实验十二 穿山龙中薯蓣皂苷元的提取、分离、鉴定.doc

实验【穿山龙中薯蔻皂昔元的提取分离及鉴定薯祯皂苜元俗称薯祯皂素，存在于薯荡科(Diocoreaceae)植 物中，含量约为1〜3%我国薯蔻科植物资源丰富，种类亦多，分 布南北各地，其中作为薯祯皂苜元生产原料的植物主要有盾叶薯祯 (Dioscorea zingiberesis C.H.Wright)俗称黄姜、穿山薯荷 (D. nipponica Makino)俗称穿山龙，用其根茎作为原料提取薯茴 皂脊元薯质皂首属尚体皂昔，水解可得薯质皂昔元，这种缶体皂昔元， 是近代制药工业中合成笛体激素和警体避孕药的重要原料本实验以穿山龙为原料提取薯枝皂昔元穿山龙中含有多种带体 皂苜，根据其水溶性分为水溶性皂苜和水不溶性皂苜总皂苜水解可 得薯祯皂昔元，其含量可达1.5〜2.6%［目的要求］1、 掌握雷体皂昔元的理化性质2、 掌握陪体皂昔元(亲脂性、中性成分)的提取分离方法3、 掌握雷体皂首元的检识方法［实验原理］薯荡皂苜(dioscin)为无定形粉未或针状结晶，mp288C可 溶于甲醇、乙醇、甲酸，难溶于丙酮和弱极性有机溶剂，不溶于水 薯荡皂苜元(diosgenin)为白色粉末，mp204〜207C,-129。

C = 1.4三氯甲烷)可溶于有机溶剂及甲酸中，不溶于水薯赧皂苜元在植物体内与糖结合成苜，经水解(酸水解、酶水解) 可得薯赣皂昔元和糖利用薯蔻皂昔元不溶于水，溶于有机溶剂的性 质，用石油醍连续回流提取，将其从原植物中提取出来,q薯蔻皂昔H+水解薯祯皂昔元H.OHOHOH OHH.OHD —葡萄糖 L—鼠李糖［实验内容］一、预试验在研究天然药物或中药化学成分时，应首先了解其所含化学成分 类型，以便选择一种适当的提取分离方法，这就需要进行化学成分的 预试验预试验分系统预试验和单项预试验系统预试验旨在全面检 查各类成分，单项预试验则是重点检查某类成分，本试验即选择此法 要寻找含皂苜的天然药物或中药，可单纯进行皂苜的试验，具体试验 方法采用泡沫试验和溶血试验1. 泡沫试验取穿山龙粗粉1g,加水浸泡（1： 10） 1小时或置80C水浴上 温浸30分钟，过滤得滤液供以下试验取供试液2ml于试管中，紧塞试管口后猛力振摇，试管内液体则 产生大量的持久性的似蜂窝状泡沫（示有皂昔）注：含蛋白质和粘液质的水溶液虽也能产生泡沫，但不持久，放 置很快消失2. 溶血试验取2%血球悬浮液1ml,加生理盐水8ml,再加用于泡沫试验滤 液1ml,混合均匀后放置，几分钟内溶液由红色混浊变成红色透明， 产生溶血现象（示有皂昔）。

注：此试验可同时作空白对照以比较现象更为明显操作方法相同，只以生理盐水Iml代替供试液即可）二、薯菠皂昔元的提取、分离穿山龙粗粉（50g）置圆底烧瓶中,加水250ml、浓H2SO 420ml, 室温浸泡24小时，文火加热回流4〜6小时， u放冷，倾出酸水液酸性药渣用清水漂洗3次，然后将药渣倒入乳钵中，加Na2CO3粉末，反复研v 磨调PH至中性、水洗、抽干 中性药渣低温（80C）干燥12小时▼干燥药渣置乳钵中研成细粉，置索氏提取器中，以石油醍（60-90C）为溶剂,连续回流提取4-5小时▼石油醒提取液I5!收石油醍至剩10-15ml,迅速倾入小三角烧瓶中、放置使充分冷却，滤过滤液 沉淀|用少量冷石油酰洗二次，抽干薯赣皂昔元粗品I 无水 EtOH 或 CHCZ-MeOH （9： 1）重结晶薯赣皂昔元精品|进行结构改造各种不同的尚体药物三、薯赣皂苜元的鉴定1 .物理常数的测定：测定熔点和旋光2 .化学检识（1） 醋酎一浓硫酸反应（Liebermann・Burchard反应）取样品适量，加冰醋酸0.5ml使溶解，续加醋酎0.5ml搅匀，再 于溶液的边沿滴加1滴浓硫酸，观察并记录现象2） 三氯甲烷一浓硫酸反应（Salkowski反应）取样品适量，加三氯甲烷1 ml使溶解，沿试管壁加等量的浓硫酸, 分别置可见光及紫外灯下，观察并记录现象3. UV鉴定Uv X H2SO4maxnm (log 0 : 334(3.68) 412(4.1) 512(3.52)4. 薄层色谱吸附剂：硅胶一CMC薄层板样 品：5%自制薯祯皂昔元的乙醇液对照品：5%薯茴皂昔元标准品的乙醇液展开剂：苯■乙酸乙酯(8:2)显色剂：5%磷钳酸乙醇溶液，105C加热至斑点显色清晰。

［实验说明及注意事项］1. 原料经酸水解后应充分洗涤呈中性，以免烘干时炭化2. 在干燥水解原料的过程中，应注意压散团块和勤翻动，以利 快干3. 在连续回流提取过程中，由于使用的石油醍极易挥发损失， 故水浴温度不宜过高，能使石油醍微沸即可此外可加快冷凝水的流 速，以增加冷凝效果4. 回收石油醍的蒸偶操作，不必另换蒸馅装置只将索氏提取 器中的滤纸筒取出，再照原样装好，继续加热回收烧瓶中的溶剂，待 溶剂液面增加至高虹吸管顶部弯曲处1cm处，暂停回收，取下提取 器，将其中石油酰移置另外容器中，如此反复操作，叩可完成回收石 油酰的操作5. 在连续提取过程中，欲检查有效成分是否提取完全，可取提 取器中提取液数滴，滴于白瓷皿中，挥散溶剂，观察有无残留物，然 后进行醋酉干一浓硫酸反应若反应呈阴性，示已提尽6. 所得薯福皂首元粗品可作熔点测定，若测定不合格时再进行重结晶处理［思考题］1. 留体皂苜可用哪些反应进行鉴定？2. 试设计一种从穿山龙中提取薯荡皂昔的工艺流程，并说明提 取、分离原理3. 使用石油酰作提取溶剂时，操作中应注意哪些事项？附：［实验预习要求］1. 明确实验原理2. 明确实验需要试剂及仪器（掌握装置提取原理、组成及安装）。

3. 解析提取工艺流程4. 掌握提取分离过程操作要点5. 预测实验现象。