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各种培养基配方.docx

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    • 146种培养基配方1、牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)牛肉膏3g蛋白腺5g氯化钠10g琼脂15~20gpH7.0~7.2水1000mL2、2、高氏(Gause) 1号培养基(培养放线菌用)可溶性淀粉20g硝酸钾 1g氯化钠 0.5g磷酸氢二钾 0.5g硫酸镁 0.5g硫酸亚铁 0.01g琼脂 20g水 1000mLpH 7.2 〜7.4配制时,先用少量冷水将淀粉调成糊状,倒入煮沸的水中,在火上加热,边搅拌边加入其他 成分,溶化后,补足水分至1000mL121 °C灭菌20min查氏(Czapek)培养基(培养霉菌用)硝酸钠2g磷酸氢二钾1g氯化钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂15~20g水1000mLpH自然121C 灭菌2 0min4、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)葡萄糖 10g蛋白胨 5g磷酸二氢钾 1g七水合硫酸镁 0.5g1/3000孟加拉红(rose bengal,玫瑰 100mL红水溶液)琼脂 15—20g蒸馏水 800mL112°C 灭菌 30min临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL,使每毫升培养基中含链霉素30四5、 马铃薯培养基(简称PDA)(培养真菌用)马铃薯 200g蔗糖(或葡萄糖) 20g琼脂 15—20gpH 自然培养基的配制:马铃薯去皮,切成块煮沸30min,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂, 熔化后补足水至1000mL。

      121C灭菌30min6、 麦芽汁琼脂培养基培养基的配制:(1) 、取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水6—12小时,至15C阴暗处发芽,上面盖 纱布一块,每日早、中、晚淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或 烘干,贮存备用2) 、将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在65C水浴中糖化3—4小时,糖化程度可 用碘滴定之加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤3) 、将糖化液用4—6层纱布过滤,滤液如混浊不清,可用鸡蛋白澄清,方法是将一 个鸡蛋白加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤4) 、将滤液稀释^U5—6波美度,pH约6.4,加入2%琼脂即成121C灭菌30min7、 无氮培养基(自生固氮菌、钾细菌)甘露醇(或匍萄糖)10g磷酸二氢钾0.2g七水合硫酸镁0.2g氯化钠0.2g二水合硫酸钙0.2g碳酸钙5g蒸馏水1000mLpH7.0—7.2113°C 天菌 30min8、半固体肉膏蛋白胨培养基肉膏蛋白腺液体培养基100mL0.35—0.4琼脂gpH7.6121C 天菌 20min9、合成培养基偏磷酸铵1g氯化钾0.2g七水合硫酸镁0.2g豆芽汁10mL琼脂20g蒸馏水1000mLpH7.0力加12 mL0.04%的漠钾酚紫(pH5.2—6.8,颜色由黄变紫,作指示剂】121C灭菌2 0min。

      10、豆芽汁蔗糖(或葡萄糖)培养基黄豆芽100g蔗糖(或匍萄糖)50g1000mLpH 自然培养基的配制:称新鲜豆芽100g,放入烧杯中,加入水1000mL,煮沸约30min, 用纱布过滤用水补足原量,再加入蔗糖(或葡萄糖)50g,煮沸熔化121C灭菌20min11、油脂培养基蛋白胨 10g牛肉膏 5g氯化钠 5g香油或花生油 10g1.6%中性红水溶液 1mL琼脂 15—20g蒸馏水 1000mLpH 7.2121C 灭菌 20min注:(1)、不能使用变质油2) 、油和琼脂及水先加热3) 、调好pH值后,再加入中性红4) 、分装时,需不断搅拌,使油均匀分布于培养基中12、 淀粉培养基蛋白胨 10g牛肉膏 5g氯化钠 5g可溶性淀粉 2g蒸馏水 1000mL琼脂 15—20g121C 灭菌 20min13、 明胶培养基牛肉膏蛋白胨液 100mL明胶 12—18gpH7.6在水浴锅中将上述成分溶化,不断搅拌溶化后调pH7.2-7.4o 121°C 灭菌 30min14、 蛋白胨水培养基蛋白腺 10g氯化钠 5g蒸馏水 1000mLpH 7.6121C 灭菌 20min15、 糖发酵培养基蛋白腺水培养基 1000mL1.6%漠钾酚紫乙醇溶液 1—2mLpH 7.6另配制20%糖溶液(葡萄糖、乳糖、蔗糖等)各10mLo培养基的配制:(1)、将上述含指示剂的蛋白腺水培养基(pH7.6)分装于试管中,在每管内放一倒 置的小玻璃管(Durham tube),使之充满培养液。

