五日生化需氧量作业指导书(I).doc

五日生化需氧量的测定（稀释法）指导书1 方法依据水质 五日生化需氧量（BOD5）的测定 稀释与接种法 HJ 505—20092 适用范围 2.1 本标准规定了测定水中五日生化需氧量的稀释与接种的方法 2.2 本标准适用于地表水、工业废水和生活污水中五日生化需氧量的测定 2.3 方法的检出限为0.5 mg/L，方法的测定下限为2 mg/L，非稀释法和非稀释接种法的测定上限为6 mg/L，稀释与稀释接种法的测定上限为6000 mg/L3 试剂和仪器 3.1 试剂3.1.1 水：实验用水为符合 GB/T 6682 规定的3级蒸馏水，且水中铜离子的质量浓度不大于0.01 mg/L，不含有氯或氯氨等物质3.1.2 盐溶液 3.1.2.1 磷酸盐缓冲溶液：将8.5g磷酸二氢钾（KH2PO4）、21.8g磷酸氢二钾（K2HPO4）、33.4g七水合磷酸氢二钠（Na2HPO4·7H2O）和1.7g氯化铵（NH4Cl）溶于水中，稀释至1000ml，此溶液在0~4℃可稳定保存6个月此溶液的pH值为7.2 3.1.2.2 硫酸镁溶液，ρ(MgSO4）=11.0g/L：将22.5g七水合硫酸镁（MgSO4·7H2O）溶于水中，稀释至1000ml，此溶液在0~4℃可稳定保存6个月，若发现任何沉淀或微生物生长应弃去。

3.1.2.3 氯化钙溶液，ρ(CaCl2）=27.6g/L：将27.6g无水氯化钙（CaCl2）溶于水中，稀释至1000ml，此溶液在0~4℃可稳定保存6个月，若发现任何沉淀或微生物生长应弃去 3.1.2.4 氯化铁溶液，ρ(FeCl3）=0.15g/L：将0.25g六水合氯化铁（FeCl3·6H2O）溶于水中，稀释至1000ml，此溶液在0~4℃可稳定保存6个月，若发现任何沉淀或微生物生长应弃去3.1.3 稀释水：在5~20L的玻璃瓶中加入一定量的水，用曝气装置曝气2~8小时，使稀释水中溶解氧接近饱和曝气后静置至1小时，临用前每升水中依次加入磷酸盐缓冲溶液、硫酸镁溶液、氯化钙溶液、氯化铁溶液各1ml，并混合均匀 3.1.4 碘化钾溶液, ρ(KI）=100g/L:将10g碘化钾（KI）溶于水中，稀释至100ml3.1.5 1+5硫酸3.1.6 重铬酸钾标准溶液，ρ(K2CrO7）=0.02500mol/L3.1.7 硫代硫酸钠溶液3.1.8 硫酸锰溶液3.1.9 浓硫酸3.1.10 淀粉溶液，ρ=5g/L：将0.50g淀粉溶于水中，稀释至100ml3.2 仪器 3.2.1 稀释容器：1000~2000ml的量筒或容量瓶。

3.2.2 恒温培养箱：（20±1）℃ 3.2.3 曝气装置：多通道空气泵或其他曝气装置4 分析步骤 4.1 水样的稀释与培养：按照计算的稀释比例（即由ＣＯＤ的值分别乘以系数０．０７５、０．１５、０．２２５获得三个稀释倍数，从而得出取样量），用虹吸法沿筒壁先引入部分稀释水于1000ml量筒中，加入需要量的均匀水样，再加入稀释水至800ml，用带胶板的玻棒小心上下搅匀搅拌时勿使玻棒的胶板露出水面，防止产生气泡随后缓缓沿瓶壁分别加入到两个250ml溶解氧瓶中，直至溢出，防止产生气泡其中一瓶随即测定溶解氧，另一瓶的瓶口进行水封后，放入培养箱中，在20℃±1℃培养5天后测定溶解氧注：（1）不经稀释的水样可直接转移入两个溶解氧瓶内，转移过程中应注意不使产生气泡以同样的操作使两个溶解氧瓶充满水样后溢出少许，加塞瓶内不应留有气泡；（2）水样在培养过程中要注意添加封口水；（3）水样稀释倍数超过100倍时，应预先在容量瓶中用水初步稀释后，再取适量进行稀释培养 4.2 空白试验：取两个溶解氧瓶，用虹吸法装满稀释水作为空白，分别测定培养前后的溶解氧含量注：（1）空白试验和水样的分装一样，不能产生气泡，防止溶解氧值发生偏差；（2）五天前后空白浓度差应≤０．２ｍｇ／ｌ。

