农产品农药残留检测技术.doc

农药残留检测农药残留是指农药使用后残存于环境、生物体和食品中的农药母体、衍 生物、代谢物、降解物和杂质的总称造成蔬菜农药残留量超标的主要农 药是一些国家禁止在蔬菜生产中使用的有机磷农药和氨基甲酸酯类农药， 如甲胺磷、氧化乐果、甲拌磷、对硫磷、甲基对硫磷等食用农药残留超 标的蔬菜，对人体的危害非常严重，容易引起急性中毒，甚至死亡控制农药残留对人体的危害，最为有效的方法之一是加强对食品中农 药残留检测的力度常用的农药残留理化分析方法不但要有昂贵的气相色 普等分析仪器，而且分析方法手续复杂国内外诸多研究者开发研制了多 种农药残留的快速测定方法，包括生物法和化学法目前，国内外化肥污染物硝酸盐快速测定方法主要有硝酸盐电极法、 硝酸盐比色法、硝酸盐试粉试纸法.硝酸盐现场快速测定法是市场经济发 展趋势，其特点是快速、稳定、灵敏、准确定量、携带方便我国研究者 在研究硝酸盐快速测定方法上已有很大的进展，研制出了硝酸盐试纸快速 测定法现在主要是仪器检测，灵敏度高，特异性强，检出极限特别低，痕量都可以 主要是气象色谱法，液相色谱法，酶联免疫分析方法（也就是常说的试剂盒）O 另外针对不同的农药，也有紫外比色，显色剂等方法。

第一部分 种植业产品中农药残留检测方法GB/T 19648-2006水果和蔬菜中500种农药及相关化学品残留量的测 定气相色谱-质谱法GB/T 19649-2006粮谷中475种农药及相关化学品残留量的测定气相 色谱-质谱法GB/T 20769-2008水果和蔬菜中450种农药及相关化学品残留量的测 定液相色谱-串联质谱法GB/T 20770-2008粮谷中486种农药及相关化学品残留量的测定液相 色谱-串联质谱法GB/T 23200-2008桑枝、金银花、枸杞子和荷叶中488种农药及相关 化学品残留量的测定气相色谱-质谱法GB/T 23201-2008桑枝、金银花、枸杞子和荷叶中413种农药及相关 化学品残留量的测定液相色谱-串联质谱法GB/T 23202-2008食用菌中440种农药及相关化学品残留量的测定液 相色谱-串联质谱法GB/T 23204-2008茶叶中519种农药及相关化学品残留量的测定气相 色谱-质谱法GB/T 23205-2008茶叶中448种农药及相关化学品残留量的测定液相 色谱-串联质谱法GB/T 23206-2008果蔬汁、果酒中512种农药及相关化学品残留量的 测定液相色谱-串联质谱法GB/T 23216-2008食用菌中503种农药及相关化学品残留量的测定气 相色谱-质谱法第二部分 养殖业产品中农药残留检测方法GB/T 19426-2006蜂蜜、果汁和果酒中497种农药及相关化学品残留 量的测定气相色谱-质谱法GB/T 19650-2006动物肌肉中478种农药及相关化学品残留量的测定 气相色谱-质谱法GB/T 20771-2008蜂蜜中486种农药及相关化学品残留量的测定液相 色谱-串联质谱法GB/T 20772-2008动物肌肉中461种农药及相关化学品残留量的测定 液相色谱-串联质谱法GB/T 23207-2008河豚鱼、鳗鱼和对虾中485种农药及相关化学品残 留量的测定气相色谱-质谱法GB/T 23208-2008河豚鱼、鳗鱼和对虾中450种农药及相关化学品残 留量的测定液相色谱-串联质谱法GB/T 23210—2008牛奶和奶粉中511种农药及相关化学品残留量的测 定气相色谱-质谱法GB/T 23211—2008牛奶和奶粉中493种农药及相关化学品残留量的测 定液相色谱-串联质谱法第三部分饮用水中农药残留检测方法GB/T 23214—2008饮用水中450种农药及相关化学品残留量的测定 液相色谱-串联质谱法附录GC-MS和1C-MS-MS检测10类农产品和饮用水中812种农药化学品索引首先，无公害农产品生产过程中控制的重点是农药使用。