      2) 、将已分装好的蛋白腺水和20%的各种糖溶液分别灭菌,蛋白腺水121C灭菌 20min ;糖溶液 112C 灭菌 30min3) 、灭菌后,每管以无菌操作分别加入20%无菌糖溶液0.5 mL (按每10mL培养 基中加入20%的糖液0.5mL,则成1%的浓度)配制用的试管必须洗干净,避免结果混乱16、葡萄糖蛋白胨水培养基蛋白腺 5g葡糖糖 5g磷酸氢二钾 2g蒸馏水 1000mL将上述各成分溶于1000mL水中,调pH7.0—7.2,过滤分装试管,每管10mL, 112C 灭菌 30min17、麦氏(Meclary)琼脂(酵母菌)葡萄糖1g氯化钾1.8g酵母浸膏2.5g醋酸钠8.2g琼脂15—20g蒸馏水1000mL113°C 灭菌 2 0min18、柠檬酸盐培养基磷酸二氢铵1g磷酸氢二钾1g氯化钠5g硫酸镁0.2g柠檬酸钠2g琼脂15—20g蒸馏水1000 mL1%漠麝香草酚蓝乙醇液10 mL培养基的配制:将上述各成分加热溶解后,调pH6.8,然后加入指示剂,摇匀,用 脱脂棉过滤制成后为黄绿色,分装试管,121C灭菌20min后制成斜面,注意配制时控 制好pH,不要过碱,以黄绿色为准。

      19、醋酸铅培养基pH7.4的牛肉膏蛋白 胨琼脂100 mL硫代硫酸钠0.25g10%醋酸铅水溶液1 mL培养基的配制:将牛肉膏蛋白胨琼脂100 mL加热溶解,待冷却至60C时加入硫代 硫酸钠0.25g,调至pH7.2,分装于三角瓶中,115C灭菌15min取出后待冷却至 55—60C,加入10%醋酸铅水溶液(无菌的)1mL,混匀后倒入灭菌试管或平板中20、血琼脂培养基PH7.6的牛肉膏蛋白胨琼脂100 mL脱纤维羊血(或兔血) 10 mL培养基的配制:将牛肉膏蛋白胨琼脂加热熔化,待冷却至50°C时,加入无菌脱纤维 羊血(或兔血)摇匀后倒平板或制成斜面37C过夜检查无菌生长即可使用21、 玉米粉蔗糖培养基玉米粉 60g磷酸二氢钾 3g维生素B1 100mg蔗糖 10g七水合硫酸镁 1.5g水 1000 mL121C灭菌30min,维生素B1单独灭菌15min后另加22、 酵母膏麦芽汁琼脂麦芽粉 3g酵母浸膏 0.1g水 1000 mL121C 灭菌 30min24、 棉籽壳培养基培养基的配制:棉籽壳50%,石灰粉1%,过磷酸钙1%,水65%—70%,按比例 称好料,充分搅拌均匀后装瓶,较薄地平摊盘上。

