肌酸激酶同工酶MB测定试剂盒说明书.docx

肌酸激酶同工酶MB （CK-MB ）测定试剂盒（化学发光免疫分析法）说明书【产品名称】通用名称：肌酸激酶同工酶MB（CK-MB）测定试剂盒（化学发光免疫分析法）英文名称： Creatine kinase MB（CLIA）【包装规格】2x30人份/盒、2x50人份/盒、2x100人份/盒【预期用途】用于体外定量测定人体血清或（和）血浆中肌酸激酶同工酶MB的含量肌酸激酶主要催化高能磷酸键从ATP转移到肌酸生成磷酸肌酸肌酸激是二聚体酶包括骨骼肌CK-MM，脑 组织CK-BB心肌CK-MB和线粒体肌酸激酶等四种同工酶形式CK-MB分子量80,000由两个亚单位组成（每个 亚基MW= 40000）：亚单位M表示肌肉型，亚单位B表示脑型CK-MB主要存在于心肌组织，占CK总活性的 20%，骨骼肌中也有微量分布血清中CK-MB含量对诊断急性心肌梗死、心肌炎等心肌缺血性疾病有重要意义CK-MB在心肌损伤早期即可 出现于循环血中，于心肌损伤庖-6小时开始升高，在12-24小时内达到峰值，之后降至正常水平36 -72小时）， CK-MB测值的升降伴随ECG演变和胸痛病史CK-MB含量和时间变化，对评估心肌损伤发病时间、梗死体积 以及再灌注后损伤有重要意义。

此外，骨骼肌损伤、横纹肌溶解症及中风等疾病中，也伴随有K-MB含量升高临床诊断上，CK-MB经常与肌红蛋白和肌钙蛋白I联合检测在心肌损伤相关疾病诊断上，肌钙蛋白特异 性强，肌红蛋白和CK-MB早期敏感性高，三者联合检测可以提高诊断的特异性、敏感性检验原理】肌酸激酶同工酶MB测定采用双位点夹心化学发光免疫分析法，其采用的技术原理如下： 第一步：将样本与包被着 CK-MB 单克隆抗体的超顺磁性磁微粒（磁珠）以及 CK-MB 单克隆抗体-碱性磷酸 酶标记物添加到反应管中，经过孵育，样本中的CK-MB和包被在磁珠上的CK-MB单克隆抗体结合，同时CK-MB 单克隆抗体-碱性磷酸酶标记物与样本中 CK-MB 另一位点结合反应完成后，磁场吸住磁珠，洗去未结合的物质第二步：将化学发光底物（3-（2-螺旋金刚烷）-4-甲氧基-4-（3-磷氧酰）-苯基-1,2-二氧环乙烷，AMPPD）添加到 反应管内，发光底物 AMPPD 能有效地被碱性磷酸酶所分解, 脱去一个磷酸根基团，生成不稳定的中间产物，该 中间产物通过分子内电子转移产生间氧苯甲酸甲酯阴离子，处于激发态的间氧苯甲酸甲酯阴离子从激发态返回基 态时，产生化学发光，由光电倍增管对反应所产生的光子数进行测量，所产生的光子数与样本内CK-MB的浓度 成正比。

样本内分析物的量由定标曲线来确定主要组成成分】试剂组分名 称成分原料及含量装量2x30人份/'盒 JXXL.2x50人份/ 盒2x100人份/ 盒磁珠包被物（Ra）包被着抗CK-MB 抗体（小鼠单抗， IgG）的超顺磁性微 粒，悬浮于缓冲液，含防腐剂包被着抗CK-MB抗体的超顺磁性微粒,0.2 g/L； Tris缓冲液，50 mmol/L； ProClin 300， 0.5 g/L；叠氮钠，0.9 g/L2x2.7 mL2x3.8 mL2x6.6 mL酶标记物（Rb）抗CK-MB抗体（小 鼠单抗，IgG）-碱性 磷酸酶标记物溶于 缓冲液，含防腐剂抗CK-MB抗体-碱性磷酸酶标记物，3 mg/L； MES缓冲液，50 mmol/L； ProClin 300， 0.5 g/L；叠氮钠，0.9 g/L2x2.4 mL2x3.5 mL2x6.3 mL注：不同批号试剂盒中各组分不能互换各组分位置见试剂瓶主视图（左）和俯视图（右）：需要但未提供的配套仪器和材料（迈瑞提供）（1） 校准品：肌酸激酶同工酶MB校准品；（2） 质控品：心肌标志物复合定值质控品；（3） 全自动免疫检验系统用底物液；（4） 清洗液；（5） 迈瑞CL系列全自动化学发光免疫分析仪；（6） 反应杯。

