N末端B型钠尿肽原(NT—proBNP)定量检测试剂(免疫荧光层析法)产品技术要求万孚.docx

产品名称 N 末端 B 型钠尿肽原〔NT—proBNP〕定量检测试剂〔免疫荧光层析法〕型号、规格 通用包装规格为 5 人份/盒、25 人份/盒、40 人份/盒和 100 人份/盒试剂由测试卡、缓冲液、ID 芯片和使用说明书组成其中： 〔1〕测试卡由试纸条、塑料盒组成试纸条上的主要成分有：硝酸纤维素膜、吸水纸、PVC 板及其他试纸条支持物；构造及组成硝酸纤维素膜包被有 NT-proBNP 单克隆抗体和兔 IgG 〔2〕缓冲液含有荧光标记NT-proBNP 单克隆抗体和荧光标记抗兔 IgG产品适用范围/预期用途 适用于体外定量检测人全血、血清或血浆中的 N 末端 B 型钠尿肽原〔NT-proBNP〕的浓度医疗器械产品技术要求编号：1. 产品型号/规格通用包装规格为5人份/盒、25人份/盒、40人份/盒和100人份/盒2. 性能指标2.1 外观检查外观应平坦，材料附着应结实，各组份应齐全，卡固定严密2.2 物理检查膜条宽应不小于 2.0mm；液体移行速度应不低于 10mm/min2.3 线性范围取同一批号的试剂分别对五个浓度的 N 末端 B 型钠尿肽原参考品进展检测，其检测范围为 0pg/mL～22023.0pg/mL，每份参考品重复检测 3 次，计算相关系数r，其中r 值应≥ 0.99。

2.4 周密度2.4.1 批内周密度随机抽取同一批号的试剂 10 份，分别对同一浓度的 N 末端 B 型钠尿肽原参考品进展检测，其变异系数 CV〔%〕值应≤15%2.4.2 批间周密度随机抽取连续三个批号的试剂，每个批号取 3 份分别对同一浓度的 N 末端 B 型钠尿肽原参考品进展检测，其变异系数 CV〔%〕值应≤15%2.5 准确度用同一批号试剂分别测定三个水平浓度的 N 末端 B 型钠尿肽原参考品，计算样本测定结果均值和相对偏差，其中相对偏差〔Bias%〕应在±15%内2.6 最低检出限2取同一批号的试剂 10 份，对配制参考品基质进展检测，计算样本测定结果均值 X 和标准偏差 SD，其中〔 X +2SD〕≤18pg/mL2.7 分析特异性选择同一浓度的 N 末端 B 型钠尿肽原参考品分别参与胆固醇、甘油三酯、胆红素，使干扰物最终浓度胆固醇 60mg/mL、甘油三酯 40mg/mL、胆红素 2mg/mL，各干扰样本重复检测 3 次，计算样本检测结果的均值和相对偏差，其中相对偏差〔Bias%〕应在±15%内3. 检验方法3.1 外观检查取出试剂，用目测方式观看，结果应符合 2.1 的规定。

3.2 物理检查用游标卡尺检查测试条宽度或观看窗口宽度，以缓冲液作为待测样品，水平放置，用秒表记录液体移行至测试条吸水纸前端或通过观看窗口所需的时间，结果应符合 2.2 的规定3.3 线性范围取同一批号的试剂分别对 N 末端 B 型钠尿肽原浓度为 0pg/mL、250.0pg/mL、7000.0pg/mL、12023.0pg/mL、22023.0pg/mL 的参考品进展检测，每份参考品重复检测 3 次并计算每个浓度的平均值，按公式〔1〕、〔2〕、〔3〕，计算直线方程 y=a+bx，以及相关系数 r，结果应符合 2.3 的要求b =n å X Yi i- å Xi× å Yi...................................................................................(1)n å X 2i- (å X )2i| a |=| å Yi- b å Xin| ..........................................................................................(2)r =n å X Y[n × å X 2 - (å X )2 ][n × å Y 2 - (å Y )2iiiii i- å Xi× å Yi.....................................................(3)式中：b — 回归线的斜率；|a| — 回归线截距确实定值； r — 相关系数；X i — 参考品的实际值；Y i — 参考品的 3 次重复测量均值；i — 1，2，3，…..，n； n — 测定样本数。

3.4 周密度3.4.1 批内周密度试验随机抽取同一批号的试剂 10 份，分别对浓度为 250.0pg/mL 的 N 末端 B 型钠尿肽原参考品进展测定，按公式〔4〕、〔5〕、〔6〕计算平均值 X 、标准差 S 及变异系数 CV〔%〕 值，结果应符合 2.4.1 的要求å Xx = n i .......... .......... .......... .......... .......... ....( 4 )å X 2S = i( å X ) 2-inn - 1.......... .......... .......... ....( 5 )CV (%) =S´100% ………………………………………( 6 )X式中：X — 单次测量值；in — 测量次数3.4.2 批间周密度试验随机抽取连续三个批号的试剂，每个批号取 3 份分别对浓度为 250.0pg/mL 的 N 末端 B型钠尿肽原参考品进展检测，计算 9 份测试卡测定总均值 xT和每个批号测定均值 〔 x , x , x〕，其变异系数 CV〔%〕值按公式〔7〕进展计算，结果应符合 2.4.2 的规定1 2 3CV(%) = (xmaxx )-min´100%..........................................................(7)xT式中：1x max — x, x , x2 3中的最大值； x min — x , x , x中的最小值；1 2 3xT3.5 准确度— 总均值。