一是品种 控制，二是安全间隔期的控制其次，无公害农产品标准中检测的 重点是农药残留(种植业产品)一、农药残留检测技术类别1. 农药残留的生物测定技术利用指示生物的生理生化反应来判断农药残留及其污染情况 例如，可以用实验室养的敏感性家蝇为测定材料，以其接触待测样 品后的中毒程度来表示该样品中的杀虫剂残留；以病菌生长受抑制 的程度来检测杀菌剂的残留，以玉米或其它指示植物根长受抑制的 程度来检测土壤中磺酰脉类除草剂残留等该方法无需对样品前处 理比较简单快速或无需进行前处理，但对指示生物要求较高，测定 结果不能确定农药品种，并且可能出现假阳性或假阴性的情况，该 方法可作为快速检验方法用于农产品引起中毒或在现场使用2. 农药残留的理化检测用于农药残留的化学检测方法有分光光度法、极谱法、原子吸 收光谱法、薄层层析法、气相色谱法、液相色谱法、同位素标记法、 核磁共振波谱法、色质联用法等自二十世纪九十年代以来，现代 化学分析技术日新月异，许多新技术已进入实用阶段，如毛细管电 脉仪技术(CZE ),色质联用技术(GC-MS、HPLC-MS )超临界流体色 谱技术(SFC ),直接光谱分析技术等这些新技术的应用，大大提 高农药残留分析的灵敏度，简化分析步骤，提高了分析效率。

但是,这些分析方法有的灵敏度不高，如分光光度法、薄层层析法等有 的需要昂贵的仪器，如色质联用法、核磁共振波谱法等还有的需 要特殊的设备，如同位素标记法等因此，目前，普遍采用的还是 气相色谱法和液相色谱法，它们具有简便、快速、灵敏以及稳定性 和重现性好，线性范围宽、耗资低等优点1） 气相色谱法（GC）采用气体作流动相的色谱法，用于挥发性农药的检测，具有高 选择性、高分离效能、高灵敏度、快速和特点，是农药残留量检测 最常用的方法之一，目前用于农药残留检测的检测器主要有电子捕 获检测器（ECD）、微池电子捕获检测器（u-ECD）、火焰光度检测器 （FPD）、脉冲火焰光度检测器（P-FPD）、氮磷检测器（NPD）等2） 液相色谱法（HPLC）采用液体作流动相的一种色谱法，它可以分离检测极性强、分 子量大及离子型农药，可用于不易气化或受热易分解的农药的检测 近年来，采用新型高效固定相、高压泵和高灵敏度的检测器，柱前 和柱后衍生技术、以及计算机联用等，大大提高了检测效率、灵敏 度、速度和操作自动化程度目前用于农药残留检测最多是紫外吸 收检测器（UV）、两极管阵列检测器（DAD）和荧光检测器（FLD）（3 ）色质联用法（GC-MS, HPLC-MS ）气相或液相与质谱联用，它既具备了色谱的高分离效能优点， 而且具备了质谱准确鉴定化合物结构的特点，可同时达到定性、定 量的检测目的，特别适合于农药代谢物、降解物的检测和多残留检 测等，不过此法需要贵重仪器且操作繁杂困难，不适合于经常性的 检测。

一般可用来做最后的确认工作4) 超临界流体色谱(SFC)是以超临界流体作为流动相的色谱体系，超临界流体是指物质 处于临界温度和临界压力时的状态，介于气、液态之间，兼有气体 和液体的某些物理特性，因此，超临界流体色谱既有气谱的快速、 高效、灵敏的特点，又有能检测对热不稳定和大分子化合物的液谱 的特点5) 毛细管电泳法(CE)该方法是利用毛细管及高电压(15-30KW)分离各种农药残留物， 非常适合于一些难于用传统色谱法分离的离子化样品的分离和分 析，比HPLC有高10-1000倍的分析能力，而且所需之缓冲液具有不 危害环境之特点，在短时间(30分钟)内就可以完成定性及定量分析3. 常用农药残留的快速检测方法(1)酶抑制法：有机磷与氨基甲酸酯农药共为神经系统乙酰胆 碱脂酶抑制物，因此可以利用农药靶标酶-乙酰胆用碱酯酶(AChE ) 受抑制的程度来检测有机磷和氨基甲酸酯类农药该方法目前已开 发出了相应的各种速测卡和速测仪该方法检测时，蔬菜中的水份、 碳水化合物、蛋白质、脂等物质不会对农药残留物的检测造成干扰, 不必进行分离去杂，节省了大量预处理时间，从而能达到快速检测 的目的，因此该方法具有快速方便、前处理简单、无需仪器或仪器 相对简单，适用于现场的定性和半定量测定，目前的农药残留快速 检测就是用了该方法，已上升为农业部行业标准。

