范围内，吸光度与铉态氮含量称正比，可用比色法测定主要仪器：往复震荡机分光光度计试剂配制：1. 2mol/L KCl溶液:称取149.1g氯化钾（KCl，化学纯） 溶于水中，稀释至1000ml2. 苯酚溶液：称10g苯酚和亚硝基铁氤化钠100mg稀释至1000ml 此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，4°C冰箱保存3. 次氯酸钠碱性溶液：称取氢氧化钠 10g、Na2HPO4.7H2O 7.06g、 Na3PO4.12H2O 31.8g和52.5g/L次氯酸钠（即含5%有效氯的漂白粉溶 剂）10ml溶于水中，稀释至1000ml，贮于棕色瓶中，在4C冰箱保 存4. 掩蔽剂：将400g/L的酒石酸钾钠与100g/L的EDTA=钠盐溶液 等体积混合每100ml混合液中加入10mol/L氢氧化钠溶液0.5ml5. 铉态氮标准液配制：称取干燥的硫酸铉0.4717g溶于水中，洗入 容量瓶后定容至1000ml，制备成含铉态氮100ug/mL的贮存溶液； 使用前加水稀释40倍，得2.5 ug/mL标准溶液。

操作步骤：称取过20目筛的风干土样5g，加入氯化钾溶液50ml，振 荡1小时，取出静置，吸取上清液10ml进行分析（如果不能在24h 内进行分析，用滤纸过滤悬浊液储存在冰箱中备用）将10ml上清液 吸入50ml试管内，加5ml苯酚溶液，5ml次氯酸钠碱性溶液，摇匀在20°C室温下放置1小时，加掩蔽剂1ml以溶解可能产生的沉淀物， 然后用水定容至刻度，在625纳米处比色，读取吸光值标准曲线绘制：分别吸取0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ml铵态氮标 准液于50ml试管中，各加10ml氯化钾溶液，加5ml苯酚溶液，5ml 次氯酸钠碱性溶液，摇匀在20C室温下放置1小时，加掩蔽剂1ml 然后用水定容至刻度，在625纳米处比色，读取吸光值注：显色后在20C左右放置1小时，再加入掩蔽剂过早加入会使 显色反应很慢，蓝色偏弱；加入过晚，则生成的氢氧化物沉淀可能老 化而不易溶解土壤硝态氮的测定试剂配制：1. 2mol/L KCl溶液:称取149.1g氯化钾（KCl，化学纯） 溶于水中，稀释至1000ml2. KNO3 标液配制：100ug/mL KNO3 贮存液，称 0.7221g KNO3 溶于 1000ml水中；稀释此溶液10倍即得10ug/mL KNO3标准液。

3.10% H2SO4操作步骤：1.与铵态氮一块浸提，共用浸提液2.吸取土壤浸提液5ml （用KCl溶液补至10ml）或10ml于50ml试管 中，加10% H2SO4 1ml，然后定容至刻度，分别在210和275纳米下 比色，读取吸光值标准曲线绘制：分别吸取KNO3标准液0、1、2、4、6、8、10ml于 50ml试管中，各加10ml氯化钾溶液，加10% H2SO4 1ml,然后定容 至刻度，分别在210和275纳米下比色，读取吸光值。