微生物学临床标本的收集.doc

微生物学临床标本的收集、运送标本收集的基本原则1.在最适宜的时间收集标本 进行培养的标本应该在感染的急性期和使用抗生素之前收集以伤寒为例说明最佳时间收集标本的重要性，疾病第一周的伤寒杆菌最容易从血液中发现第2~3周粪便和尿液培养常为阳性，第2周血清凝集素开始上升，第5周达到高峰，在疾病临床缓解后的许多周仍然可以检测到2.必须从实际感染的部位得到临床标本，并尽可能避免临近组织、器官或分泌物的污染例如从肺炎病人的痰液中发现了肺炎克雷伯氏杆菌，由于收集痰液不适当，实际上收集的是唾液，这种菌可能是鼻窦、鼻孔或咽喉后部的共生菌，而不是引起肺炎的真正病原，在这种情况下，抗肺炎克雷伯氏杆菌的治疗是不合适的；再如取伤口深部及窦道的引流物，碰到临近表皮；在收集妇女的尿液标本前，尿道旁组织和会阴清洗不彻底；阴道分泌物污染了子宫内膜标本等导致培养失败，以至影响到病人的治疗3.必须取得足够量的标本，以满足培养的要求送到实验室的标本，往往只有0.5ml或更少，要求实验室做常规、抗酸菌和霉菌培养，这样的标本可能不代表肺部分泌物，且量又不足倘若临床上需要检查的话，应该重新收集标本4.必须使用适当的收集器材、标本容器和培养基，以保证最大限度的发现微生物。

病人取材部位的准备部位 准备血液培养 皮肤准备，酒精，20%碘酊体液（无菌） 皮肤准备与血培养相同导管末端 插入前用碘处理，标本排出前用酒精除掉润滑剂或血液引流部位 抽出物或组织是第一选择，必须从引流源得到眼 清洁眼周围的皮肤，用试子收集化脓性材料或角膜刮出物，并在床边接种培养基，刮取角膜时可用局部麻醉真菌的刮出物 用70%酒精清洁表皮，经无菌水或无菌盐水中浸湿的纱布清洁表皮，然后用手术刀刮出病变周围的部分宫颈/阴道使用扩张器，培养前除掉有粘液的阻塞物再取材，刮取接近后穹隆部的分泌物前要去掉过多的分泌物,.尿道 1小时前让病人不要去排尿，再用涤纶试子收集，插入试子2~4cm，停留2~3秒后轻轻地旋转再抽出试子损伤/伤口/脓肿损伤/脓肿 未打开的脓肿：皮肤处理同血培养 打开的伤口：移去填料，用3%H2O2清洗烧伤伤口 培养前移去焦痂或获得活检标本活检 皮肤准备同血培养痰液 让病人移去牙托，清洗口和用水漱口粪便 避免尿液的污染尿液 收集前用防腐剂小毛巾清洁周围区域，每次使其收集在盒子内标本的运送一、 抗凝剂的应用多聚茴香脑钠磺酸钠（SPS）是微生物学标本常用的抗凝剂，重要的是SPS的浓度不得超过0.025%（w/v），一些奈瑟氏菌和厌氧性链球菌在0.025%到0.05%的浓度中受到抑制。

肝素是微生物学中常用的抗凝剂之一，但常用于病毒培养，肝素能抑制革兰氏阳性菌和酵母菌的生长二、 标本运送的保护标本优先水平水平 描写 标本1 危急的/易被污染的 脑脊液、心包液、脑组织、羊水、血液、支气管气泡灌液、心脏瓣膜、玻璃体/水状液2 为保护可能退化或杂菌丛生 痰液、为列入水平1的体液、组织、伤口排水，粪便、脓液、骨头3 数量影响到精密度 尿液、定量的组织4 保护/保存 装着培养基的试子（需氧的或厌氧的）水平1：标本必须分类为“危险的”，由于疾病的入侵性质和严重性，标本必须立即处理；水平2：标本为保护并且能很快退化或污染的菌群能很快的大量繁殖，从而改变这些标本的性质，必须很快提供适合生长的环境，使这些标本中营养要求高的微生物得以被发现；水平3：标本需要定量的尿液和定量组织活检标本属于水平3，延迟处理水平3的标本会影响到量的精密度；水平4：标本在送往实验室时已装入培养基内，是具有保护的标本，为了处理好较高水平的标本，水平4标本可以延迟处理。

