探究酵母菌种群数量的变化实验讲课文档.ppt

探究酵母菌种群数量的变化实验第一页，共二十一页探究：培养液中酵母菌种群数量的变化探究：培养液中酵母菌种群数量的变化目的要求目的要求1、学习利用血球计数板进行微生物计数的方法、学习利用血球计数板进行微生物计数的方法2、实验探究培养液中酵母菌种群数量的变化、实验探究培养液中酵母菌种群数量的变化3、注意样方法的应用、注意样方法的应用4、体会影响种群数量变化的因素、体会影响种群数量变化的因素第二页，共二十一页1、酵母菌的繁殖方式主要是、酵母菌的繁殖方式主要是:2、酵母菌的呼吸方式是、酵母菌的呼吸方式是:兼性厌氧兼性厌氧(可进行有氧呼吸和无氧呼吸可进行有氧呼吸和无氧呼吸)回顾思考回顾思考: :出芽生殖出芽生殖3、酵母菌的培养条件要注意那些问题、酵母菌的培养条件要注意那些问题?比如要用适宜的温度培养比如要用适宜的温度培养,调节好调节好PH值值,溶氧溶氧量的控制等量的控制等酿酒和做面包都需要酵母菌这些酵母菌可酿酒和做面包都需要酵母菌这些酵母菌可以用液体培养基（培养液）来培养培养液中酵以用液体培养基（培养液）来培养培养液中酵母菌种群的增长情况，与发酵食品的制作有密切母菌种群的增长情况，与发酵食品的制作有密切关系。

关系第三页，共二十一页培养液中酵母菌种群数量开始一段时间是培养液中酵母菌种群数量开始一段时间是“J”型增长，由于型增长，由于营养物质的消耗，有害代谢产物的积累，营养物质的消耗，有害代谢产物的积累，PH值的改变，种群值的改变，种群数量呈数量呈“S”型增长探究：培养液中探究：培养液中酵母菌种群数量的变化酵母菌种群数量的变化问题问题：培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？温度会影温度会影响酵母菌的生长吗？营养成分会影响酵母菌的生长吗？响酵母菌的生长吗？营养成分会影响酵母菌的生长吗？ 作出假设作出假设 根据前面所学的知识，针对这一问题作出假设：根据前面所学的知识，针对这一问题作出假设：讨论探究思路讨论探究思路 探究所需要的菌种和无菌马铃薯培养液或肉汤培养液、试管、血探究所需要的菌种和无菌马铃薯培养液或肉汤培养液、试管、血球计数板（球计数板（2mm2mm2mm2mm方格）、滴管、显微镜等，都由老师提供方格）、滴管、显微镜等，都由老师提供 在制订计划前，你需要思考以下问题，并与同学讨论在制订计划前，你需要思考以下问题，并与同学讨论第四页，共二十一页。

实验设计实验设计将将9支试管分成支试管分成ABC三组，每组三组，每组3支A组为实验组，组为实验组，装培养液装培养液10mL，酵母菌母液，酵母菌母液0.1mL,环境温度环境温度28B组装培养液组装培养液10mL，酵母菌母液，酵母菌母液0.1mL,环境温度环境温度5，与与A组形成温度条件对照组形成温度条件对照C组不装培养液，只装无菌组不装培养液，只装无菌水水10mL,酵母菌母液酵母菌母液0.1mL,环境温度环境温度28，与，与A组形成组形成营养条件对照营养条件对照 第五页，共二十一页实验操作：实验操作：(1)、配制无菌马铃薯培养液和酵母菌母液；、配制无菌马铃薯培养液和酵母菌母液；(2)、预先设计分装先每次用、预先设计分装先每次用10mL刻度吸管吸取刻度吸管吸取10mL培养液到培养液到A组和组和B组试管，用另一支组试管，用另一支10mL刻度吸管吸取刻度吸管吸取10mL无菌水到无菌水到C组试管待分装完毕，每支试管加塞后把试管扎成捆后，然后用记号笔注明待分装完毕，每支试管加塞后把试管扎成捆后，然后用记号笔注明培养基的名称、组别、日期培养基的名称、组别、日期3)、用高压蒸汽灭菌锅灭菌；、用高压蒸汽灭菌锅灭菌；(4)、接种菌种：用灭菌干净的、接种菌种：用灭菌干净的1mL刻度吸管每次吸取刻度吸管每次吸取0.1mL酵母菌酵母菌母液，往每支试管中加入。

