紫外分光光度法.docx

紫外分光光度法定量分析实验以物质对不同波长的单色光的吸收程度不同而对物质进行定性和定量分析 的方法称为分光光度法紫外-可见光光谱仪涉及的波长范围是0.2--0.8“m,它 通常用作物质鉴定、纯度检查，有机分子结构的研究在定量方面，可测定结构 比较复杂的化合物和混合物中各组分的含量，也可以测定物质的离解常数，络合 物的稳定常数，物质分子量鉴别和微量滴定中指示终点以及在高效液相色谱中作 检测器等一、 实验目的1. 掌握分光光度法进行定量分析技术2. 熟悉紫外分光光度计的操作流程3. 了解分光光度法的特点二、 实验机理紫外分光光度法是利用一定频率的紫外-可见光照射被分析的有机物质，引 起分子中价电子的跃迁，它将有选择地被吸收一组吸收随波长而变化的光谱， 反映了试样的特征紫外可见光的范围内，对于一个特定的波长，吸收的程度正 比于试样中该成分的浓度，因此测量光谱可以进行定性分析，而且根据吸收与已 知浓度的标样的比较，还能进行定量分析三、 实验设备和仪器UV2600紫外-可见光分光光度计四、 实验步骤1. 先开机，再开仪器2. 打开桌面上2600应用程序将仪器与电脑连接，点击“联机”3. 等仪器初始化就绪后，点击“光度扫描”在“设置”上点击“参数”和“范 围”设定其参数及范围。

4. 一切就绪后，放入参比液和标准样，点击“扫描”得出光谱扫描图从此图 中可看出标准样的最大吸收波长5. 在最大吸收波长下作时间扫描，点击“时间扫描”在“设置”上点击“参数” 和“范围”设定其参数及范围可得出此溶液的稳定时间6. 在最大吸收波长下作定量测量，测定不同浓度标准液的吸光度，得出标准曲 线然后放入样品液，测定其吸光度，得出其浓度7. 退出程序8•关机五、数据处理标样：二甲酚橙储备液浓度：250mg/L标样浓度：分别取2ml，4 ml，6ml，8 ml，10ml储备液移取到50 ml容量瓶，定 容最大吸收波长： nm实验12345标准液浓度10 mg/L20 mg/L30 mg/L40 mg/L50 mg/L吸光度标准曲线方程:样品液吸光度:样品液浓度：。