储存条件及有效期】2〜8°C保存，有效期365天上机使用后，在2~8C的贮存环境下有效期为28天生产日期见包装或标签适用仪器】2x30人份/盒适用迈瑞全自动化学发光免疫分析仪8个机型：CL-900i、CL-920i、CL-960i、CL-980i、CL-1000i、 CL-1200i、CL-2600i、CL-2800i2x50人份/盒和2x100人份/盒适用迈瑞全自动化学发光免疫分析仪系列机型：CL-900i、CL-920i、CL-960i、CL-980i、CL-1000i、CL-1200i、CL-2000i、CL-2200i、CL-2600i、CL-2800i、CL-5000i、CL-5200i、CL-5600i、CL-5800i、CL-4600i、CL-4800i、CL-3600i、CL-3800i、CL-6000i、CL-6200i、CL-8000i、CL-8200i、CL-9000i、CL-9200i样本要求】推荐使用血清样本或者EDTA、肝素类抗凝剂采血管收集的血浆样本按照通用的静脉穿刺措施来收集所有的血液样本；样本在检测前必须按照采血试管生产商建议的方式进行离 心，并确保已去除了残余的细胞类物质；离心前，必须确保血清样本已经完全凝结，对于正在接受抗凝剂治疗的 病人样本，需要延长凝集时间；样本应没有气泡，若存在气泡推荐使用一次性吸头吸走气泡，操作过程中注意防 止样本间的交叉污染；如果离心后的样本上覆盖着脂质层，那么需转移清澈的样本至新的样本管，不能转移脂质 层；样本中若含有纤维蛋白或其它颗粒物质，或者样本经过冻融，测试前必须进行离心处理；不建议使用严重溶 血（血红蛋白〉500mg/dL）和热灭活的样本。

样本应尽可能及时测定，若在6小时内无法完成测定，可将样本置于低温下保存样本在2〜8C环境下可稳 定2天；在-20C或低于-20C的环境下可稳定90天样本应尽量避免反复冻融，反复冻融次数不宜超过5次不同生产商的采血试管，由于原材料和添加剂不同，可能导致不同的结果迈瑞化学发光试剂盒没有对所有 可能应用的采血试管类型和生产商进行测试，每个实验室需自行判断其使用的采血试管和血清分离产品的适用性检验方法】检测程序试剂瓶首次装载上机，应在封口撕开前轻轻地翻转30次，观察试剂瓶确保超顺磁性微粒已完全悬浮；若超顺磁 性微粒仍附着在试剂瓶底部，继续翻转试剂瓶直至其完全悬浮为止；若仍然无法悬浮，则该瓶试剂不能使用， 请联系客户服务请勿翻转封口已撕开的试剂瓶有关试剂装载的功能和操作方法，参见化学发光免疫分析仪使 用说明书“准备试剂”章节必要时，需申请校准有关申请校准的内容，参见化学发光免疫分析仪使用说明书“校准测试”章节系统每次测定需使用样本量为10 RL申请测试前，应准备好测试所需所有材料，并仔细阅读化学发光免疫 分析仪使用说明书，以获得系统操作规程、样本管理、使用注意事项、维护和保养等相关信息申请测试的主要 步骤如下：（1） 进入样本申请界面，根据测试需要输入样本编号、样本架编号、位置号、样本类型、备注等信息；（2） 选中测试项目，在项目选项中选择样本杯类型，输入重复次数等信息；（3） 准备测试样本并正确放置后，点击启动按钮开始测试。