下呼吸道和痰液病人预先用水漱口，立即获取标本，以下情况需喉（经气管）吸出痰液：1. 病人虚弱而不能自行咳出痰液标本；2. 常规痰液标本不能发现临床细菌性肺炎的致病菌；3. 可疑一种厌氧菌的肺部感染Lentino and Lucks 评价用于痰培养的标本有如下情况：1. Bartlett 和Murray及Washington的痰质量分析系统，48%的送往实验室的痰培养未通过质量分级，而较多是口腔分泌物；2. 26.5%的脓痰标本来自未显示出放射学和临床症状证据的病人；3. 40%的痰标本来自未深入祛痰而叫多的是口腔分泌物的病人；4. 仅有56.8%有症状的病人产生脓痰 呼吸道共生菌和病原微生物共生菌 可能的病原菌 所需分离培养基α链球菌 A族β溶血性链球菌 5%羊血琼脂，伴或不伴复方新诺明变异链球菌唾液链球菌 肺炎链球菌肺炎链球菌 肺炎克雷伯氏菌和其他肠道细菌 5%羊血琼脂和麦康克琼脂A族β链球菌 铜绿假单胞菌 5%羊血琼脂葡萄球菌 淋病奈瑟氏球菌和脑膜炎瑟氏菌 改良的Thayer-马丁培养基金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌嗜血杆菌属 金黄色葡萄球菌 含有大肠菌素和奈啶酸的马血奈瑟氏菌属 流感嗜血杆菌b型和不能分型的 巧克力琼脂流感嗜血杆菌棒状杆菌属 白喉棒状杆菌 吕弗勒或Pai斜面和亚碲酸盐血清琼脂大肠杆菌和其他肠杆菌科 卡他莫拉氏菌、棒状杆菌SPP 5%羊血或巧克力琼脂厌氧菌 百日咳鲍特氏菌 博-金二氏马铃薯琼脂或Regan和Lowe培养基 分枝杆菌 罗氏（L-J）鸡蛋培养基和/或MiddlebrookZH11琼脂，CYE琼脂 按下表判断口痰标本是否合格: 尿液为更好地从妇女收集洁净的尿液标本，尿道周围区域和会阴应该用肥皂水清洗，再用消毒盐水或水彻底冲洗。

获得洁净尿液标本（女性）的方法指导：1. 脱掉内裤，轻松地坐在座位上，膝部尽可能向外放开；2. 用自己的手将阴唇分开，并在清洗和收集标本中保持此状态；3. 清洗：收集尿液标本前一定要清洗好和冲洗好，浸泡在10%的绿色肥皂中，用“4*4”消毒海绵从患者身体前面向后擦洗，注意洗净皮肤皱襞；4. 冲洗：用肥皂液海绵擦洗后，用相同的由前向后的动作以消毒海绵冲洗，海绵不得重复使用；5. 手持杯子，使尿液排至杯内，若手接触到杯的内部或杯摔在地板上，则再一个新的杯子；6. 盖好容器，或请护士给你盖好容器执行这种操作的好坏，可通过记下尿液标本出现每毫升尿中有10，000~100，000菌落数的频率来进行监测病人无尿道感染时，应该无细菌或仅有很少几个菌落；尿道感染时通常每毫升尿的微生物在100，000以上；若尿液由病人正确收集时，则每毫升尿的菌落数在10，000到100，000之间的数字应该是罕见的若发现3种以上的细菌，一般表明标本由于收集不正确或延误了运送时间而被污染宫颈/阴道分泌物使用扩张器，培养前除掉有粘液的阻塞物再取材，刮取接近后穹隆部的分泌物前要去掉过多的分泌物,再取相应位置标本.临床微生物学血液培养操作规范1.标本收集 静脉穿刺的位置应该严格消毒，使皮肤污染减少到最低程度。

血培养的污染率不能超过3%2.数量和时间问题 大多数学者主张，24小时内 血培养3次，从3次血培养中发现微生物的累积率为99%或更高在体温升高前1小时进行血培养是理想的，因为这时血循环中微生物的浓度最高3.血培养量 每次从成人静脉穿刺至少采取10毫升血液,婴儿和儿童为1~5毫升.。