注意滴加量不要太多，避免初始菌数母液，往每支试管中加入注意滴加量不要太多，避免初始菌数过多5)、培养：将、培养：将A、C试管置于试管置于28的恒温箱中培养将的恒温箱中培养将B试管置于试管置于5的恒温箱中培养的恒温箱中培养5的恒温箱可由某些型号冰箱保温室设定的恒温箱可由某些型号冰箱保温室设定5时代时代替6)、计数和记录：每天取样时间大体一致，每次每组按序号取一支试管计数和记录：每天取样时间大体一致，每次每组按序号取一支试管计数过程中一定要遵守无菌操作规范，取样的吸管要干净且分开使用，每计数过程中一定要遵守无菌操作规范，取样的吸管要干净且分开使用，每次取样前要试管振荡摇匀显微镜下进行细胞计数后，立即将数据填到记次取样前要试管振荡摇匀显微镜下进行细胞计数后，立即将数据填到记录表格中录表格中第六页，共二十一页分析结果，得出结论分析结果，得出结论将所得数值用曲线图表示出来，分析实验结果是否支持你所做的假设将所得数值用曲线图表示出来，分析实验结果是否支持你所做的假设酵母菌的种群数量在营养条件有限的情况下是呈酵母菌的种群数量在营养条件有限的情况下是呈“S”型增长，但之后会下降温度、营养成分会影响酵型增长，但之后会下降。

温度、营养成分会影响酵母菌种群数量的变化母菌种群数量的变化探究的结论：探究的结论：第七页，共二十一页一、怎样进行酵母菌的计数？一、怎样进行酵母菌的计数？提示：对一支试管中的培养液提示：对一支试管中的培养液(可定为可定为10ml)中的酵母菌逐个计数是非常困难的，可以采用中的酵母菌逐个计数是非常困难的，可以采用抽样检测抽样检测的方法：先将盖玻片放在计数室上，的方法：先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取培养液，滴于盖玻片边缘，让培养用吸管吸取培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入，多余培养液用滤纸吸去，稍待片液自行渗入，多余培养液用滤纸吸去，稍待片刻，待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部，将刻，待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部，将计数板放在载物台的中央，计数一个小方格内计数板放在载物台的中央，计数一个小方格内的酵母菌数的酵母菌数量，再以此为根据，估算试管中量，再以此为根据，估算试管中的酵母菌总数的酵母菌总数第八页，共二十一页介绍介绍:血球计数板的构造血球计数板的构造1、血球计数板：是显微镜上的外挂物件，可用来测量细胞，、血球计数板：是显微镜上的外挂物件，可用来测量细胞，细菌等一些微小物体的长度，还有就是测量数量，如单位体积细菌等一些微小物体的长度，还有就是测量数量，如单位体积细胞的数量。

血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片细胞的数量血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的玻片中有四条下凹的槽，构成三个平台，中间的平台制成的玻片中有四条下凹的槽，构成三个平台，中间的平台较宽，其中间又被一短横槽隔为两半，每半边上面较宽，其中间又被一短横槽隔为两半，每半边上面,刻有一个刻有一个方格网第九页，共二十一页化化放大后的方格网计数室放大后的方格网计数室 I H G F E D C B A251616252、方格网的构成：、方格网的构成：方格网上刻有方格网上刻有9个大方格，其中只有中间的一个大方格为个大方格，其中只有中间的一个大方格为计数室，计数室通常有两种规格：一种是大方格内分为计数室，计数室通常有两种规格：一种是大方格内分为16中格，每一中格又分为中格，每一中格又分为25小格；另一种是大方格内分小格；另一种是大方格内分为为25中格，每一中格又分为中格，每一中格又分为16小格但是不管计数室是小格但是不管计数室是哪一种构造，它们都有一个共同的特点，即每一大方格都哪一种构造，它们都有一个共同的特点，即每一大方格都是由是由1625=2516=400个小方格组成个小方格组成第十页，共二十一页。