化学发光免疫分析仪会依次执行以下操作：（a） 样本处理系统将样本架传送到吸样位；（b） 反应杯装载及调度系统将反应杯从上料区加载到加样位；（c） 加样系统完成样本的分注及样本针的清洗； 试剂处理系统提供测试所需的试剂，并将每个试剂混匀后送到吸试剂位等待吸取； 加样系统完成试剂的分注及试剂针的清洗；（d） 反应混合液由反应液混匀系统对其进行混匀，并在反应盘中孵育；（e） 孵育完成后，磁分离系统使用化学发光分离液对反应混合液进行清洗分离；（f） 底物系统向完成磁分离的反应杯中注入经过预热的底物液，混匀、孵育、等待光测；（g） 光测反应系统将每个反应杯送至信号采集位采集信号，用以计算发光值；（h） 计算出样本中的肌酸激酶同工酶MB的含量 有关样本测试的功能和操作方法，参见化学发光免疫分析仪使用说明书“样本测试”章节校准使用配套的试剂盒和校准品执行校准测试试剂盒开始校准前，应先将试剂盒二维条形码中的主校准曲线信 息以及校准品二维条形码中的校准品赋值信息扫描导入系统化学发光免疫分析仪通过校准品测试的结果调节主校准曲线，得到当前系统的校准曲线仪器操作软件具有 校准判断功能，自动完成校准曲线有效性的检查。

所有测试前均需要有效的校准曲线，以下情况需重新进行校准：（1） 使用新批号的试剂盒；（2） 同一批号的试剂盒在分析仪上使用超过28天；（3） 质控值超出规定范围 有关校准测试的详细说明，参见化学发光免疫分析仪使用说明书“校准测试”章节质控为确保测试结果的可靠性，至少每24 小时对高、低两个水平的心肌标志物复合定值质控品各检测一次；此外每， 执行完一次校准测试、更换试剂批次、执行维护和故障处理操作后，也建议进行质控测试质控品测试值应该在规定的范围内若超出规定的范围，用户应对系统进行检查，如：质控品的位置、效期、保 存方法，校准过程，仪器的性能、状态等，必要时需重新校准重新测试后若结果仍超出范围可联系客户服务有关质控测试的详细说明，参见化学发光免疫分析仪使用说明书“质控测试”章节计算通过所保存的校准数据，系统软件使用一条加权的四参量对数曲线（4PLC）数学方式，自动地确定病人的测 试结果结果单位以 ng/mL 的形式给出稀释高于检测范围上限的血清或血浆样本可使用配套的样本稀释液进行稀释，建议稀释比例为 1:2（可由迈瑞全 自动化学发光免疫分析仪自动稀释或手动稀释）如使用迈瑞全自动化学发光免疫分析仪自动稀释，系统软件会自动 给出乘以稀释倍数后的样本浓度；如使用手动稀释，需将测试得到的样本浓度乘以稀释倍数，以得到样本的实际 浓度。

参考区间】对广东地区医院 854 例（其中男性 436 例、女性 418 例）外表健康的成年人血清样本进行测试分析，测试数 据采用非参数法进行处理，计算得出第 99百分位和 97.5 百分位的参考区间上限如下：参考区间分析例数99百分位数（ngmL）97.5百分位数（ng/mL）男性4366.365.03女性4184.973.68由于地理、人种、性别及年龄等差异，建议各实验室建立自己的参考区间 检验结果的解释】在解释测定结果时，需参照该病人的整体临床情况，包括：症状、病史以及其它相应的数据和信息 【检验方法的局限性】检测结果仅供临床参考，不能单独作为诊断或排除病例的依据试剂盒检测范围为0.1 ng/mL〜300 ng/mL对于CK-MB含量低于检测上限的样本，可以进行定量测定；若 样本含量高于检测上限，那么以大于该值来报告结果（>300 ng/mL）；或使用配套的样本稀释液对样本进行稀释当 CK-MB 浓度达到 20000 ng/mL 时，未出现钩状效应人血清或血浆中的嗜异性抗体可以与试剂盒组份中的免疫球蛋白反应，干扰体外免疫检测 1经常与动物有 接触或者使用免疫球蛋白或免疫球蛋白碎片进行治疗或诊断的病人，可能会产生此类抗体，从而使检测结果出现 异常值；如接受过小鼠单克隆抗体制剂治疗或诊断的病人，其样本中可能含有人抗小鼠抗体（HAMA），使用含 有小鼠单克隆抗体的试剂盒检测此类样本时，其检测值可能会假性升高或假性降低2, 3。

迈瑞化学发光试剂盒组份 中含有抗干扰成份，可以有效降低样本中 HAMA 造成的影响，但少数样本依然有可能存在干扰问题。