用同一批号试剂分别测定浓度250.0pg/mL、7000.0pg/mL、12023.0pg/mL的N末端B型钠尿肽原参考品，每个参考品重复测定3次，计算样本测定结果均值，按公式〔8〕计算相对偏差〔Bias%〕，结果应符合2.5的规定xBias % = (1 - X ) ´ 100 %......... .......... .......... .......... .......... .......... .....( 8)式中：Bias% — 相对偏差；x — 样本测定结果均值；X — 测定样本理论值3.6 最低检出限取同一批号的试剂 10 份，对配制参考品基质进展检测，计算样本测定结果均值 X 和标准偏差 SD，其中〔 X +2SD〕应符合 2.6 的要求3.7 分析特异性选择浓度为 7000.0pg/mL 的 N 末端 B 型钠尿肽原参考品分别参与胆固醇、甘油三酯、胆红素，使干扰物最终浓度胆固醇 60mg/mL、甘油三酯 40mg/mL、胆红素 2mg/mL，各干扰样本重复检测 3 次，计算样本检测结果的均值和相对偏差，依据公式〔8〕计算相对偏差， 结果应符合 2.7 的规定。

注：其它化学试剂均要求分析纯以上级别附录 A主要原材料主要原材料及根本要求如下：主要原材料 厂家根本要求NT-proBNP 单克隆抗体 Meridian Life Science,Inc.纯度＞90％兔 IgG Meridian Life Science,Inc.纯度＞90％抗兔 IgG Meridian Life Science,Inc.纯度＞90％硝酸纤维素膜 德国赛多利斯公司孔径 5.0μm～12.0μm附录 B内控品溯源性资料国内外争论说明，目前市场上检测 NT-proBNP 的方法学很多，由于抗原打算簇与抗体结合的位点各有差异，不同检测系统检测结果之间有确定的差异性，但在整个行业内，化学发光法或电化学发光法是目前较为准确牢靠的测定方法，其方法特异性较好，具有关心诊断价值且适用于动态检测及预后推断我司免疫荧光层析法这一方法学，在行业内没有一个统一的标准，所以内控品的定值需选取一个公认的检测方法，将其靶值转移到本公司的内控品，完成其计量学溯源，从而使常规测定结果可溯源到参考系统所供给的准确性根底上来B.1 我司内控品的制备a) 内控品的来源① NT-proBNP 抗原：取 HyTest 公司的人重组 NT-proBNP 干粉。

② 阴性样本：由南方医科大学第三附属医院供给的乙型肝炎病毒外表抗体〔HbsAg〕、丙型肝炎病毒〔HCV〕和人类免疫缺陷病毒〔HIV〕1/2 型抗体检测均为阴性且丙氨酸氨基转移酶检测值在正常参考值范围内的血清，同时 NT-proBNP 呈阴性b) 前处理阴性样本灭活处理：60℃水浴 30 min，然后 12023 r/min 离心 15 minc) 对采集到的阴性样本进展确认承受罗氏 NT-proBNP 系统进展测定系统进展测定，显示NT-proBNP 阴性用本公司生产的 N 末端 B 型钠尿肽原〔NT-proBNP〕定量检测试剂〔免疫荧光层析法〕，用PC 软件扫描，均无明显峰值d) 量取需要量的阴性血清，以两份阴性血清添加 1 份 5% BSA-PBS 溶液的比例，配制好稀释液，作为最终标化用的阴性血清e) NT-proBNP 干粉承受经确认的阴性血清复融f) 配制共 5 个浓度内控品B.2 内控品定值及验证程序我司配制的内控品应参照《GB/T 21415-2023 体外诊断试剂医疗器械 生物样品中量的测量校准品和把握物质赋值的计量学溯源性》 5.6〔具有制造商选定测量程序，但既无国际商定参考测量程序，也无国际商定校准品，不能在计量上溯源到 SI 的状况〕的要求建立我司内控品的校准传递方案。

B.2.1 NT-proBNP 校准等级和向非一级制造商选定测量程序的计量学溯源物质校准赋值程序实施f〕罗氏全自动电化学发光免疫分析系统测量程序MLg〕万孚工作内控品MLh〕万孚免疫荧光测量程序MLi〕万孚产品内控品MLj〕万孚免疫荧光测量程序制造商和终端用户图 B.1 NT-proBNP 校准等级和向非一级制造商选定测量程序的计量学溯源NT-proBNP 校准传递方案：（1） 罗氏全自动电化学发光免疫分析系统测量程序赋值万孚工作内控品(f→g) 仪器：罗氏全自动电化学发光免疫分析系统试剂：脑利钠尿肽前体检测试剂盒〔电化学发光法〕检验室工作环境：温度为〔25±5〕℃，湿度为 45%～75%（2） 万孚工作内控品校准万孚免疫荧光测量程序(g→h)。