3、使用方法、使用方法: 将血球计数板用擦镜纸擦净，在中央的计数室上加盖将血球计数板用擦镜纸擦净，在中央的计数室上加盖专用的盖玻片，将稀释后的酵母菌悬液，用吸管吸取一滴专用的盖玻片，将稀释后的酵母菌悬液，用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘，使菌液缓缓渗入，多余的菌液用吸水置于盖玻片的边缘，使菌液缓缓渗入，多余的菌液用吸水纸吸取，稍待片刻，使酵母菌全部沉降到血球计数室内，纸吸取，稍待片刻，使酵母菌全部沉降到血球计数室内，加盖盖玻片加盖盖玻片第十一页，共二十一页5、单位换算、单位换算:以以1mm1mm为例，为例，大方格的长和宽各为大方格的长和宽各为1mm，深度，深度为为0.1mm，其体积为，其体积为0.1mm3换算为换算为1mL：1000/0.1=104即即1mL是是104个个0.1mm34、计数室的规格：、计数室的规格：计数室长计数室长宽有：宽有：1mm1mm,2mm2mm,3mm3mm等等深度均为深度均为0.1mm第十二页，共二十一页如果使用规格为如果使用规格为16格格25格的计数室，要按格的计数室，要按对角方位，取左上、右上、左下、右下对角方位，取左上、右上、左下、右下4个中格个中格(即即100个小格个小格)的酵母菌数。

的酵母菌数如果使用规格为如果使用规格为25格格16格的计数室，除了取格的计数室，除了取其其4个对角方位外，还需再数中央的一个中格个对角方位外，还需再数中央的一个中格(即即80个小方格个小方格)的酵母菌数（五点取样法）的酵母菌数（五点取样法）出芽的酵母菌，芽体达到母细胞大小一半时，即可作为两出芽的酵母菌，芽体达到母细胞大小一半时，即可作为两个菌体计算个菌体计算 6、如何计数呢？、如何计数呢？第十三页，共二十一页规格为规格为25格格16格的计数室，五点取样法格的计数室，五点取样法第十四页，共二十一页7、盖玻片下的培养液厚度为、盖玻片下的培养液厚度为0.1mm，请推算出将一个小方，请推算出将一个小方格范围内的酵母菌数，换算成格范围内的酵母菌数，换算成10ml培养液中酵母菌总数的培养液中酵母菌总数的公式每每1ml菌液中所含的酵母菌个数计算公式菌液中所含的酵母菌个数计算公式（以（以1mm1mm为例）：为例）：（1）16格格25格的血球计数板计算公式格的血球计数板计算公式酵母细胞数酵母细胞数/ml=(100小格内酵母细胞个数小格内酵母细胞个数/100)400104稀释倍数稀释倍数即：一小方格内酵母菌个数即：一小方格内酵母菌个数4106稀释倍数稀释倍数（2）25格格x16格的血球计数板计算公式格的血球计数板计算公式酵母细胞数酵母细胞数/ml=(80小格内酵母细胞个数小格内酵母细胞个数/80)400104稀释倍数稀释倍数即：一小方格内酵母菌个数即：一小方格内酵母菌个数4106稀释倍数稀释倍数第十五页，共二十一页。

课本中大方格的长和宽各为课本中大方格的长和宽各为2mm，深度为，深度为0.1mm，其，其体积为体积为0.4mm3换算为1mL：1000/0.4=2.5103，即，即1mL是是2.5103个个 0.4mm3则：每则：每1ml菌液中所含的酵母菌个数计算公式（菌液中所含的酵母菌个数计算公式（2mm 2mm ）：（1）16格格25格的血球计数板计算公式格的血球计数板计算公式酵母细胞数酵母细胞数/ml=(100小格内酵母细胞个数小格内酵母细胞个数/100)4002.5103稀释倍数稀释倍数即：一小方格内酵母菌个数即：一小方格内酵母菌个数106稀释倍数稀释倍数（2）25格格x16格的血球计数板计算公式格的血球计数板计算公式:酵母细胞数酵母细胞数/ml=(80小格内酵母细胞个数小格内酵母细胞个数/80)4002.5103稀释倍数稀释倍数即：一小方格内酵母菌个数即：一小方格内酵母菌个数106稀释倍数稀释倍数第十六页，共二十一页使酵母菌混合均匀使酵母菌混合均匀不需要，因不同时间取样已形成对照不需要，因不同时间取样已形成对照尽量减少误差对每个样品计数需要尽量减少误差对每个样品计数三次三次,取其平均值取其平均值。

二、从试管中吸出培养液进行计数之前，建议你二、从试管中吸出培养液进行计数之前，建议你将试管轻轻。