4.3 标定：在250ml的碘量瓶中加入100ml的水和1g碘化钾，加入10.00ml 0.02500mol/l重铬酸钾标准溶液、5ml（1+5）硫酸，密塞 ,暗置5min后，用硫代硫酸钠滴定至淡黄色，加入1ml淀粉溶液，继续滴定至蓝色刚好褪去为止，记录用量注：每天都要进行标定，记录读数以用于最后结果的计算 4.4 溶解氧的测定（碘量法）：在液面下，加入1ml硫酸锰溶液、2ml碱性碘化钾，盖好瓶塞，颠倒混合数次，静置待棕色沉淀物降至瓶内一半时，轻轻打开瓶塞，在液面下加入2ml硫酸，颠倒混合数次，直至沉淀物全部溶解，暗置5min移取100.0ml上述溶液于250ml锥形瓶中，用已标定的硫代硫酸钠溶液滴定至呈淡黄色，加入1ml淀粉溶液，继续滴定至蓝色刚好褪去为止，记录硫代硫酸钠溶液用量注：培养后，加入固定剂后颜色很浅，说明稀释的倍数有问题，稀释过大 原因是可能微生物的适应能力下降，或者是样品中存在有毒物质导致微生物不能在此环境中生存5 结果计算 5.1 硫代硫酸钠标定：5.2溶解氧的浓度：O2（mg/l）=5.3 非稀释法：BOD5（mg/l）=C1-C25.4 稀释法：BOD5（mg/l）=式中，V：滴定消耗的体积； C1-C2：五天前后水样中溶解氧值之差；B1-B2：五天前后稀释水中溶解氧值之差；f1：稀释水在培养液中所占比例；f2：水样在培养液中所占比例。

注：f1, f2的计算：例如培养液稀释比为3%，即为3份水样，97份稀释水，则f1=0.97，f2=0.036 注意事项 6.1 虹吸法：连通器的原理，加在密闭容器里液体上的压强，处处都相等而虹吸管里灌满水，没有气，来水端水位高，出水口用手掌或其他物体封闭住此时管内压强处处相等一切安置好后，打开出水口，虽然两边的大气压相等，但是来水端的水位BOD5高，压强大，推动来水不断流出出水口 6.2 BOD5测定的稀释倍数的确定：表1水样的类型总有机碳R高锰酸盐指数R化学需氧量R未处理的废水1.2~2.81.2~1.50.35~0.65生化处理后的废水0.3~1.00.5~1.20.20~0.35 由表1中选择适当的R值按以下公式计算BOD5的期望值：式中：ρ——五日生化需氧量浓度的期望值，mg/l Y——总有机碳、高锰酸盐指数或化学需氧量的值mg/l由估算出的BOD5 的期望值，按表2确定样品的稀释倍数表2BOD5的期望值，氧mg/L稀释倍数水样类型6~122河水，生物净化的城市污水10~305河水，生物净化的城市污水20~6010生物净化的城市污水40~12020澄清的城市污水或轻度污染的工业废水100~30050轻度污染的工业废水或原城市污水200~600100轻度污染的工业废水或原城市污水400~1200200重度污染的工业废水或原城市污水1000~3000500重度污染的工业废水2000~60001000重度污染的工业废水7 附录原始数据表格见附表1 五日生化需氧量分析原始记录表 DL-JC-BG-052-01 广州德隆环境检测技术有限公司五日生化需氧量分析原始记录表任务名称： BOD5 分析方法和依据：《水和废水监测分析方法》 培养前日期：检出下限：2mg/L 计算公式：BOD5=C1－C2 培养后日期：样品类型： 仪器型号：SPL-150型生化培养箱 仪器编号：DL201407(PY) 序号样品编号COD(mg/L)取样体积( mL )稀释比 ( ％ )培养前培养后C1－C2 ( mg/L )B1—B2( mg/L )样品浓度( mg/L )备注V1 ( mL )C1 ( mg/L )V2 ( mL )C2( mg/L )标准溶液名称标准溶液浓度（moL/L）标准溶液加入量（mL）耗NaS2O3使用液量（mL）NaS2O3使用浓度(moL/L)培养前培养后培养前培养后K2CrO7分析： 校核： 审核：DL-JC-BG-052-01 第 页 共 页附表1 五日生化需氧量分析原始记录表 DL-JC-BG-052-01文档可自由编辑打印。