      25、 复红亚硫酸钠培养基(远藤氏培养基)蛋白胨 10g乳糖 10g磷酸氢二钾 3.5g琼脂 20—30g蒸馏水 1000 mL5%碱性复红乙醇溶液 20 mL培养基的配制:先将琼脂加入900 mL蒸馏水中,加热溶解,再加入磷酸氢二钾及蛋白胨,使溶解,补足蒸馏水至1000 mL,调pH至7.2—7.4加入乳糖,混匀溶解后,115°C 灭菌20min称取亚硫酸钠置一无菌空试管中,加入无菌水少许使溶解,再在水浴中煮沸 10min后立刻滴加于20 mL 5%碱性复红乙醇溶液中,直至深红色褪成淡粉红色为止将此亚硫酸钠与碱性复红的混合液全部加至上述已灭菌的并仍保持熔化状态的培养基中,充 分混匀,倒平板,放冰箱中备用,贮存时间不宜超过2周26、伊红美蓝培养基(EMB培养基)蛋白胨水培养基 100 mL20%乳糖溶液 2 mL2%伊红水溶液 2 mL0.5%美蓝水溶液 1 mL培养基的配制:将已灭菌的蛋白胨水培养基(PH7.6)加热熔化,冷却至60C左右 时,再把己灭菌的乳糖溶液,伊红水溶液及美蓝水溶液按上述量以无菌操作加入摇匀后, 立即倒平板乳糖在高温灭菌易被破坏必须严格控制灭菌温度,115C灭菌20min。

      27、乳糖蛋白豚培养液(“水的细菌学检查”用)10g蛋白胨3g5g5g1 mL牛肉膏乳糖氯化钠1.6%漠甲酚紫乙醇溶 液蒸馏水 1000 mL培养基的配制:将蛋白胨、牛肉膏、乳糖及氯化钠加热溶解于1000 mL蒸馏水中, 调pH至7.2—7.4加入1.6%漠甲酚紫乙醇溶液1 mL,充分混匀,分装于有小倒管的试 管中115C灭菌2 0min28、石蕊牛奶培养基牛奶粉 100g石蕊 0.075g水 1000 mL121C 灭菌 15min29、 LB (LuriaBertani )培养基蛋白胨 10g酵母膏 5g氯化钠 10g蒸馏水 1000 mLpH 7.0121°C 灭菌 20min30、 基本培养基磷酸氢二钾 10.5g磷酸二氢钾 4.5硫酸铵 1g二水合柠檬酸钠 0.5g蒸馏水 1000 mL121C 灭菌 20min需要时灭菌后加入:糖(20%) 10 mL维生素B1 (硫胺素)(1%) 0.5 mL七水合硫酸镁(20%) 1 mL链霉素(50mg/ mL) 4 mL,终浓度200四/ mL氨基酸(10mg/ mL) 4 mL,终浓度40gg/ mLpH 自然(一7.0)31、 庖肉培养基培养基的配制:(1) 、取已去肌膜、脂肪之牛肉500g,切成小方块,置1000 mL蒸馏水中,以弱火 煮1小时,用纱布过滤,挤干肉汁,将肉汁保留备用。

      将肉渣用绞肉机绞碎,或用刀切成细 粒2) 、将保留的肉汁加蒸馏水,使总体积为2000 mL,加入蛋白胨20g,葡萄糖2g, 氯化钠5g,及绞碎的肉渣,置烧瓶摇匀,加热使蛋白胨溶化3) 、取上层溶液测量pH,并调整其达到8.0,在烧瓶壁上用记号笔标示瓶内液体高 度,121C灭菌15min后补足蒸发的水分,重新调整pH值8.0,再煮沸10—20min,补 足水量后调整pH7.44) 、将烧瓶内容物摇匀,将溶液和肉渣分装于试管中,肉渣约占培养基的1/4左右 经121C灭菌15min后备用,如当日不用,应以无菌操作加入己灭菌的石蜡凡士林,以隔绝氧气32、 乳糖牛肉膏蛋白胨培养基乳糖 5g牛肉膏 5g酵母膏 5g蛋白腺 10g葡萄糖 10g氯化钠 5g琼脂粉 15gpH 6.8水 1000mL33、 马铃薯牛。

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