但该方法只能用 于测定有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂，其灵敏度和所使用的酶、显 色反应时间和温度密切相关，经酶法检测出阳性后，需用标准仪器 检验方法进一步检测，以鉴定残留农药品种及准确残留量2）免疫分析法：有放射性免疫分析、酶免疫分析、多组份分 析物免疫分析、免疫传感器分析等最为常用的是酶联免疫法（ELTSA 法），它主要是以抗原与抗体的特异性、可逆性结合反应为基础的农 药残留检测方法该法利用化学物质在动物体内能产生免疫抗体的 原理，先将小分子农药化合物与大分子生物物质结合成大分子，做 成抗原，并使之在动物体内产生抗体，对抗体筛选制成试剂盒，通 过抗原与抗体之间发生的酶联免疫反应，依靠比色来确定农药残留, 它具有专一性强、灵敏度高、快速、操作简单等优点，试剂盒可广 泛用于现场样品和大量样品的快速检测，可准确定性、定量但由 于受到农药种类多，抗体制备难度大、在不能肯定样本中的农药残 留种类时检测有一定的盲目性以及抗体依赖国外进口等影响，酶联 免疫法的应用范围受到较大的限制，目前，我国市场上酶联免疫法 成品试剂盒依赖从国外进口3）化学法一速测灵法“速测灵”法应用的原理是具有强催化作用的金属离子催化剂,使各类有机磷农药（磷酸酯、二硫代酸酯、磷酸胺）在催化作用下 水解为磷酸与醇，水解产物与显色剂反应，使显色剂的紫红色退去 变成无色。

主要针对的是有机磷农药的残留检测，特别是甲胺磷、 对硫磷农药这种方法采用化学反应原理，避免了通常所使用生化 方法（酶法）的缺点（酶的制备、保存以及反应需比较严格的条件）, 灵敏度也达到一定的要求但是此方法主要针对的是甲胺磷、对硫 磷等较高毒性的有机磷农药残留的定性检测该方法的特点是操作简便、价格便宜、检测速度快，通过进一步改善试剂性能，规范测定技术，可提高检测的灵敏度和准确性,从而为当前广大城乡农产品生产和销售者所青睐二、 几种检测农药残留方法的比较气相色谱仪 是目前比较权威的方法，可以精确定量，可测出 多种不同种类农药但检测成本高，仪器操作须专业人员，前处理 要求较高，时间长活体生物检测 不需要仪器，无须前处理，对各种毒物都可以 测定但难以找到与该产品同时种植的未施农药产品做对照，只能 估算，不能精确定量分析，受很多因素影响免疫法检测 特异性强，灵敏度高，快速简便，可准确定性， 定量，适用于现场检测但抗体制备比较困难，不能肯定试样中的 农药品种时，有一定的盲目性，易出现假阴，假阳性现象酶抑制法检测使用残毒速测箱，无须大型设备和专业人员， 成本较低，酶片保存时间长，灵敏度低，不能定量比色法 灵敏度高，操作简便，检测快，可检测多种残毒综合 量，酶易失活，不易保存，检测时受温度影响，需要控制的条件较多。

传感器 灵敏度高，仪器自动化程度高，响应时间短，适合现 场检测但方法选择性有限，原理单一(仅限于胆碱酯酶的功能被 抑制)生物材料固定化易失活化学法 速度快、成本低、操作简便、针对性强，尤其适合于 现场检测但适用范围小，仅限于果蔬的有机磷农药残留检测三、 农药残留检测发展趋势农药残留分析是分析化学中最复杂的领域，其原因主要是：1. 需分离和测定的残留农药量往往是在ng(l(Tg)、pg (10一雁) 甚至在fg(io-15g)级，一次成功的分析需要有许多操作条件的正确结合和选择，尤其是萃取和净化方法的成功应用；2. 分析样品用药历史的未知性即污染源的未知性和样品种类的 多样性；3. 一次。